《支原体非人卫》PPT课件.ppt

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1、支原体,第19章,主讲人：中 华 医 学 检 验 全 书 主 编北华大学临床微生物学 教 授 海 南 医 学 院 外聘教授 李影林 2011年4月,目的要求,掌握：支原体的概念和生物学性状，支原体与L型的主要区别。熟悉：肺炎支原体、溶脲脲原体所致 疾病。了解：冷凝集试验的原理和应用。,1.概念 支原体是一群无细胞些壁能独立生存的，介于病毒与细菌之间的原核生物界微生物。2.特点(1)体积很小（200nm）能通过滤菌器。(2)有细胞结构，但无细胞壁，也无胞壁粘肽或其先质。(3)可在无生命的培养基上生长（如营养丰富的琼脂培养基），形成微小菌落。(4)呈二分裂繁殖。,第一节 概述,分 类,目前已知15

2、0余种。其中寄生性支原体有90余种，而人体支原体至少有15种。为软皮体纲（Mollicutes），支原体目（Mycoplamatales），支原体科（Mycoplasmaceae）。无胆甾原体属（Acholeplasma）厌氧原体属（Anaeroplasma）无固醇原体属（Asterolplasma）支原体属（Mycoplasma）：64个种 螺原体属（Spiroplasma）脲原体属（Ureaplasma）：二个种其中对人致病主要有5种，包括：肺炎支原体（M.pneumoniae）人型支原体（M.hominis）生殖器支原体（M.genitalium）穿通支原体（M.penetraus）溶脲

3、脲原体（U.urealyticum）,支原体与细菌L型的区别,肺炎支原体 溶脲脲原体人型支原体生殖器支原体,泌尿生殖系感染、不育症,肺炎,主要致病支原体,第二节 主要致病支原体,一、肺炎支原体（Mycoplasma pneumonia）形态与结构1.G-，不易着染，Giemsa染色呈淡紫色/浅蓝色。2.无固定形状，而呈多形性（球、杆、丝、颗粒、星、螺分枝），其典型形态似酒瓶状。3.结构：无细胞壁，仅有细胞膜。电镜观察：,4.大小：0.20.3m,为原核细胞界微 生物中最小者。可通过除菌滤器。,内外两层蛋白质。细胞由三成结构组成 中层脂质，其中胆固醇 占36%。核糖体Pr合成的重要场所。细胞浆

4、双链环形 DNA。近细胞丝状体尖端有一球状的特殊结构，使支原体粘附于宿主上皮细胞表面。,培养特点1.可在人工培养基上繁殖，但营养要求颇高。2.偏硷环境（pH7.68.0）生长适宜，中性生长较差，酸性被抑制或死亡。但溶脲脲原体除外（pH6.06.5最适宜）。3.有氧无氧均能生长。4.固体培养基：经23d见小的集落犹如“油煎蛋样”集落中央长入培养基中（向内凹陷）边缘扁平贴附在培养基上。5.繁殖速度缓慢（34h一代）繁殖方式多样化。(1)二分裂(2)颗粒型(3)丝状体(4)出芽,生化反应多数分解葡萄糖产酸不产气，一般不分解蛋白质。通常根据能否利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素与其他致病性支原体区别。,抗原

5、构造：颇为复杂。其主要Ag性来自细胞膜。胞膜外层蛋白质是主要型特异性Ag。其抗原性常用生长抑制试验（GIT）和代谢抑制试验（MIT）鉴定。,GIT：将吸有型特异性抗血清的滤纸片贴在接种过支原体的平板上，孵育后，如有抑制生长现象出现，则说明该支原体与血清同型。,MIT：是将支原体接种在含有抗血清的葡萄糖（酚红）培养基中，若抗体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸，酚红不变色。用GIT和MIT可将支原体分成若干血清型。,若相应，则支原体生长、代谢受抑制，酚红不变色,代谢抑制试验（MIT）,生长抑制试验（GIT）,有些和一般细菌的繁殖体相似，但多数比较娇嫩。1.对热、干燥，一般重金属盐类

