血液学检验血常规.ppt
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1、实验诊断学血液检验,Laboratory diagnosis 海军总医院检验科 马学斌,一 血液的组成和功能,组成:血浆和血细胞两部分功能:通过循环系统与全身各个组织器官密切联系,参与机体各项生理功能活动,维持机体正常新陈代谢和内外环境平衡,血液的一般检查 blood routine examination,血液的一般检查(血常规检查)是对血液中的有形成分(红细胞、白细胞和血小板)的数量和质量进行检测。包括全血细胞计数和白细胞的分类计数。,二 红细胞生理 The Physiology of Erythrocyte,一、红细胞的形态和数量 shape and number of erythroc
2、ytes 男:(4.0 5.5)1012/L 女(3.5 5.0)1012/L,二、红细胞的生理特性和功能(一)红细胞的生理特性 1 可塑变形性 deformability 2.悬浮稳定性 suspension stability 红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR),简称血沉。3渗透脆性 osmotic fragility,形 状:双凹圆碟形平均直径:约8m,周 边最厚处约2.5m,中央最薄处约1m。体 积:约90m3。,RBC的可塑变形性受三个方面因素的影响:表面积与体积的比值 该比值越大变形能力越强,双凹圆碟形的红细胞表面积与体积的比值大于
3、球形红细胞,变形能力大;红细胞内的粘度 粘度愈大其变形能力愈小。红细胞内血红蛋白浓度增高或变性,粘度将增大;红细胞膜弹性 红细胞膜弹性降低也可使红细胞变形能力降低。,概念:红细胞在一小时内下沉的距离 影响因素:白蛋白 ESR 球蛋白、纤维蛋白ESR,急性炎症、组织破坏、经期、妊娠、急性风湿热、肺结核 血浆纤维蛋白原 ESR,魏氏法(Westergren)法:male:0 15 mm/h female:0 20 mm/h,红细胞悬浮稳定性与ESR,叠连:许多红细胞较快的互相以凹面相贴,形成一叠红细胞。叠连形成的快慢主要取决于血浆的性质,与红细胞本身无关,主要是血液中纤维蛋白原或血浆蛋白浓度,减弱
4、RBC表面负电荷,使RBC相互排斥力减弱-叠连。,红细胞渗透脆性,红细胞的渗透脆性(osmotic fragility)是指红细胞在低渗盐溶液中膨胀、破裂的特性。其大小可用红细胞对低渗盐溶液的抵抗力来表示。若红细胞膜对低渗盐溶液抵抗力小,表示渗透脆性大。如衰老红细胞、球形红细胞等在低渗盐溶液中容易破裂,脆性大。正常人的红细胞一般在0.42NaCl溶液中开始出现溶血,在0.35NaCl溶液中完全溶血。在某些患溶血性疾病的病人,红细胞开始溶血及完全溶血的NaCl溶液浓度均比正常人高,表明红细胞的渗透抵抗力减小而渗透脆性增加。,(二)红细胞的功能 the functions of erythrocy
5、tes,1.运输O2和CO2 2.维持血液酸碱平衡。,等张溶液(isotonic solution):能使悬浮于其中的红细胞保持正常体积和形状的盐溶液。与红细胞膜张力相等的溶液。这里的“等张”是指溶液中不能透过细胞膜的溶质颗粒所形成的渗透压。例如:1.9的尿素溶液虽与血浆等渗,但红细胞置于其中后会发生溶血,所以不是等张溶液。,红细胞的起源,红系祖细胞(BFU-E和 CFU-E)红细胞生成素(erythropoientin,Epo)骨髓原红细胞(启动血红蛋白和血型抗原的合成)早幼,中幼和晚幼红细胞网织红细胞,成熟红细胞5天时间一个原红细胞最终可生成8-16个成熟红细胞红细胞的生成除了主要受Epo
