《细菌的单染色》PPT课件.ppt

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1、微生物学实验（一）概述&油镜的使用&细菌的形态观察,指导老师：冯翊果老师 和 谷峻老师 Tel：156 2640 8384E-mail：,总体要求和安全规范实验安排和成绩的评定第一次实验：油镜的使用 细菌形态观察,本次课的内容,总体要求,进实验室须穿实验服，不得穿拖鞋、短裤或者裙子，不得在实验室内进食，不得喧哗；实验前预习，尽量熟悉实验内容；实验中规范操作、及时记录；垃圾丢到垃圾盒内，保持实验室整洁；实验器具和公用试剂用完后，应立即放回原处；实验过程保证安全独立完成实验报告,保证安全,酒精灯装量不得超过2/3，也不得少于1/3，不得用酒精灯点燃另一台酒精灯，酒精失火时用湿布掩盖，或者使用灭火器

2、；用电炉时一定要垫石棉网；使用高压灭菌锅时一定要有专人看管；使用紫外线时，注意防护：不可裸眼注视，不可在紫外线下直接操作。,拔除保险栓，握紧把手，对准火焰喷射。,实验报告,姓名、班级和学号实验题目实验原理（略写）实验操作（略写）实验结果（重点）画图(注明图标、放大倍数、各部分名称）文字描述分析和讨论（重点）思考题,酿酒酵母形态结构（100 10），美蓝染色法,母细胞,液泡,芽体,实验安排与成绩评定,实验安排第0215周 基础实验第16周 考核,成绩评定平时成绩：50分，包括出勤、实验操作、课堂表现和实验报告 综合实验：50分,基础实验安排,微生物制片染色技术微生物显微观察技术,培养基配制消毒灭

3、菌技术,微生物无菌接种、分离、纯化技术,微生物数量测定微生物培养技术微生物生长研究方法,微生物实际应用,第1-2次，细菌的制片和形态观察 第3、10次，细菌的革兰氏染色；酵母菌形态结构观察；第4-6次，丝状微生物（霉菌和放线菌）制片与形态结构的观察,第7次，培养基的制备和消毒灭菌,第8次，微生物无菌接种、分离和纯化,第9次，水中细菌总数测定第11次，细菌的生理生化实验第12次，环境对微生物生长的影响,第3次、馒头的制作和甜酒的酿制,第一次实验 细菌的形态观察,教学目标或要求：1、学习和掌握显微镜油镜的正确使用；2、观察和区分细菌的3种形态（球菌、短杆菌、长杆菌）；,显微镜油镜的重要参数,显微镜

4、油镜的使用,镜筒长度,数值口径（NA）,工作距离mm,显微镜油镜头的识别,放大倍数,盖玻片厚度,油镜物镜的工作原理,使用油质作为玻片与接物镜之间的介质油浸系,可以增加显微镜的放大倍数,可以增加视野的照明度,可以增大显微镜的分辨率,能分辨的两点之间最小距离D,油镜的使用方法和注意事项,0、注意区分油镜和高倍镜，二者混用将导致经济损失！（￥7999.84-1992年购）1、用低倍镜对光。最大光圈2、低倍镜观察（寻找观察目标），适当缩小光圈3、高倍镜观察（选取理想的观察目标）。4、油镜观察（特别注意需要来回调整光圈大小以获得最佳的视野明暗对比）5、观察完毕后，降下载物台，转动转换器，使油镜头位于前方

5、，用干净擦镜纸擦去镜头上的石蜡油。(如使用香柏油，需再取一张擦镜纸醮上二甲苯擦去镜头上残留的香柏油，最后再用一张干净的擦镜纸擦去残留在镜头上的二甲苯；）。6、将显微镜各部分还原，放回箱中，做好记录，锁好箱门。,如何用油镜观察？,高倍镜下，把目标移到视野中心。,降下载物台，转换油镜。,在载玻片上加一小滴油,小心地升起载物台，使油滴和油镜头刚好接触。,用细螺旋调节，使物象出现，并调节光源亮度和光圈，使成像清晰。,观察并记录,细菌简述,单细胞、无分支的原核微生物；,大小：大多直径1 m左右,三种形态：球菌、短杆菌、长杆菌（演示）,碱性染料（basic dye）带正电染料。其阳离子部分为发色基团，可与

6、细胞中带负电的组分结合。如结晶紫沙黄,甲基蓝,碱性复红等。酸性染料（Acid dye）带负电染料。其阴离子部分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。如刚果红、酸性复红 等。脂溶性染料如Sudan black。,染 料：,细菌的制片与染色,涂片,干燥,固定,细菌的制片与单染色,细菌的制片,染色12min,水洗、干燥,镜检,实验内容,用显微镜油镜观察苏云金杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌装片（S、J、D）。记录图像。记录各个镜头的工作距离。,问题是否可以不经过低倍镜高倍镜，而直接用油镜观察？,金黄色葡萄球菌：球菌，直径1m,苏云金芽孢杆菌：长杆菌，有时呈链状排列）,实验报告,将观察结果拍照分析讨论和作业列举实验指导中出现的10种危险药品，并列出其危害、应急处理方法和保存注意事项（表格形式）。请写出酒精灯、显微镜（包括油镜）使用过程中的注意事项，并配图说明。请配图描述本次实验观察的三种形态细菌，说明它们在显微镜观察结果中，形态上的区别。,根据细菌的大小和植物细胞大小比较，在显微镜不同放大倍数下观察到的细菌应该是怎样的情况？如何判断观察到的是目标菌而不是杂质？,用油镜不能观察到目标,观察目标不在视野内,没有调好焦距,镜头不干净,光线没有调好,注意：在进行微生物显微观察时，一定要区分微生物和杂质,显微镜油镜的使用,