6、和一般化学消毒剂 敏感2.对表面活性 敏感3.对青霉素、链霉素头孢菌素结晶紫，醋酸铊则有一定的抵抗力。,抵抗力（无细胞壁）,4.对作用于胆固醇的药物（二性霉素B等）和干扰蛋白质合成的药物（强力霉素、氯霉素、红霉素、链霉素等）敏感。,致病性与免疫性,致病物质1.黏附因子P1蛋白的定植作用:可吸附于宿主呼吸道黏膜细胞、红细胞等表面的受体神径氨酸酶上,避免微纤毛运动将其排除。2.毒性代谢产物损害宿主黏膜上皮细胞，出现肿胀，坏死和脱落，微纤毛运动减弱。3.荚膜具有抗吞噬作用，也有毒性。4.糖脂抗原：与宿主细胞有共同抗原决定簇，故可引起变态反应，导致免疫损伤。,所致疾病,支原体肺炎,肺炎，症状轻重不一，

7、婴幼儿较重。成人通常较细菌性肺炎轻，有时无明显症状。支气管炎：陈发性咳嗽，胸部不适。咽炎。鼓膜炎鼓膜出现疱疹、常为出血性的。神经系统及其它系统损伤，少数患者出现脑膜脑炎。,以隐性感染为主，可伴有呼吸道外症状，X线肺部呈羽毛状浸润 传播：飞沫,免疫性 病后免疫力短暂，可反复感染。,以体液免疫为主，细胞免疫也起作用。1.早期感染 单核-巨噬细胞,刺激,产生,急性期炎症因子IL-1和TNFa,可扩张血管；增强吞噬细胞的功能诱导IL-6的产生 诱导肝细胞产生急性期蛋白 激活补体,2.产生的抗体IgG1和IgG2有调理作用 促进单核M的吞噬作用 激活补体。,3.呼吸道黏膜分泌的SIgA有阻止肺炎支原体的

8、吸附作用。4.肺炎支原体与人类心、肺、脑和肾有共同抗原，可引起型变态反应（如溶血性贫血、血小板减少性紫癜、心肌炎、肾炎、脑膜炎和格林巴利综合征）。5.IgG与相应抗原组成免疫复合物引起型超敏反应，如心肌炎和肾炎等。6.肺炎支原体作为超级抗原可激活CD4+T细胞,微生物学检查法,标本的采集通常采集病人咽拭子、鼻拭子、痰、支气管分泌物、含嗽液。其中以拭子为最佳。注意事项：（1）因支原体对热、干燥敏感。取材后应立即接种；（2）如不能立即接种可置于蔗糖磷酸盐缓冲液，4保存72h，-70可长期保存。,检验方法1.标本直接检查（）直接镜检Gram染色G-不易着染。标本涂片 电镜观察无细胞壁易与细菌区别。（

9、）核酸检测：用PCR法快速、敏感、特异操作中应特别小心、防止污染。2.分离培养：慢阳性率不高对临床快速诊断意义不大，但对流行病学调查有一定意义。,3.血清学检查抗体检测。（）ELISA特异、敏感、快速目前常用而可靠方法可检测IgM和IgG。,（）生长抑制试验（）（）代谢抑制试验（）,（）补体结合试验（CF）常用（）间接血凝试验（）冷凝集试验是检测患者血清中冷凝集素的一种非特异性试验。但仅33%76%患者出现阳性。（效价1：64），效价越高或4以上升高，近期感染的可能性大。用病人血清与人O型红细胞或自身红细胞混合4过夜，观察红细胞的凝集现象，37时凝集又分开，即冷凝集试验,.分子生物学检测：快速