6、的影响外,也直接或间接的受睾丸激素及其他神经体液因素的调节,红细胞的生成及其调节 the production of erythrocytes and its regulation,(一)红细胞生成所需的原料 生 成 原 料:铁、氨基酸、蛋白质等 促成熟因子:VitB12、叶酸、内因子,缺乏病:内因子胃腺壁细胞分泌的一种糖蛋白,B12吸收障碍,巨幼RBC性贫血(大细胞性贫血)叶酸缺乏 DNA合成障碍 RBC成熟障碍 巨幼RBC性贫血(大细胞性贫血)缺铁性贫血(小细胞性贫血),红细胞的寿命与破坏 Life span and destruction of erythrocytes,红细胞平均寿命1
7、20天。在穿过小血管和孔隙时可变形而不至于破裂。红细胞衰老后,脆性增加易于破裂。破裂后释放出的血红蛋白在单核吞噬细胞系统内降解为铁,珠蛋白,和胆色素释放出的铁进入全身铁代谢池供机体重新利用,珠蛋白肽链被分解为氨基酸参与氨基酸代谢;胆色素则经肝代谢通过粪便和尿液排出体外,血红蛋白的结构,亚铁血红素珠蛋白肽链联结而成的一种结合蛋白,属色素蛋白分子量为64458每个红细胞内约含2.8亿个血红蛋白分子占红细胞重量的32-36占红细胞干重的96%每克血红蛋白可携带氧1.34ml,卟啉合成,卟啉作为血红素的前体,合成过程复杂。卟啉合成不足会引起卟啉病,导致神经精神症状、光敏性皮肤水疱以及溶血性贫血。卟啉定
8、量:几乎所有的遗传性或获得性卟啉代谢疾病均可发现尿中排出的卟啉或其前提增加。收集24小时尿液,不同的卟啉和其前体可通过色谱仪进行分离和量化。是筛选卟啉病的推荐试验。,红细胞计数的原理,用等渗稀释液将全血稀释至一定倍数,充入血细胞计数池,在光学显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经换算求出每升血液中的红细胞数量。,血红蛋白测定原理,血红蛋白被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,后者与氰结合形成稳定的棕色氰化高铁血红蛋白(HiCN),HiCN在规定的波长和液层厚度的条件下具有一定的消光系数,据此可求出血红蛋白浓度。,参考范围,影响检验结果的因素,全身血容量有无改变全身血浆容量有无改变病人的性别,年龄,居住
9、地有无海拔差异等,新生儿,高原居民,新生儿:红细胞明显增高、两周后下降,6-7岁最低男性:25岁-35岁达高峰女性:13岁-15岁达高值,21岁-35岁低水平,以后渐渐增高,红细胞和血红蛋白的测定,1.红细胞及血红蛋白增多(1)相对性增多:呕吐、腹泻、烧伤、大量出汗(2)绝对性增多 继发性红细胞增多症(非造血系统疾病)胎儿、新生儿、高原居民,心肺疾病 某些肿瘤或肾疾患 真性红细胞增多症(polycythemia vera,pv),2.红细胞及血红蛋白减少(1)生理性减少 婴儿、15岁儿童、中晚期妊娠、老年人(2)病理性减少:见于各种贫血,红细胞和血红蛋白的测定,各种类型的贫血,红细胞生成不足
10、骨髓造血障碍 细胞分化和成熟障碍红细胞破坏过多 红细胞内在缺陷(遗传性)红细胞外来因素(获得性)失血 急性失血 慢性失血,第一类贫血:红细胞生成不足,(一)骨髓造血障碍造血干细胞复制和分化异常:再生障碍性贫血,纯红细胞再生障碍性贫血异常细胞或组织骨髓浸润:骨髓病性贫血原因不明或多种机制:慢性系统性疾病(慢性感染,炎症,恶性肿瘤,慢性肾病,肝病,风湿性疾病,内分泌病等)伴发的贫血,第一类贫血:红细胞生成不足,(二)细胞分化和成熟障碍DNA合成障碍:叶酸及(或)维生素缺乏所致的巨幼细胞贫血血红蛋白合成障碍:血红素合成缺陷:缺铁性贫血,铁粒幼细胞性贫血 珠蛋白合成缺陷:珠蛋白生成障碍性贫血(海洋性贫
