《嗜酸粒细胞计数》PPT课件.ppt
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1、嗜酸性粒细胞计数P36,临床检验基础教研室程杨艳,嗜酸粒细胞起源于骨髓多能造血干细胞,为髓系干细胞分化而来的嗜酸粒细胞祖细胞(CFU-EO)所产生。功能:(1)微弱的吞噬作用,基本无杀菌力;(2)主要作用是限制过敏反应的作用:抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞;吞噬其释放颗粒;分泌组胺酶破坏组胺;(3)参与蠕虫的免疫反应。,嗜酸性粒细胞的趋化因子其来源,从嗜碱性粒细胞和肥大细胞来源的组胺;从补体来的C3aC5a;从致敏淋巴细胞来的嗜酸性粒细胞的趋化因子;从寄生虫来的嗜酸性粒细胞的趋化因子;某些细菌来的嗜酸性粒细胞的趋化因子;从肿瘤来的嗜酸性粒细胞的趋化因子。趋化因子E,嗜酸性粒细胞绝对数=WBCE%其
2、中E%(嗜酸性粒细胞分类的比值)不准,进推算的绝对值误差较大;故为达到准确计数嗜酸性粒细胞的目的,须做嗜酸性粒细胞直接计数。,原理 用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时使红细胞和大部分其他白细胞被破坏,并将嗜酸粒细胞着色,充入计数板,低倍镜下计数2个计数池共10个大方格内的嗜酸粒细胞数,经换算求得每升血液中的嗜酸粒细胞数。,器材 采血针、干棉球、75%酒精棉球 试管、吸量管 计数板、显微镜,试剂 特点:为低渗溶液,可使红、白细胞溶解破裂;含对E的保护剂,如乙醇、乙二醇、丙酮;并使E颗粒染色而被识别。,下列试剂任选一种:1.伊红-丙酮稀释液 2.溴甲酚紫稀释液 3.Hinkelman稀释液
3、 4.乙醇-伊红稀释液 5.皂素-甘油稀释液 6.固绿稀释液,操作 0.38ml稀释液20l血混匀RBC溶解后混匀充池(2个)静置2-5min镜下计数10个大方格E的数目。计算 E/L=10大方格E的数20106=0.02N109/L参考值 109/L,注意事项,1.本实验必须在1h内完成,否则细胞被破坏,结果偏低;2.及时混匀,不能过分振荡,以免细胞破坏;3.统一采血时间,以免受生理变化;,4.注意与N区别,以免结果偏高;(N着色浅,颗粒小)5.含乙醇、丙酮等保护剂会挥发,应注意其变化;6.溴甲酚紫在酸性或中性时为橙黄色,在碱性显蓝,故器具要防酸。,方法学评价,1显微镜计数法 所需设备简单,
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