芳香胺类药物的分析.ppt

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1、第七章 芳香胺类药物的分析,第一节 芳胺类药物的分析,第二节 苯乙胺类药物分析,第三节 芳氧丙醇胺药物分析,返回主目录,基本要求,练习与思考,基本要求,一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法。二、熟悉芳氧丙醇胺类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。三、了解氨基醚衍生物类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。,返 回,第一节 芳 胺类药物的分析,芳胺类药物分为两类,芳伯氨基未被取代,芳伯氨基被酰化,一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质,（一）基本结构与典型药物,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,1.芳伯氨基特性：重氮化偶合反应；芳醛缩合成Schi

2、ff碱；易 氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。,（二）主要理化性质,水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸 丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均 为对氨基苯甲酸。,弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具 有弱碱性。,4.其它特性：因结构中有 芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其 游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于 水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。,二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,醋氨苯砜,盐酸布比卡因,盐酸利多卡因,1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸 水解后显芳伯氨基的特性反应。注意空

3、间位阻的影响。2.水解产物易酯化：对乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成 醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋 酸乙酯香味。,（二）主要化学性质,3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基；醋氨苯砜酸 水解有酚羟基，可与FeCl3发生显色反应，可相互区别。4.弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显 碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可 相互区别。5.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨 基上氮可与Cu2+,Co2+生成 有色配位化合物沉淀。,三、鉴别试验,（一）重氮化-偶合反应 分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。,Ar-NH2,HCl,NaNO2,重氮盐,OH-

4、,-萘酚,橙黄猩红色,直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普 鲁卡因胺,间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜,利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。,丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNO2反应生成N亚硝基化合物的乳白色沉淀。,（二）与三氯化铁反应,对乙酰氨基酚+FeCl3,蓝紫色化合物,1.与铜和钴离子反应：利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物；与氯化钴生成亮绿色沉淀。,（三）与金属离子反应,2.羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。,3.与汞离子反应,盐酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2,黄色,对氨基苯甲酸酯 H2NO3+Hg(NO3)2,红色或橙黄色,1.盐酸普鲁卡

5、因的鉴别,(四)水解产物反应,2.苯佐卡因的鉴别,苯佐卡因+NaOH,乙醇,乙醇+I2+NaOH,CHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）,(五)制备衍生物测熔点,1.三硝基苯酚衍生物的制备：利多卡因和布比卡因,2.硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因,(六)紫外特征吸收光谱法,1.在max 处测定供试液的百分吸收系数。例如：对乙酰基酚在0.4%NaOH中于max=240nm;E1%1cm=715 在HCl(0.1nol/L)-甲醇于max=249nm;E1%1cm=880,2.在规定的浓度测定max 例如：醋氨苯砜5g/ml;max=256nm;284nm 再例如：盐酸普鲁卡因胺5g/ml;max=280

6、nm,(七)红外吸收光谱法,（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查 1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可 能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生 有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。,四、特殊杂质检查,检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；如显混浊，与1号浊度标 准液比较，不得更浓；如显色，与棕红色2号或橙红色2号 标准液比较，不得更深。,2.有关物质检查：Ch.P是以对氯苯乙酰胺为对照品，采用TLC 法 中的杂质对照品法。,3.对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与 亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化 合物，采用比色法。,(二)盐酸普鲁

7、卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,为什么要检查？,怎样检查？,采用TLC法中的杂质对照品法进行检查。,（一）亚硝酸钠滴定法 Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法 Ch.P中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。,五、含量测定,1.原理：,Ar-NHCOR+H2O,Ar-NH2+RCOOH,H+,Ar-NH2+NaNO2+2HCl,Ar-N2+Cl-+NaCl+2H2O,测定主要条件：,(1)加KBr增加反应速度,重氮化的反应历程为：,NaNO2+HCl,HNO2+NaCl,HNO2+HCl,NOCl+H2O,KHCl,K

8、Br+HCl,HBr+KCl,HNO2+HCl,NOBr+H2O,KKBr,KHBr 比KHCl大300倍,生成NOBr量大得多加快反应速度,(2)加过量HCl加速反应：重氮化速度加快；重氮盐在酸性介质中稳定；防止生成氨基偶氮化合物。Ar-N2+Cl-+H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar+HCl 一般摩尔比为Ar-NH2:HCl=1:2.56。,(3)室温条件下滴定:温度高反应速度快；每升高10加快2.5倍,太高,可使Ar-N2+Cl-+H2O,Ar-OH+N2+HCl,(4)滴定管尖端插入液面下滴定,3.指示终点的方法(1)用停滴定法 溶液 检流计 终点前：无过量 无电流 HNO2 终点