11、血),第二类贫血:红细胞破坏过多,(一)红细胞内在缺陷(遗传性)遗传性球形红细胞增多症,红细胞酶缺陷所致的溶血性贫血,珠蛋白生成障碍性贫血,异常血红蛋白病,阵发性睡眠性血红蛋白尿等(二)红细胞外来因素(获得性)免疫性溶血性贫血,机械性损伤所致的溶血性贫血,化学、物理、生物因素引起的溶血性贫血等,第三类贫血:失血,急性失血:急性失血后贫血慢性失血:同缺铁性贫血,红细胞形态学改变,(1)大小的异常(2)形态的异常:球形、椭圆、口形、半圆形、镰形、泪滴形、棘形等(3)染色反应的异常:低色素性、高色素性,嗜多色性(4)结构的异常:嗜碱性点彩、染色质小体、Cabot环、有核红细胞,红细胞形态改变,形态改
12、变 常见疾病小红细胞 缺铁性贫血、地中海贫血大红细胞 溶血性贫血、巨幼细胞性贫血红细胞大小不均 病理性贫血靶形细胞 地中海贫血、异常血红蛋白病球(椭圆、口、镰)形细胞 遗传性疾病裂细胞(红细胞碎片)红细胞物理性破坏红细胞缗钱状 多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症低色素性 血红蛋白生成减少性疾病高色素性 巨幼贫、球形细胞嗜多色性 增生性贫血(溶血性贫血)异常结构(点彩、H-J小体等)骨髓增生旺盛,正常形态红细胞,正常红细胞为双凹圆盘形,大小一较致,直径6-9um,染色后四周着色深,中央呈着色浅的苍白区。,异常形态红细胞,椭圆形红细胞:红细胞长径增大、横径缩小呈椭圆形或长柱形,横经/长经0.78,正常人血
13、片中可见少数(约1%).椭圆形红细胞增多见于遗传性椭圆形细胞增多症,严重贫血时可达15%以上,一般高于25%-50%才有诊断价值。巨幼细胞性贫血及恶性贫血时也可见到。,泪滴形红细胞:细胞呈泪滴状或手镜状。见于骨髓纤维化,为本病的特点之一。也可见于珠蛋白生成障碍性贫血,溶血性贫血等。,异常形态红细胞,异常形态红细胞,.靶形红细胞:红细胞中心及边缘处有血红蛋白着色,二者之间为一乏色素苍白区,形同射击的靶心。见于珠蛋白生成障碍性贫血(海洋性贫血),异常血红蛋白病,靶形细胞常占20%以上。少量也可见于缺铁性贫血,其他溶血性贫血,以及黄疸或脾切除后的病例等。,异常形态红细胞,口形红细胞:红细胞周围深染,
14、中心淡染区呈一狭长裂隙,宛如微张的鱼口。正常人血片中口形红细胞偶见,一般4%,其增高(多达10%以上)见于遗传性口形细胞增多症,于弥散性血管内凝血及酒精中毒等也可见到。,异常形态红细胞,棘细胞及刺细胞:棘细胞外周呈钝锯齿装突起,刺细胞外周呈不规则,不均匀的靴刺装突起。见于棘形细胞增多症(先天性无脂蛋白血症),也可见于脾切除后,酒精中毒性肝病,尿毒症等。,异常形态红细胞,嗜多色性红细胞:为尚未完全成熟的红细胞,由于胞质中残存核糖体和核糖核酸等嗜碱性物质故染色后红细胞全部或其一部分呈灰蓝色.正常人血片中不见,于各种增生性贫血时常易见到,尤其是溶血性贫血时最多见,镰状红细胞:,镰形红细胞:主要见于镰
15、状细胞性贫血(HbS病)。由于红细胞内存在着异常血红蛋白S(HbS),在缺氧情况下,HbS分子易于聚合成长形或尖形的螺旋状结晶体,使细胞膜发生变形,红细胞变成镰形。这种变化是可逆的,当HbS与氧结合时,镰变的红细胞又恢复正常形状。,红细胞内异常结构,嗜碱性点彩:属于未完全成熟的红细胞,在正常人血涂片中极少出现,约为0.01%,其增多表示骨髓中红细胞系增生旺盛并伴有紊乱现象,见于增生性贫血,巨幼细胞贫血及骨髓纤维化等。在铅,汞,锌,铋等重金属中毒时,因红细胞受重金属损伤后,胞质中的核糖体发生聚集变性,点彩红细胞也明显增多,常作为铅中毒诊断的重要指标。,红细胞内异常结构,染色质小体(Howell-
