《体液蛋白质检验》PPT课件.ppt

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1、体液蛋白质的检测,了解血浆蛋白质组成、功能及分类。熟悉一些重要血浆蛋白质。掌握疾病时血浆蛋白质变化掌握体液蛋白质测定,免疫功能:IgA、IgG、IgM、C3、C4、Kap、Lam、IgG subclasses 1-4、IgE、C1抑制物肾脏功能:白蛋白、转铁蛋白、IgG、a1-微球蛋白、B2-微球蛋白、a2-巨球蛋白、Kap-轻链、Lam-轻链、Cystatin C炎症:CRP、a1-酸性糖蛋白、触珠蛋白、a1-抗胰蛋白酶、铜兰蛋白、纤维蛋白原、SAA类风湿性疾病:RF、ASL、CRP、ADNaseB心血管疾病:ApoA-I、ApoB、ApoA II、ApoE、Lp(a)、肌红蛋白、纤维蛋白原

2、、hsCRP营养监测:前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白出/凝血疾病:纤维蛋白原、AT3、纤溶酶原贫血:触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、可溶性转铁蛋白受体,涵盖最广泛的临床检测指标,检验学部属于蛋白质的实验项目,生化室：总蛋白，白蛋白，球蛋白，载脂蛋白A1，载脂蛋 白B，前白蛋白，脂蛋白（a），高密度脂蛋白，低密度脂蛋 白，极低密度脂蛋白，血清蛋白电泳（白蛋白，1、2、球蛋白），血尿2微球蛋白，糖化血红蛋白，肌钙 蛋白-T，24小时尿蛋白定量，尿微量白蛋白，酶类。血凝室：纤维蛋白原，AT-（2-球蛋白），各种凝血因 子除第因子（Ca2+）均为蛋白质，FDP,D-D是纤维蛋白 降解产

3、物。,免疫室 免疫球蛋白IgM,IgG,IgA,C反应蛋白，前S1蛋白、类风湿因子 肝炎抗原抗体类：HAV-IgM，HBSAg,HBSAb,HBEAg,HBEAb,HBCAb-IgM,HBCAg-IgG,丙肝抗体，戊肝抗体 肿瘤标志物：细胞角质素抗原211，铁蛋白，甲胎 蛋白，激素类:催乳素(PRL)，促黄体生成素(LH)，促卵泡生成素(FSH)，促甲状腺激素(TSH),胰岛素，补体类：C3,C4,检验学部属于蛋白质的实验项目,一、血浆蛋白质的组成、功能及分类,1、血浆蛋白质的组成：2、血浆蛋白质的功能：营养作用 维持胶体渗透压维持正常PH 运输作用免疫与防御功能催化作用抑制组织蛋白酶代谢调节

4、凝血、抗凝血及纤溶作用。,氨基酸性质：两性电离及等电点、紫外吸收、呈色反应。生物大分子：胶体性质、变性、沉淀和凝固等特点。,蛋白质性质,蛋白质的分离,透析、沉淀、盐析、电泳、层析、超速离心,血浆蛋白质的分类,根据分离方法：盐析法：白蛋白和球蛋白两大类（各种蛋白质的亲水性和所带的电荷均有差别。）电泳法（醋酸纤维素薄膜）：白蛋白、1球蛋白、2 球蛋白、球蛋白、纤维蛋白原、球蛋白。,3、血浆蛋白质的分类,白蛋白（4060）1-球蛋白（1-抗胰蛋白酶、血清类粘蛋白、1-酸性糖蛋白、甲胎蛋白）2-球蛋白（-脂蛋白、触珠蛋白、铜蓝蛋白、2-巨球蛋白）-球蛋白（转铁蛋白、血红素结合蛋白、微球蛋白、纤维蛋白原

5、、脂蛋白、补体）-球蛋白（各种免疫球蛋白主要位置及C-反应蛋白）,电泳法分类,根据生理功能分类：,1、白蛋白（albumin,Alb)肝实质细胞合成，分子量66 458，半衰期1519天，是血浆中含量最多的蛋白质，占4060。在肝细胞中没有贮存。分子结构1975年阐明，含585个氨基酸残基的单链多肽，分子量66458，含17个二硫键（SS），不含糖的组分。,二、一些临床常检测血浆蛋白质,由于白蛋白在血浆中浓度高而且分子量小，其主要生理功能是维持血液胶体渗透压（血液中80的渗透压是由白蛋白承担的)/缓冲酸碱。另外，白蛋白能结合诸如胆红素之类的疏水分子。在体内担负转运各种离子、酶类、脂溶性物质、激