9、时：有过量 有电流（使指针偏离零 HNO2 永停在某一位置）(2)外指示剂法 用KI-淀粉指示剂 指示终点的原理：2NaO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,(二）非水溶液滴定法,基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因 侧链叔胺氮在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱 性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比 醋酸和质子的酸性强，可增加碱性。,2(CH3CO)2O,(CH3CO)3O+CH3COO-,相当于,BHCl+Hg(Ac)2,BHAc+HgCl2,BHAc+HClO4,BHClO4+HAc,1.对乙酰基酚原料的含量测定 在0.4%NaOH介质中；

10、257nm D%E1%1cm样 E1%1cm标100；E1%1cm715 2.对乙酰基酚片溶出度测定（测定条件同上）1片稀HCl 24ml+H2O 1000ml 精密量 取5ml+0.4%NaOH10ml+H2O 100ml 257nm测定A。W110005100100C（g/100ml)W(g)=200 C;C=A/715 溶出度W标示量10080为合格,（三）分光光度法,中性条件下的重氮化反应,（四）比色法,盐酸普鲁卡因+1,2-蒽醌-4-磺酸钠,pH4-9,棕红色化合物，max482nm处测定A,（五）盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定,ex400nm（激发波长）、em485nm（发射波长）处

11、测定荧光强度，标准曲线法定量。,盐酸普鲁卡因胺+荧胺,pH7.5,荧光物,此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中 常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两 者的含量，该法简单准确。色谱条件：色谱柱为BondapakC18 300mm4mm 流动相为甲醇1HAc(40:60);UV检测器250nm.,（六）HPLC法,返 回,第二节 苯乙胺类药物的分析,一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物,*,常见的苯乙胺类药物,（二）主要化学性质,1.弱碱性 本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮 显弱碱性。2.酚羟基特性 本类药物结构中有酚羟基，可与 Fe

12、Cl3;发生氧化。3.光学活性 多数药物结构中有手性碳原子，具有旋 光性。,二、鉴别试验,(一)与三氯化铁反应,Ar-OHFeCl3,络合显色 碱液,紫红色,。(二）甲醛硫酸反应 在此试剂中形成醌式结构而显色。药 物 三氯化铁 甲醛硫酸 肾上腺素 0.1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红紫红 红色 重酒石酸去甲肾上腺素 绿色,加NaCO3试液显紫色红色 淡红色 盐酸去氧肾上腺素 紫色 玫瑰红橙红棕红 盐酸异丙肾上腺素 深绿色,加5NaCO3试液显蓝紫色红色 棕色暗紫色,(三）氧化反应,本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而显色，例如：肾上腺素在中性或酸性条

13、件下，被I2,H2O2 氧化后，生成肾上腺素红；盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧化，生成异丙肾上腺素红。,(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱,例如：盐酸异丙肾上腺素 0.05mg/ml max=280nm A=0.50,这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别,(五）与亚硝基铁氰化钠(Rimini试验）是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；可用于重酒石酸间羟胺鉴别。,D 亚硝基铁氰化钠 丙酮 Na2CO3,红紫色,(六)双缩脲反应 是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄碱，盐酸伪麻黄碱鉴别：,D CuSO4+NaOH,显蓝紫色,乙醚，醚层(紫红色)水层(蓝色),(一)酮体检查 本类药物在生产过程中

14、多采用酮体氢化制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质。采用UV法检查：利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。例如：肾上腺素本项检查 配2.0mg/ml=310nm A0.05 盐酸去氧肾上腺素 配2.0mg/ml=310nm A0.02 盐酸异丙肾上腺素 配2.0mg/ml=310nm A0.15,三、特殊杂质检查,(二)有关物质的检查 采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。,(三)盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 采用PC法中的杂质对照法进行检查。,(一)非水溶液滴定法 本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定 相当于B的有机酸盐可直接滴定。2.盐酸

15、克仑特罗的测定 相当于B的HX酸盐不能直接滴定，需加Hg(Ac)2处理后滴定。3.硫酸沙丁醇的测定 相当于B的H2SO4盐可直接滴定,也可处理后滴定。,四、含量测定,(二)溴量法 本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液用此法。,基本原理：,(三)比色法 利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe3络合显色，进行比色测定；也可利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶合显色，进行比色。,例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定,上述偶合剂可与HNO2显色，干扰比色测定，可先加氨基磺酸铵分解过量的HNO2。,HNO2 2H2NSO3NH4,2N2+(NH4)2SO4+H2SO4+H2O,(四)提取酸碱滴