16、Jolly bodies),系位于成熟或幼红细胞胞质中的紫红色圆形小体,大小约为1-2m,可一个或数个,其本质为细胞核的残余物.常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血及脾切除后,也可见于红白血病或其它增生性贫血。,红细胞内异常结构,卡博氏环(Cabots ring)其来源及性质不明,可能为幼红细胞核膜的残余物也可能为胞质脂蛋白变性所致。常与Howell-Jolly小体同时出现,见于溶血性贫血、较严重的巨幼细胞性贫血,脾切除后或铅中毒等。,三 Leukocyte,White Blood Cells=Leukocyte Leukocytes are larger than RBCs,possess a
17、nucleus,and are present in smaller numbers.Normal blood contains:WBC(4.010.0)109/L,Types of white blood cells,Normal adult granulocytes:Polymorphonuclear WBCs neutrophils 5065%eosinophils 25%basophils 0.51%agranulocytes:mononuclear WBCs monocytes 68%lymphocytes 2040%,白细胞计数和白细胞分类计数,【参考值】成人(4-10)109/L
18、(4000-10000/mm3)新生儿(15-20)109/L(15000-20000/mm3)6个月-2岁(11-12)109/L(11000-12000/mm3),中性粒细胞,起源于粒-单系祖细胞(CFU-GM)粒细胞生成过程中,根据其功能和形态特点,人为地划分为干细胞池,生长成熟池,和功能池三个阶段 成熟的粒细胞在贮存池中贮留3-5天 贮存池中的白细胞数量是外周血中的15-20倍 循环粒细胞池,边缘粒细胞池 组织中的粒细胞约为血管内的20倍,中性粒细胞生成调控,中性粒细胞功能,趋化作用:C3a,C5a,C567,细菌释放的代谢产物,病毒感染细胞的产物,坏死组织的分解产物等 变形和黏附作用
19、吞噬作用和杀菌作用在机体防御和抵抗病原菌中起重要的作用正常情况下,每小时有10%的粒细胞进行更新,【临床意义】白细胞增多 WBC10109/L(10000/mm3)白细胞减少 WBC4109/L(4000/mm3)(一)中性粒细胞(neutrophil,N)在防御和抵抗病原菌侵袭过程中起重要作用 1.中性粒细胞增多 生理性增多 正常波动;暂时性升高;新生儿、月经期、妊娠期,在生理情况下,外周血中的白细胞可有个体差异。一日之间也可有波动,下午较早晨为高。生理性增多见于胎儿、新生儿,妊娠5个月以上白细胞增多可达15109/L,分娩时疼痛和产伤可使其进一步增高,如无合并症于产后2周左右恢复正常;剧烈
20、运动、严寒、暴热等刺激也可见白细胞增多。以上一过性白细胞增多在去除影响因素后不久则可恢复正常,系边缘池内的白细胞过多地进入循环池所致,而持续时间较长的白细胞增多则与贮备池加快释放等有关。增多的粒细胞大多为成熟的分叶核粒细胞或较成熟的杆状核粒细胞。,病理性增多 反应性增多:急性感染和炎症 组织损伤或坏死 急性溶血 急性失血 急性中毒 恶性肿瘤 异常增生性增多:粒细胞白血病 骨髓增殖性疾病,反应性增多最常见于急性化脓菌感染如金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等。另外某些杆菌如大肠艾希菌,绿脓杆菌,真菌和放线菌,病毒,如流行性出血热病毒,流行性乙型脑炎,狂犬病等,立克次体如斑疹伤寒,螺旋体如钩端螺旋体,梅毒
