《拓展与练习》PPT课件.ppt

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1、小沟,大沟,两条DNA链反向平行，一条走向是53，另一条走向是35。,DNA复制子及复制过程：,DNA复制是从复制子起点开始的。合成的方向是 53。,高等生物染色体DNA的复制一般是多复制子,一个复制点与它的两个终止点组成一个复制子,一个DNA上可以有多个复制子.,原核生物染色体DNA的复制一般是单复制子,DNA测序仪显示的碱基排列顺序,人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。人的单倍体基因组由24条双链的DNA分子组成（包括122号染色体DNA与X、Y染色体DNA），上边有30亿个碱基对，估计有35万个基因。人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核甘酸序列.其主要内容包括,绘制人类

2、基因组的四张图，即遗传图、物理图、序列图和转录图。绘制这四张图好比是建立一个“人体地图”，沿着地图中一个个路标，如“遗传标记”、“物理标记”等，可以一步步地找到每一个基因，搞清楚每一个基因的核苷酸序列。,体内DNA复制的条件?,PCR技术的原理:聚合酶链式反应,解旋酶,DNA母链,4种脱氧核苷酸,DNA聚合酶,引物（RNA）,打开DNA双链,模板,合成子链原料,催化子链合成,使DNA聚合酶能从引物3端开始连接脱氧核苷酸,变性（80-100）,Taq聚合酶（耐高温）,1530个核苷酸构成DNA或RNA,思考：体外扩增DNA 如何进行？,体内 体外,PCR技术的原理,利用DNA分子的热变性原理，通

3、过控制温度来控制双链的解聚与结合，从而完成体外DAN分子的扩增。体外DNA复制的条件：四种脱氧核苷酸、耐高温的聚合酶、引物、模板复制的方向：子链的5 端向 3端延伸,DNA 分子的热变性原理,变性的目的：,复性的目的：,解开双链,有利于引物与两条单链的结合,TaqDNA聚合酶：热稳定性，具有逆转录活性。,PCR的反应过程,每个循环包括：变性 复性延伸,温度（）,时间（min）,947260,94变性（1min）,60 退火（1min）,72 延伸（1.5min）,循环1 循环2 循环3,PCR反应的温度循环周期 PCR 反应的每一个温度循环周期都是由DNA变性、引物退火和反应延伸三个步骤完成的

4、。图中设定的反应参数是94变性1min，60 退火1min，72 延伸1.5min。如此周而复始，重复进行，直至扩增产物的数量满足实验需求为止。,PCR技术与体内DNA复制的区别：,1.PCR不需要解旋酶；体内DNA复制需要；,2.PCR需要耐热的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶），而生物体内的聚合酶在高温时会变性；,3.PCR一般要经历三十多次循环，而生物体内DNA复制需要生物体自身的复制。,练习1、下图是DNA复制的有关图示。ABC表示大肠杆菌的DNA复制。DF表示哺乳动物的DNA分子复制片段。图中黑点表示复制起点，“”表示复制方向，“”表示时间顺序。（2）哺乳动物的DNA分子展开可达2m之长，若按AC的方式复制，至少8h，而实际上约6h左右，根据DF图分析，是因为_。（3）AF均有以下特点：延伸的子链紧跟着解旋酶，这说明DNA分子复制是_。（4）C与A，F与D相同，C、F能被如此准确地复制出来，是因为_。,（1）若A中含有48502个碱基对，而子链延伸速率是105个碱基对/s，则此DNA分子复制约需30s，而实际上只需约16s，根据AC图分析，这是因为_。,复制是双向进行的,从多个起点同时进行复制,边解旋边复制,DNA分子独特的双螺旋结构为复制提供精确的模板，碱基互补配对原则保证DNA分子复制的准确无误,