16、定法,硫酸苯丙胺的含量测定：,BH2SO4+NaOH+NaCl,乙醚,提取B,+H2SO4,蒸去乙醚,终点,(五)荧光分光光度法,肾上腺素测定：,ex410nm、em520nm处测定荧光强度，对照法定量。,肾上腺素+I2,肾上腺红,一定条件下,N-甲基-3,5,6-三羟基吲哚,(六)HPLC法 例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定 采用RPIP-HPLC-UV法；用外标一点法进行定量测 定。例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定 采用RPIP-HPLC-EChD 法；用标准曲线法进行定量 测定。,(七)衍生化GC法（GC-FID 以盐酸美西律作内标物)应用示例：盐酸芬氟拉明片的含量测

17、定 盐酸芬氟拉明三氟乙酰肝 衍生物,返 回,第三节 芳氧丙醇类药物的分析,一、药物结构与主要理化学性质,氧烯洛尔化学名为 1-邻烯丙氧基苯氧基-3-异丙氨基-2-丙醇.本 品为白色结晶粉末,乙醇、丙酮中易溶；异密、氯仿中略溶；水中微溶。盐酸卡替洛尔化学名为5-3-1,1-二甲基乙基)氨基-2-羟丙氧基-3,4-二氢-2(1H)-喹诺酮盐酸盐。本 品为白色结晶粉末,水中溶 解，甲醇中略溶，乙醇中极微溶解，乙醚中几乎不溶；在冰醋 酸中极微极微溶解,(一)化学鉴别反应 1.沉淀反应 利用其碱性与生物碱沉淀剂生成沉淀 盐酸卡替洛尔硫氰酸铬铵试液 淡红色 2.氧化反应 利用侧链的不饱和双键可被高锰酸钾氧

18、化 氧烯洛尔 KMnO4 MnO2(棕色沉淀)(二)紫外分光谱鉴别法 盐酸卡替洛尔：8g/ml,max=215nm;252nm 氧烯洛尔：40g/ml,max=275nm,二、鉴别试验,三、盐酸卡替洛尔中有关物质检查,本品采用TLC法中的高低浓度对照法,四、含量测定,（一）非水溶液定法 盐酸卡替洛尔，氧烯洛尔原料可采用此法 盐酸卡替洛尔BHCl+HClO4 BHClO4+HCl 用电位法指示终点,HCl不干扰，无需加醋酸汞处理。,（二）紫外分光光度法 本法主要用于制剂分析。例如盐酸卡替洛尔注射液采用本法。采用对照品比较法：CX=AX/AR CR 标示量 CX D/V取ml规格ml/标示量100

19、,（三）HPLC法 应用示例：人血浆中样烯络尔及其异构体的测定 色谱条件：预柱为十八烷基硅胶柱；分析柱为手性ODR柱(C18固定相上涂渍3,5-二 甲本氨基甲酸酯纤维素，作为手性剂);流动相为NaClO4(0.4mol/L)-乙腈(70:30)的磷酸 缓冲液；检测器：237nm 样品预处理：血浆样品用醋酸纤维素膜透析，预柱纯化和富 集，然后通过RP手性HPLC法分析。回收率：可达80以上；线性范围：0.05g/ml2.50g/ml 日内和日间精密度的RSD14%.,返 回,练习与思考,A型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是A.水杨醛 B.间氨基酚 C.水杨酸 D.对氨基苯甲酸 E.氨基

20、酚2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是A.水杨醛 B.间氨基酚 C.对氨基酚 D.苯甲酸 E.苯酚3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是A.水杨醛 B.间氨基酚 C.对氨基酚 D.酮体 E.苯甲酸,B型题,A。硫酸铜反应 B.氧化反应 C.还原反应 D.水解后重氮化-偶合反应 E.重氮化-偶合反应 1.盐酸利多卡因 2.肾上腺素 3.盐酸普鲁卡因 4对乙酰氨基酚,A,B,E,D,A。溴量法 B.紫外分光光度法 C.亚硝酸钠滴定法 D.RP-HPLC法 E.非水滴定法 5.盐酸去氧肾上腺素 6.肾上腺素注射液 7.盐酸普鲁卡因 8对乙酰氨基酚,A,D,C,B,X型题,1.直接能与FeCl3产生颜色反应的药物有A。盐酸普鲁卡因 B.盐酸去氧肾上腺素 C.对乙酰氨基酚 D.盐酸利多卡因 E.盐酸丁卡因 2.直接和水解后能发生重氮化-偶合反应的药物有A。盐酸丁卡因 B.盐酸普鲁卡因 C.对乙酰氨基酚 D.对氨基酚 E.盐酸肾上腺素,返 回,