《脱落细胞检验》PPT课件.ppt
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1、,学 习 目 标,1.学习脱落细胞的概念2.说出脱落细胞检验的优势与不足3.叙述正常复层鳞状上皮各层脱落细胞形态特征4.叙述正常柱状上皮脱落细胞形态特征5.说出脱落细胞显微镜检查操作步骤。6.叙述脱落细胞显微镜检查的方法及报告方式。,返 回,学 习 目 标,返 回,7.说出上皮细胞的退化变性的概念与分类。8.说出增生、再生、化生、分化和逆分化的定义。9.叙述核异质细胞的概念、形态特征及临床意义。10.说出恶性肿瘤细胞的细胞类型及主要形态特征。,返 回,本章目录,返 回,脱落细胞:是指从人体各组织、器官,特别是管腔器官内表面脱落的上皮细胞。脱落细胞检验:是将采集到的人体某部位的脱落细胞,经染色后
2、通过镜下对其类别、形态的观察和对病变性质的分析协助临床诊断疾病的一门学科,也称临床细胞学。,第一节 脱落细胞检验的基本知识,返 回,根据细胞标本来源的不同又可分为两大类:脱落细胞学 针吸细胞学,第一节 脱落细胞检验的基本知识,返 回,脱落细胞检验评价 优势:1方法简便易行,容易掌握。2对设备要求不高,费用低,易推广。3患者痛苦少或无痛苦,乐于接受。4取材方便,可反复取材,不影响治疗。5诊断迅速,检出率高。,第一节 脱落细胞检验的基本知识,返 回,脱落细胞检验评价 不足:1检查属抽样性取材,因此取材不准或制片过厚或过薄均可影响诊断。2脱落细胞常有退变、易受人为因素的影响。3涂片中看不到组织结构的
3、改变,故诊断准确性受一定影响,病变分型较困难。,第一节 脱落细胞检验的基本知识,返 回,脱落细胞检验评价 不足:4.脱落细胞学诊断难度较大,需要有经验的医生复验。遇到可疑应重复取材,仔细观察或无把握病例应重复取材,仔细观察。5.有一定的误诊率,易出现假阴性或假阳性。,第一节 脱落细胞检验的基本知识,返 回,正常脱落上皮细胞形态 复层鳞状上皮细胞:主要分布在皮肤、口腔、食道、阴道、子宫颈管外口、喉部、鼻咽部等部位。柱状上皮细胞:主要分布于鼻腔、鼻咽、支气管树、胃、肠、子宫颈管、子宫内膜及输卵管部位。,第一节 脱落细胞检验的基本知识,返 回,正常脱落上皮细胞形态 1.复层鳞状上皮:一般由多层细胞组
4、成,由于表面的细胞为扁平似鳞形,所以又称复层扁平上皮。,第一节 脱落细胞检验的基本知识,返 回,中层,基底层,内底层细胞,外底层细胞,角化前细胞,不完全角化细胞,完全角化细胞,中层细胞,返 回,表层,复层鳞状上皮细胞形态变化规律(从深部到表浅部),1.细胞体积由小到大;2.细胞核由大到小,最后固缩、碎解而消失 3.胞核胞质比由大到小;4.核染色质由细致疏松到粗糙紧密;5.胞质量由少到多,胞质受色由蓝绿色到红色(Pap染色)或由暗红色到浅红色(HE染色)。,返 回,复层鳞状上皮细胞示意图,返 回,A 内底层细胞 B 外底层细胞 C 中层细胞D 角化前细胞 E 不完全角化细胞 F 完全角化细胞 复
