《基因工程主打》PPT课件.ppt
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1、第三节,知识要点:1 知道基因工程的概念2 知道基因操作的工具和基本步骤3.知道基因工程所取得的成果和发展前景,基因工程简介,基因工程简介,实例:用大肠杆菌生产人的胰岛素,操作步骤:将人的胰岛素基因转移到大肠杆菌中,通过微生物的发酵使大肠杆菌表达人的胰岛素基因,从而获得人的胰岛素。,通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向改造生物的遗传性状。,.基因工程的概念,这种技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所
2、需要的基因产物。,问题1 怎样获得人的胰岛素基因?目的基因的提取,问题2 怎样将目的基因导入到受体细胞中?目的基因与运载体结合,问题3 怎样将重组质粒导入到受体细胞中?将目的基因导入到受体细胞,问题4 目的基因是否在受体细胞中表达?目的基因的检测和表达,基因操作的工具,(1)基因的剪刀限制性内切酶存在:主要存在于微生物作用与特性:一种酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的内切点切割DNA分子。种类:200多种,(2)基因的针线DNA连接酶两条DNA末端之间的缝隙“缝合”起来。,目前常用的两类运载体,一类是细菌的质粒,它是细菌染色体DNA以外的小型环状DNA(一般有1-200kb,kb为千碱
3、基对),有的细菌只有一个,有的细菌有多个,第一类是噬菌体和某些病毒的DNA。,一般来说,天然运载体往往不能满足人类的所有要求,因此人们根据不同的目的和需要,对某些天然的运载体进行人工改建。,(3)基因的运载工具运载体,使用运载体的目的,一是用它作为运载工具,将目的基因送到宿主细胞中去,运载体应具备的三个条件,(1)能在宿主细胞内稳定保存并大量复制含复制起始点,(2)有多个限制酶切点,以便与外源基因连接克隆位点,(3)具有某些标记基因,以便进行筛选,质粒是否导入,目的基因是否插入,实验:模拟重组DNA,获取目的基因的方法,mRNA,单链DNA,逆转录,双链DNA,合成,DNA片段扩增,目的基因细
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