《仔猪副伤寒活疫苗》PPT课件.ppt
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1、仔猪副伤寒活疫苗(C500株)生产操作细则,2012年11月,本品系使用免疫原性良好的猪霍乱沙门氏菌弱毒株,接种适宜培养基培养,收获培养物加入适当稳定剂,经真空冷冻干燥制成。本品用于预防仔猪副伤寒活疫苗。,1、菌种1.1疫苗生产用菌种为猪霍乱沙门氏菌C500弱毒株,原种购于中国兽药检查所,经扩繁后由质检部鉴定、保管、供应。1.2菌种标准1.2.1 C500弱毒株应符合以下标准1.2.1.1 形态和生化特性 本菌为革兰氏阴性小杆菌,生化特性应符合细菌分类学中本菌的特性。,1.2.1.2 培养特性 在普通琼脂平板上,37培养18-22小时,菌落为圆形、边缘整齐、突起、半透明、略湿润的光滑型。1.2
2、.1.3 血清学特性 普通琼脂新鲜培养物用玻片凝集检查法,对沙门氏菌属O7因子血清出现凝集反应。,1.2.1.4 特异性 在含1%的醋酸铊的普通肉汤中呈均匀浑浊生长,用新鲜普通琼脂培养物与0.2%吖啶黄溶液做玻片凝集试验应不出现凝集反应。1.2.1.5 安全性 用的普通肉汤或蛋白胨水,将培养24-48小时的普通琼脂斜面培养物洗下并作活菌计数,注射下列动物应符合标准。,小白鼠 18-22g(30-35日龄)的小白鼠10只,各皮下注射0.2ml,含活菌数1亿,观察21日,至少应存活9只。家兔 体重的家兔5只,各皮下注射1ml,含活菌数100亿,观察21日应存活。仔猪 用体重15kg以上的健康易感断
3、奶仔猪4头,各静脉注射1ml,含活菌数30亿,观察1个月应存活。,1.3 冻干菌种2-8保存期为10年。2、疫苗制造及半成品检验2.1 生产用菌种的制备2.1.1 一级种子繁殖和鉴定 冻干种子用普通肉汤稀释或经普通肉汤后,接种普通琼脂平板,37培养18-20小时,观察菌落形态,菌落为圆形、边缘整齐、突起、半透明、略湿润的光滑型。,选取中等偏大的菌落5-10个,混合后接种于普通琼脂斜面若干只,37培养24小时,经纯粹检验合格,并用0.2%吖啶黄溶液做玻片凝集试验应合格,作为一级种子。在2-8保存期不超过1个月,在此期间可以移植1-2次,在培养基上继代不超过5代。,2.1.2 二级种子繁殖 取一级
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