6、素和药物的功能。在机体营养作用中也起重要作用（内源性氨基酸）。参考范围：血清白蛋白3555gL,1）血液中的白蛋白,临床意义可以作为个体营养状态的评价指标血浆白蛋白明显减少时，可以影响许多配体在循环血液中的存在形式；白蛋白增高较少见，在严重失水时，对监测血浓缩有诊断意义；,白蛋白减少在不少疾病时常见：白蛋白的合成减少急性或慢性肝炎；营养不连或吸收不良；遗传性缺陷无白蛋白血症是一种极少见的代谢性缺损，血浆白蛋白含量常低于1g/L，但可以没有症状（如水肿等），可能部分由于血浆中球蛋白含量代偿性升高；组织损伤（外科手术或创伤）或炎症（感染性疾病）引起的白蛋白分解代谢增加；白蛋白的异常丢失肾病综合症、

7、慢性肾小球肾炎、糖尿病、SLE等尿中白蛋白损失，烧伤及渗出性皮炎可以从皮肤丧失大量蛋白质；白蛋白的分布异常门静脉高压引起腹水中有大量蛋白质。是从血管内渗漏入腹腔。白蛋白的遗传变异：已发现20多中种。,2）脑脊液中的白蛋白,CSF中白蛋白全部来自血液。CSF中白蛋白增高与血脑屏障通透性增高有关。可见于多发性硬化症、病毒性脑炎或脑膜炎、细菌性脑膜炎等颅内和椎管内炎症性疾病和某些神经系统疾病。参考范围：CSF白蛋白134237mgL,3）、微量白蛋白尿（MA）,尿ALB正常成人尿ALB 大约3.9024.4mg/24h儿童 尿ALB 0 13.3mg/24h尿AlbCr(肌酐)2.5mgmmol 尿

8、中蛋白超过以上数值则称蛋白尿。,肝细胞合成，分子量54 000，半衰期12小时。在pH8.6电泳中移速比白蛋白快而得名。功能：营养 半衰期12小时；运载 结合T3、T4、结合维生素A。,2、前白蛋白（prealbumin,PA）,3、转铁蛋白（transferrin,TRF 或 Tf）单链糖蛋白由肝及单核吞噬细胞系统合成，分子量76500，位于球蛋白区带，负责运载消化管吸收的及 红细胞降解释放的铁，以转铁Fe3+复合物的形式进入骨髓，用于合成血红蛋白。半衰期7天。血浆中TRF的浓度受铁供应的调节，在缺铁状态时，血浆TRF浓度上升，经铁有效治疗后恢复到正常水平,【参考范围【临床意义】属急性时相反

9、应蛋白 并用于贫血的诊断,缺铁性低色素贫血血浆转铁蛋白含量增高,但铁的饱和度很低；红细胞对铁利用障碍引起贫血时，血浆转铁蛋白正常或降低，但铁的饱和度增加。,3、转铁蛋白（transferrin,TRF 或 Tf）,由淋巴细胞合成，存在于所有有核细胞的表面，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞。可自由通过肾小球滤过膜，但在肾小管几乎全部重吸收，被重吸收的2微球蛋白在肾小管细胞完全降解。,4、2微球蛋白（2microgluobin,BMG 或2m）,【参考范围】1.0-2.5mg/L(血清)；尿：0.2mg/L以下【临床意义】血浆2微球蛋白含量升高见于炎症、肿瘤、各种类型白血病及肾功能衰竭，尿毒症患者血清2微

10、球蛋白可达40mg/L。,4、2微球蛋白（2microgluobin,BMG 或2m）,2微球蛋白（2m）,血清升高：肾小球滤过功能低下，慢、急性肾炎，肾功能不全,肾前性：病毒感染，免疫疾患（SLE，Sjogren），恶性肿瘤。,尿中升高：肾前性 肾小管障碍：Fanconi，氨基甙类抗生素，重金属中毒，Wilwon，烧伤。肾小球障碍,5、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP),第一个被认定为急性时相反应蛋白,由肝细胞合成,可结合多种细菌、真菌及原虫体对内的多糖。能激活补体，引发调理作用，增强细胞的吞噬功能，对血小板凝聚和血块收缩有抑制作用。,-球蛋白（各种免疫球蛋白主要位