5、层鳞状上皮各层脱落细胞示意图,返 回,底层细胞(HE染色),返 回,表层细胞(HE染色),返 回,底层细胞(巴氏染色),返 回,表层细胞(巴氏染色),返 回,表层不完全角化细胞(巴氏染色),返 回,第一节 脱落细胞检验的基本知识,正常脱落上皮细胞形态 2、柱状上皮细胞:根据形态和功能 不同分为:纤毛柱状上皮细胞 粘液柱状上皮细胞,返 回,正常纤毛柱状上皮细胞示意图,返 回,正常纤毛柱状上皮细胞示意图,返 回,正常粘液柱状上皮细胞示意图,返 回,正常粘液柱状上皮细胞示意图,返 回,第一节 脱落细胞检验的基本知识,正常脱落上皮细胞形态 3.成团脱落的上皮细胞:(1)鳞状上皮细胞团(2)纤毛柱状上皮
6、细胞团(3)粘液柱状上皮细胞团,返 回,成团脱落的上皮细胞示意图,返 回,非上皮细胞(又称背景细胞),1.红细胞 5.浆细胞 2.中性粒细胞 6.巨噬细胞 3.嗜酸性粒细胞 7.组织细胞 4.淋巴细胞 8.多核巨噬细胞,返 回,红细胞,涂片背景成分,下一页,返 回,(一)标本采集与染色 标本采集 根据标本采集的部位不同,常用以下几种方法:1.直视采集法 2.自然分泌液的采集法(1)痰液涂片检查(2)尿液涂片检查,第二节 脱落细胞显微镜检查,返 回,(一)标本采集与染色(3)乳头溢液涂片检查(4)前列腺液涂片检查(5)阴道分泌物涂片检查 3.灌洗法 4.磨擦法 5.针穿抽吸法,第二节 脱落细胞显
7、微镜检查,返 回,(二)涂片制备、固定与染色,1.涂片制备(1)涂片要求:1)保证标本新鲜,取材后尽快制片。2)操作要轻巧,避免挤压,防止损伤细胞。,第二节 脱落细胞显微镜检查,返 回,(1)涂片要求:3)玻片要清洁无油渍,先用硫酸洗涤液浸泡、流水冲洗,再用75%乙醇浸泡、擦干。4)含蛋白质的标本可直接涂片。缺乏蛋白质的标本,涂片前先在玻片上涂薄层粘附剂,以防止染色时细胞脱落。常用粘附剂为蛋白甘油,由等量的生鸡蛋蛋白和甘油混合而成。,第二节 脱落细胞显微镜检查,返 回,(1)涂片要求:5)每位患者的标本至少涂两张涂片,以避免漏诊。涂片后立即在玻片一端标上编号。(2)涂片制备方法:1)推片法:取
8、离心后标本一小滴滴在玻片偏右侧端,用推片与载玻片形成30夹角将玻片上液体轻轻向左推制成薄膜。此法用于稀薄的标本,如血液,胸、腹水、尿液等。,第二节 脱落细胞显微镜检查,返 回,(2)涂片制备方法 2)涂抹法:用竹棉签在玻片上涂布,由玻片中心经顺时针方向外转圈涂抹;或从玻片一端开始平行涂抹,涂抹要均匀,不宜重复。此法适用于稍粘稠的标本,如食道和宫颈黏液及痰液等标本。,返 回,(2)涂片制备方法:3)喷射法:用配细针头的注射器将标 本从左至右反复均匀地喷射在玻片上。此法适用于吸取的液体标本。4)印片法:将切取的病变组织用手术刀切开,立即将切面平放在玻片上,轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。
9、,返 回,(2)涂片制备方法:5)拉片法:本法适用于粘稠的痰液制片。选取带血的或灰白色痰丝置于玻片上,用另一张玻片用力压在上面,使痰丝散开,然后向一侧抽拉上面的玻片,在玻片上留下较均匀的痰液涂片。,返 回,(2)涂片制备方法:6)液基法:近年,开始采用液基细胞学检测(LBC)制备细胞学涂片。该法主要用于宫颈细胞学检验,具有视野清晰、细胞结构清楚、病变检出率高的特点,已在各级医院较广泛应用。,返 回,标本采集与染色 2.固定 固定的目的是保持细胞自然形态,防止细胞自溶和细菌所致的腐败,固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破坏细胞内溶酶体酶,使细胞不但保持自然形态,而且结构清晰,易于着色。,返 回,标