21、,寄生虫如肺吸虫感染等都可以使白细胞总数升高,中性粒细胞增多。其白细胞总数的增高视感染范围、严重程度及机体反应性如何而有所不同。轻度感染时白细胞总数可正常,分类时可见中性粒细胞百分率增高;中度感染时白细胞多l0109个/L并可伴轻度核象左移;重度感染时,比如严重的全身性感染,如发生菌血症,败血症,或脓毒血症时,则白细胞明显增高,常20109个/L并出现明显的核象左移和中毒性改变。感染过于严重如感染中毒性休克或机体反应性较差时白细胞可不增高反而减低但伴有严重的核象左移。,严重的组织损伤如严重的烧伤、机械性损伤、较大手术后、血管栓赛,如心肌梗死肺梗死等均可见12-36h内白细胞增高,以中性分叶核增
22、多为主。并可借此来区别心梗与心绞痛。大量血细胞破坏内脏(如肝、脾)破裂或宫外孕破裂所致大出血,此时白细胞可迅速增高,在1-2小时内达20109/L,且可出现于血红蛋白降低之前。其增多的主要是中性分叶核粒细胞,内出血者如消化道大出血,内脏破裂,如脾破裂,或输卵管妊娠破裂等,白细胞增高常较外部出血为显著,血小板数也同时又增高,这可能与大出血所致的缺氧和机体的应激反应,动员骨髓储存池中的血细胞释放有关。但此时病人的红细胞数和血红蛋白量仍可暂时保持在正常范围,可能因失血早期体内血液的血浆与血细胞比值尚未出现改变,待组织间液吸收回血液或经过输液以补充循环血量后,才出现红细胞和血红蛋白降低。因此,白细胞增
23、高可作为早期诊断内出血的参考指标。,急性中毒 见于急性化学药物中毒如安眠药、有机磷等中毒;代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒、尿毒症等也常见白细胞(中性粒细胞)增多。恶性肿瘤:非造血系统恶性肿瘤有时出现持续性白细胞增高,以中性分叶核粒细胞增多为主,恶性肿瘤时白细胞增多的机制可能为:1,肿瘤组织坏死的分解产物刺激骨髓中的粒细胞释放,2,某些肿瘤如肝癌,胃癌等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成因子,以及3,恶性肿瘤骨转移破坏骨髓对粒细胞释放的调控作用。以上反应性白细胞增多常与边缘池内细胞过多释放入血且机体动用贮备池、成熟池乃至分裂池内的白细胞有关。,肿瘤性或持续性白细胞增多常见于急、慢性粒细胞性白血病,急性者骨
24、髓中有大量的原始粒细胞异常增生,但外周血中出现白细胞数增多者只有不到50%的病例,一半增至(10-50)109/L,很少超过100109/L,分类时以原、幼粒细胞为主,而慢性型者白细胞常100109/L,可以达到(100-600)109/L,分类时以中幼、晚幼以下各阶段粒细胞为主,原始及早幼粒不到10%,并伴有较多的嗜酸、嗜碱粒细胞,此时须与中性粒细胞型类白血病反应相鉴别。骨髓增殖性疾病如真性红细胞增多症,原发性血小板增多症和骨髓纤维化等,均是多能干细胞的病变引起,具有潜在的演变为急性白血病的趋势,其特点除了一种血细胞成分的增生外,常伴有一种或两种其它血细胞的增生,故常有中性粒细胞增多,白细胞
25、数在(10-30)109/L。,中性粒细胞减少,白细胞减少症(leukopenia)WBC4109/L粒细胞减少症(granulocytopenia)中性粒细胞1.5 109/L粒细胞缺乏症(agranulocytopenia)中性粒细胞 0.5 109/L,中性粒细胞减少病因,感染性疾病(病毒、细菌、结核、脓毒血症)血液系统疾病(再障、粒缺、恶组)物理、化学因素(放射线、同位素、化学/药物)单核-巨噬细胞系统功能亢进(脾亢、类脂质沉积病、恶性肿瘤)其他:SLE、自身免疫性疾病、过敏性休克等。,某些感染见于某些革兰氏阴性杆菌(如伤寒、副伤寒沙门氏菌)感染及病毒(流感,麻疹,病毒性肝炎,水痘,风
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