10、，敏感性高，特异性强核酸探针、,预 防死疫苗和减毒活疫苗的效果尚不肯定。治 疗红霉素、链霉素、螺旋霉素等。,防治原则,二、溶脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）,是可引起泌尿生殖道感染的病原体生物学性状 1形态结构：基本同肺炎支原体。2培养特点（1）营养要求较高（2）固体培养基 95%N2、5%CO2 形成1550m颗粒状“荷包蛋”样小 菌落（放大200才能见到）3生化反应不分解葡萄糖和精氨酸 脲酶+。4.抗原结构（1）脂多糖Ag。（2）蛋白质抗原。（3）脲酶Ag种特异性Ag。5抵抗力：基本同肺炎支原体。,致病性和免疫性,Uu多寄生在男性尿道、包皮和女性阴道。1.上行

11、引起男性前列腺炎或附睾丸。2.女性阴道炎、宫颈炎并导致流产。3.早产儿及低体重新生儿呼吸道和中枢N系统感染。4.淋病患者损伤泌尿生殖道粘膜，有利于Uu的粘附，故淋病治愈后，有些人仍有症状遗留。,溶脲脲原体引起不孕症的原因,.吸附精子表面，阻碍精子运动；.产生神经氨酸酶样物质，干扰卵子与精子结合；.溶脲脲原体与精子有共同抗原，溶脲脲原体感染刺激机体产生的抗体对精子产生损伤。,微生物学检查法,1标本的采集（1）非淋菌性尿道炎患者中段尿。（2）慢性前列腺炎患者前列腺液。（3）原因不明的不育症患者精液。（4）阴道炎、宫颈炎患者炎性分泌物、羊水、血液。标本离心取沉淀物送检。,检验方法1.标本直接检查（1

12、）核酸检测PCR法。快速简便、稳定可靠、敏感性高。（2）ELISA特异性强、较敏感，有早期诊断意义。（3）免疫斑点试验（IDT）：利用免疫斑点试验检测抗原提取物和Uu培养物。敏感、特异性强、快速，不需特殊仪器，易于推广。,2.分离培养标本 接种于 pH6.0含酚红和尿素的液体培养基 37 观察颜色变化.3.抗体检测意义不大。,注意性卫生，感染者用强力霉素，红霉素，氯霉素等,防治原则,三、穿透支原体（M.Pentrans，MPe）,人们越来越证实MPe是加速AIDS进程的辅助致病因素。1形态结构杆状或长烧瓶状结构与肺炎支原体相似2培养特点（1）营养要求高，培养基中需加血清。（2）生长缓慢。（3）

13、在改良SP-4培养基上菌落呈“荷包蛋”样。（4）液体培养基：无明显的混浊或沉淀，呈透明状。3生化反应：发酵葡萄糖，水解精氨酸，但不分解尿素。4Ag构造与其他支原体不同。5抵抗力：红霉素、四环素、林可霉素敏感，但对青霉素不敏感。,致病性与免疫性,1致病因素（1）MPe的尖形结构具有粘附和穿入或动物的红细胞、淋巴细胞和单核细胞，在细胞中大量复制，导制细胞受损和死亡。（2）MPe对HIV感染者T细胞的作用，可促进HIV的复制和病程发展。（3）MPe对诱导肿瘤坏死因子TNF-（由巨噬细胞产生）的表达可能也是造成损伤细胞的主要因素。2所致疾病：多数人认为Mpe感染是艾滋病的辅助致病因素。,微生物学检查法,1标本的采集取材对象为AIDS患者和HIV感染者。（1）咽部粘液（2）AIDS患者组织块作免疫组化或电镜技术检测。,37 每天观察颜色有无变化如由红变黄透明、无沉淀视培养可疑阳性再用滤过，滤液转种传代，当培养基颜色再次由红变黄则认为“初代培养阳性”。（2）生化反应葡萄糖发酵试验 精氨酸水解试验 脲素酶试验（3）代谢抑制试验（MIT）（4）PCR,防治原则要预防艾滋病等继发性免疫缺陷病。治疗用大环内酯类抗生素。,思考题,名词解释：支原体问答题：1、请比较支原体和细菌L型的主要区别？2、常见的支原体主要有哪几类？分别引起什么疾病？,