11、置及C-反应蛋白）：电泳分布在慢区带，有时可以延伸到区带,【参考范围】8.0mg/L,临床意义：CRP作为急性时相蛋白在各种急性炎症、组织损伤、心肌梗塞、手术创伤、放射性损伤等疾病发作后数小时迅速升高，并有成倍增长之势。病变好转时，又迅速降至正常，其升高幅度与感染的程度呈正相关。CRP与其它炎症因子的相关性：CRP与其它炎症因子如白细胞总数、红细胞沉降率和多形核白细胞等具有密切相关性。CRP与WBC存在正相关。在炎症反应中起着积极作用，使人体具有非特异性抵抗力。在患者疾病发作时，CRP可早于WBC而上升，回复正常也很快。故具有极高的敏感性。,5、C-反应蛋白(C-reactive protei

12、n,CRP),CRP可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断：一旦发生炎症，CRP水平即升高，而病毒性感染CRP大都正常。脓毒血症CRP迅速升高，而依赖血培养则至少需要48小时，且其阳性率不高。又如CRP能快速有效地检测细菌性脑膜炎，其阳性率达99。恶性肿瘤患者CRP大都升高。如CRP与AFP的联合检测，可用于肝癌与肝脏良性疾病的鉴别诊断。CRP测定用于肿瘤的治疗和预后有积极意义。手术前CRP上升，手术后则下降，且其反应不受放疗、化疗和皮质激素治疗的影响，有助于临床估价肿瘤的进程。CRP用于评估急性胰腺炎的严重程度。当CRP高于250L时，则可提示为广泛坏死性胰腺炎。正常参考值：10L,5、C-反应蛋白

13、(C-reactive protein,CRP),6、1酸性糖蛋白（1-AG）,升高：急、慢性感染，AMI，肾炎，结缔组织病，自身免疫，过敏，恶性肿瘤。,0.25-2.0g/L,是电泳1-球蛋白含量最高部分,但着色很浅。,AAG是主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时增高，显然与免疫防御功能有关明。早期工作认为肝是合成1-糖蛋白的唯一器官，近年有证据认为某些肿瘤组织亦可以合成。,是具有蛋白酶抑制作用的一种急性时相反应蛋白，分子量为5.5万，P1值4.8，含有10%-12%糖。在醋酸纤维薄膜或琼脂糖电泳中泳动于1区带，是这一区带的主要组分。区带中的另2个主要组分；1-酸性糖蛋白含糖量特别高，1-脂

14、蛋白含脂类特别高，因此蛋白质的染色都很浅。作为蛋白酶的抑制物，它不仅作用于胰蛋白酶，同时也作用于糜蛋白酶、尿激酶、肾素、胶原酶、弹性蛋白酶、纤溶酶和凝血酶等。AAT占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右。AAT的抑制作用有明显的pH依赖性，最大活力处于中性和弱碱性，当pH4.5时活性基本丧失，这一特点具有重要的生理意义。,7、1抗胰蛋白酶（1-AT）,AAT具有多种遗传分型，利用不同pH的缓冲剂和电泳支持物，迄今已分离鉴定有33种等位基因（allotypes），其中最多见的是PiMM型（为M型蛋白抑制物的纯合子体）占人群的90%以上，另外还有两种蛋白称为Z型和S型，可表现为以下遗传分型：PiZZ、

15、PiSS、PiSZ、PiMZ、PiMS，S型蛋白与M蛋白之间的氨基酸残基仅有一个差异。对蛋白酶的抑制作用主要限于血循环中M型蛋白的浓度。以MM型的蛋白酶抑制能力为100%相比，ZZ型的相对活力仅为15%、SS为60%、MZ为57%、MS为80%，其它则无活性。,临床意义,升高：感染，肿瘤，胶原病，妊娠，术后药物服用（口服避孕药，激素）,降低：遗传性：1-AT缺乏症后天性：ARDS，重症肝炎，肾炎，肺损伤，蛋白丢失，营养不良，早产儿，肾移植早期排异。,肝合成，参考区间：是一种含铜的2糖蛋白，分子量约为12万-16万，不易纯化。目前所知为一个单链多肽，每分子含6-7个铜原子，由于含铜而呈蓝色，含糖