10、本采集与染色 2.固定(1)常用固定液:1)乙醚酒精固定液:取乙醚和95%乙醇各49.5ml混合,加入冰乙酸1ml混匀即可。该固定液渗透性较强,固定效果好,适用于一般细胞学的常规染色。2)95%酒精固定液:制备简单,但渗透作用稍差。适用于门诊和大规模防癌普查。,返 回,(2)常用固定方法:1)滴加法:将涂片置于染色支架上,任其自然干燥后,直接滴加固定液数滴,盖满整个涂片膜。因固定液量少,效果较差。2)浸入法:把即将干燥的涂片直接浸入固定液内,因固定液充足,固定效果较好。但细胞易脱落而发生交叉污染,因此应该分瓶固定,固定液回收时应过滤。此法适用于大量标本的检查。,返 回,标本采集与染色(3)固定
11、时间:一般为1530min。含粘液较多标本,如痰液、阴道分泌物、食管拉网等固定时间要适当延长;尿液、胸、腹水等涂片若不含粘液,固定时间可酌情缩短。,返 回,标本采集与染色 3.巴氏染色法 巴氏染色法的特点是细胞具有多色性染色效果,色彩鲜艳多样。涂片染色的透明性好,胞核结构清晰,胞质颗粒分明。,返 回,3.巴氏染色法 试剂(1)赫氏(Harris)苏木精染液(2)橘黄G6染液(3)EA36及EA65染液(4)稀碳酸锂溶液(5)0.5%稀盐酸溶液。(6)95%、80%、70%、50%不同浓度的乙醇溶液。,返 回,3.巴氏染色法 染色步骤(1)加水(2)染核(3)分色(4)脱水(5)染胞质(6)脱水
12、透明(7)封片,返 回,3.巴氏染色法 染色结果 各种细胞的核染成深蓝紫色或紫红色,上皮细胞的胞质根据细胞的种类和分化程度不同可染成各种不同的颜色。底层细胞染蓝绿色,中层细胞染蓝色,表层角化前细胞染淡蓝色,角化细胞染浅红色或浅黄色。柱状上皮胞质常染淡蓝色。,返 回,标本采集与染色(4)苏木素-伊红(HE)染色法:原理 同巴氏染色法,只是单用伊红染细胞质。本法多用于组织病理学检查及痰涂片细胞学检查。试剂 除伊红染液外,其他试剂同巴氏染色法,返 回,标本采集与染色(4)苏木素-伊红(HE)染色法:染色方法(1)按巴氏染色法进行加水、染核、分色、蓝化,然后放50%乙醇中lmin。(2)置伊红染液中2
13、4min,取出用水冲洗,干燥后加石蜡油镜检。,返 回,标本采集与染色(4)苏木素-伊红(HE)染色法:染色结果 细胞核呈紫蓝色,胞质淡玫瑰红色,红细胞呈淡朱红色。苏木素-伊红染色的特点:透明度好,核与胞质对比鲜明。染色步骤简便,效果稳定。,返 回,涂片观察及报告方式(一)镜检时首先要用低倍镜按一定顺序仔细观察全片 发现可疑细胞时,再转换高倍镜和油镜仔细观察细胞核的改变、胞质及细胞群的变化。对可疑细胞、典型细胞,应做好位置标记,以便在会诊、比较、复查、讨论或教学时查找。,返 回,A 错误的玻片移动方法 B 正确的玻片移动方法涂片的观察方法示意图,返 回,涂片观察及报告方式(二)细胞学诊断报告方式
14、 1.直接法:多用于有特异性细胞学特征,且又较容易确诊的疾病。可根据细胞形态,结合临床资料,直接提出疾病的诊断意见。如慢性宫颈炎、脂肪瘤、淋巴肉瘤等。,返 回,涂片观察及报告方式(二)细胞学诊断报告方式 2分级法:(1)二级法 阴性未找到肿瘤细胞;阳性找到肿瘤细胞。,返 回,涂片观察及报告方式(2)三级法 阴性涂片中仅为正常及炎症变性细胞。报告未找到肿瘤细胞;可疑-涂片中找到一些异型细胞,不能肯定为癌细胞。报告找到可疑肿瘤细胞;阳性发现典型的肿瘤细胞。报告找到肿瘤细胞。,返 回,涂片观察及报告方式(3)四级法 阴性涂片中仅为正常及炎症变性细胞报告未找到肿瘤细胞;核异质(非典型增生)细胞涂片中找
