细菌基因敲除技术资料.ppt
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2、条件不同,需要摸索)第一次同源重组及筛选第二次同源重组及筛选基因缺失株鉴定,电转化仪,电击缓冲液,五、本公司细菌基因敲除服务优势,独特的供体菌,可以不要求靶细菌具有抗生素抗性。高效的供体菌接合系统,保证自杀质粒具有高的接合转移效率。自杀载体为T线性化载体,可直接与纯化PCR产物连接,不需要考虑酶切位点,大大节省客户时间。优化的自杀载体序列,最大化减少冗余区,从而提高接合转移效率,减少非特异重组的概率。自杀载体具有自主开发的反向筛选基因vmt,用于替换常规的sacB基因,从而大大增加基于自杀载体基因敲除技术的适用范围,大大减少第二次重组后缺失突变克隆的筛选工作。,细菌送样前请鉴定确认好菌株的种类,以免基因扩增不能匹配靶基因。细菌送样前请先测试菌株是否具有氨苄青霉素(Ap)、卡那霉素(Kn)、氯霉素(Cm)、四环素(Tc)抗性,并保证至少不具有其中一种抗性。如需委托抗性测试,另需收费300元单个抗性测试。请按附件1要求标识需要敲除的基因,以及上下游500bp左右的序列。细菌样品以液体或平板划线形式寄出。在样品寄出前请以电子邮件形式提供培养条件。,六、送样要求,七、本公司可以提供的其它实验服务,细菌、真菌的多位点分子鉴定细菌API、Biolog生化鉴定基因克隆及原核表达荧光定量PCR分析DNA侧翼未知序列克隆,
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