16、约10%，末端唾液酸与多肽链连接，具有遗传上的基因多形性。CER具有铁氧化酶的活性，对多酚及多胺类底物有催化其氧化的能力。最近研究认为CER可催化Fe2+氧化为Fe3+。,8、铜兰蛋白（ceruloplasmin,CP）,8、铜兰蛋白（ceruloplasmin,CP）,血清中降低：先天异常；Wilson病，Menkes综合症，营养不良，肝疾患，蛋白丢失，新生儿。,血清中升高：肿瘤，感染，AMI，贫血，胆道梗阻，胶原病，妊娠，肺气肿，药物，吸烟。,19,是人血清中能与游离血红蛋白（hb）在血浆中与游离的血红蛋白结合，是一种急性时相反应蛋白。在CAE电泳及琼脂糖凝胶电泳中位于2区带。分子中有两对

17、肽链（与链）形成22四聚体。链有1及2两种。肝脏合成参考区间：,9、触珠蛋白（haptoglobin,HP）,9、触珠蛋白（haptoglobin,HP）,血清中降低：血管内、外溶血，合成减低，手术（开胸术）自家输血ABO不适合骨髓移植，烧伤后肾功不全，疟疾，慢性丙型肝炎，自身免疫性溶贫；肾功能不全，自尿中漏出。,血清中升高：AMI，内源性发热，肿瘤。,参考区间：是溶纤维蛋白酶、凝血酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶和禅性蛋白酶等多种蛋白水解酶的抑制剂，是存在于血液中的具有重要生物活性的大分子的糖蛋白，分子量725000，由肝脏的淋巴细胞、单核细胞及纤维母细胞合成和释放，对血中内源性、外源性蛋白水解酶有清

18、除作用。,10、2-巨球蛋白（2-macroglobin,2MG）,10、2-巨球蛋白（2-macroglobin,2MG）,血清中2MG,降低：恶性肿瘤，RA，DIC，溶栓疗法，AMI，COPD，尿毒症，肌萎缩性侧索硬化，胰腺炎，溃疡性结肠炎，术后。遗传性2MG缺乏。,升高：慢性炎症，肝炎，肾炎，慢性肝病，糖尿病。,主要在胎儿肝中合成，分子量6.9万，在胎儿13周AFP占血浆蛋白总量的1/3。在妊娠30周达最高峰，以后逐渐下降，出生时血浆中浓度为高峰期的1%左右，约40mg/L，在周岁时接近成人水平（低于30mg/L）。,11、甲胎蛋白（-fetoprotein,FP或AFP）,甲胎蛋白在产

19、妇羊水或母体血浆中AFP可用于胎儿产前监测。如在神经管缺损、脊柱裂、无脑儿等时，AFP可由开放的神经管进入羊水而导致其在羊水中含量显著升高。胎儿在宫腔内死亡、畸胎瘤等先天缺陷亦可有羊水中AFP增高。AFP可经羊水部分进入母体血循环。在85%脊柱裂及无脑儿的母体，血浆AFP在妊娠16-18周可见升高而有诊断价值，但必须与临床经验结合，以免出现假阳性的错误。,11、血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA),一种急性时限反应蛋白，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质，相对分子量约12 000。在急性时限反应中，经IL-1、IL-6和TNF刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细

20、胞合成，可升高到最初浓度的100-1000 倍，但半衰期极短，只有50分钟左右。血清淀粉样蛋白 A 与高密度脂蛋白(HDL)有关，它能在炎症期间调节高密度脂蛋白的代谢。血清淀粉样蛋白 A 一个特别重要的特性是其降解产物能以淀粉样蛋白 A(AA)原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症疾病中这是一种严重的并发症。,11、血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA),与 C 反应蛋白(CRP)类似，血清淀粉样蛋白 A 的含量浓度是反映感染性疾病早期炎症的敏感指标，有助于诊断炎症、评估其活性、监控其活动及治疗。,11、血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA),胎儿胃肠道上皮组织、胰腺和肝细胞合成多糖蛋白 无器官特异性参考区间：3g/L临床意义：1.60 g/L 空腔脏器肿瘤2.持续升高 病变残存或疾病进展 特别是直肠癌3.胰液和胆汁CEA诊断胰腺和胆道癌 浆液CEA 细胞学检查 尿液CEA 膀胱癌,11、CEA（Ca antigen，CEA),纤维蛋白原4.0%,2-巨球2.93%,触珠蛋白2.2%,铜兰蛋白0.53%,1抗胰蛋白酶1.99%,1酸性糖蛋白 2.0%,前白蛋白0.45%,转铁蛋白4.3%,白蛋白55%,其他26.59%,