15、见异型细胞倾向于真正的核异质细胞,但不能排除高度异型的炎症变性细胞及不典型的癌细胞。报告找到核异质细胞。,返 回,涂片观察及报告方式 癌疑涂片中找到一些重度核异质细胞,基本符合癌细胞的标准,但因数量过少或形态不典型,所以不能排除癌细胞的可能性。报告找到可疑癌细胞。阳性发现肯定的肿瘤细胞。报告找到肿瘤细胞。,返 回,涂片观察及报告方式(4)改良巴氏五级分类法(多用于子宫颈刮片脱落细胞的检验):I级:涂片未见异常细胞或不正常细胞(基本正常)。级:涂片内见异常细胞但均为良性。a:有轻度核异质细胞,变形细胞等。,返 回,涂片观察及报告方式 b:有中至重度核异质细胞,属于癌前期病变,需定期复查。级:有可
16、疑癌(恶性)细胞,形态明显异常,难以肯定良、恶性,需复查。,返 回,涂片观察及报告方式 级:有癌细胞,但不够典型或数量极少,需进一步证实。V级:有癌细胞。形态典型且数量较多,如有可能区分其组织学分型。,返 回,涂片观察及报告方式(5)TBS系统描述性诊断报告内容(用于宫颈细胞学诊断):1988年由美国提出,旨在替代巴氏五级报告系统,以利于细胞学检验与临床的沟通。2001年又对TBS作了必要的修改,制定了TBS-2001命名系统。,返 回,涂片观察及报告方式 1)无上皮内病变或恶性病变:应叙述有无微生物或其他非肿瘤性细胞,包括各类微生物感染和其他非肿瘤性病变,如炎症、宫内节育器及放疗后的反应性和
17、修复性改变。,返 回,涂片观察及报告方式 2)鳞状上皮细胞异常:非典型鳞状上皮细胞:包括意义不明确的不典型鳞状上皮细胞(ASC-US)和不除外高度鳞状上皮细胞内病变的非典型鳞状上皮细胞(ASC-H);,返 回,涂片观察及报告方式 低度鳞状上皮内病变(LSIL):包括人乳头状瘤病毒(HPV)感染和轻度非典型增生(CIN1)的细胞改变;高度鳞状上皮内病变(HSIL):相当于CIN2、CIN3或中、重度非典型增生及原位癌的细胞改变;鳞状细胞癌。,返 回,涂片观察及报告方式 3)腺上皮细胞异常:非典型腺细胞,性质未定,但非炎症所致,应标明来源;非典型腺细胞,倾向于肿瘤。应明确是否来自宫颈管,其余则不能
18、确定来源;腺癌,分为子宫颈管型及子宫内膜型。4)来源于子宫外的各种肿瘤。,返 回,小 结,脱落细胞学检验属于临床细胞学检验范畴,它是将采集到的人体某部位的脱落细胞,经染色后通过显微镜下对其类别、形态进行观察,从而分析和判断病变性质,协助临床诊断疾病的一门学科。,返 回,学习脱落细胞学检验首先要了解正常人体脱落上皮细胞的形态特征,故本节主要介绍了复层鳞状上皮细胞和柱状上皮细胞的正常形态特征。脱落细胞显微镜检查的主要步骤是标本采集与染色、涂片观察及报告。,返 回,目标形成性检测,返 回,请您练习,单选题 1.下列全部为鳞状上皮细胞覆盖的器官是 A.胃 B.子宫颈管内口 C.子宫内膜 D.子宫颈 E
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