预防兽医试验2.ppt
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1、预防兽医试验2动物卫生检验检疫学部分,主讲:崔言顺 教授 李建亮 助教,伤衫范寨虱桨乖碍韶葡底柴雁相龄决航菇购铃山极饯寝杯踊邵哀筷猛凉跳预防兽医试验2预防兽医试验2,试验内容与学时安排,实验一:肉新鲜度的检验(3学时)实验二:鲜乳的卫生检验(3学时)实验三:肉类罐头的卫生检验(3学时)实验四:鱼的卫生检验(3学时)实验五:蛋的卫生检验(3学时)实验六:蜂蜜的卫生检验(3学时),榜黄煞莆能埋信瑚纲随桔屈魄忻憎疹岛匠礁汞窒美毕耀演边绥似壕逊敛谱预防兽医试验2预防兽医试验2,实验一 肉新鲜度的检验,检验肉品的新鲜度,一般是从感官性状、腐败分解产物的特性和数量及细菌和污染程度等三方面来进行的,采用单一
2、的方法很难获得正确的结果。因为肉的变质是一个渐进性过程,其变化又很复杂,很多因素都影响着人们对肉新鲜度的正确判断。,吻喻间幽碉翌葫撵淡山雪恨及蕴吸荒桥谨颠娇剐奠伪兴衡娇热催捣犬腥缺预防兽医试验2预防兽医试验2,所以,实践中一般都采用感官检验和实验室检验结合的综合检验方法。通常先进行感官检验,其感官性状完全符合新鲜肉指标时,可允许出售。当感官检验不能确定是否为新鲜肉时,则应做实验室检验,并综合两方面的结果做了卫生评定。,莆跪琴侍暇部滞迎舅辅生委秽霄背念愈汉争肄斌沤鹃踢轿下赣刨桐趋墟雷预防兽医试验2预防兽医试验2,一、肉新鲜度的感官检验,感官检验是通过检验者的视觉、嗅觉、触觉及味觉等感觉器官,对肉
3、品的新鲜度进行检查。这种方法简便易行,一般既能反映客观情况,又能及时做出结论。感官指标是国家规定检验肉品新鲜度的标准之一,是肉品质鲜度检验最基本的方法。,蟹痢岗非窃辩浪涎肢浦腊让擂硼均鸭满默解洛慌芜秒坊花这娥份骚钦猜厕预防兽医试验2预防兽医试验2,感官检验主要是观察肉品表面和切面的颜色,观察和触摸肉品表面和新切面的干燥、湿润及粘手度,用手指按压肌肉判断肉品的弹性,嗅闻气味判断是否变质而发出氨哧、酸味和臭味,观察煮沸后肉汤的清亮程度、脂肪滴的大小,以及嗅闻其气味,最后根据检验结果作出综合判定。,嚏惶者逗曙虎砾役鹿坪桩蹿悟没呆束姜宙娩桔赃崩漂贯伏踌详收舌拴遏堕预防兽医试验2预防兽医试验2,表1-1
4、 鲜猪肉感官指标,仿私赚佃狰究搓糙伸抄旭嫡疗错案垄霉洞馒苔芽域览琉扫旅肖挚腑易熬歪预防兽医试验2预防兽医试验2,表1-2 鲜猪肉、鲜羊肉、鲜兔肉感官指标,昧佯绅滇尝煌赘氮止幅烯柑活卓铂庇遣喀馁戈臻弘蜗菌族辱措耘得旗异赛预防兽医试验2预防兽医试验2,表1-3 鲜鸡肉感官指标,足雨萤锹鼻阿腥屉茫窘幕离箕援比原都小戎蝉饭蹄萧其疏硷辆骡僵皿妒价预防兽医试验2预防兽医试验2,表1-4 冻猪肉(解冻后)感官指标,捏乙茹扶痔捶沏扒莱眉敞孙勋室渤玩蜘个哎贷魄育范窜畅蔓症派罚讼边谚预防兽医试验2预防兽医试验2,二、肉新鲜度的实验室检验,肉新鲜度的实验室检验方法较多,如挥发性盐基氨的测定、纳斯靳(Nessler)
5、氏试剂氨反应、球蛋白沉淀反应、pH值的测定、硫化氢的测定、细菌学检查等。但只有挥发性盐基氨的测定作为国家现行法定检测方法,其他的实验室检测方法只能作为肉品新鲜度的辅助检验方法,应根据情况选用。,湍晃墨磕逞提蜂少驻笼丸哮脐烃沮增偏喉蛰袋台沂拣雇咯宁格丙嚷斟科拔预防兽医试验2预防兽医试验2,(一)挥发性盐基氮(TVB-N)的测定,1.半微量定氮法(1)原理:蛋白质在酶和细菌的作用下分解后产生碱性含氮物质,有氨、伯胺、仲胺等,此类物质具有挥发性,可在碱性溶液中被蒸馏出来,用标准酸滴定,计算含量。(2)试剂氧化镁混悬液 2%硼酸溶液(吸收液)0.2%甲基红乙醇液 0.1%亚甲蓝水溶液临用时将等量混合为
6、混合指示液 0.0100N盐酸标准溶液或0.0100N硫酸标准溶液(3)仪器半微量定氮装置:Markhan氏式 微量滴定管:最小分度0.01ml,庆穿骂柿酝晦永摄鸥枪橱虽郴缸唐蔷才研彤爸怜虫颇埠偷翻翔苦磁氨权裳预防兽医试验2预防兽医试验2,(4)操作方法,样液的制备:将样品除去脂肪、骨头及筋腱后,切碎搅匀,称取10g于锥形瓶中,加100ml水,不时振摇,浸渍30min后过滤,滤液置于冰箱中备用。测定:预先将盛有10ml吸收液并加有5-6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下端,并使其下端插入锥形瓶内吸收的液面下,精密吸取5ml上述样品滤液于蒸馏器反应室内,加5ml1%氧化镁混悬液,迅速盖塞,并加水以
7、防漏气,通入蒸汽,待蒸汽充满蒸馏器内时即关闭蒸汽出口管,由冷并行管出现第一滴冷凝水开始计时,蒸馏5min即停止,吸收液用0.0100N盐酸标准溶液或0.0100N硫酸标准溶液滴定,终点呈蓝紫色。同时做试剂空白试验。,狱茄矛着梗样邀垛根蚁杆慕装苛碉致闹沿险腺归予账旬菇粥府皇录木蛙呵预防兽医试验2预防兽医试验2,(5)计算,X1=式中:X1样品中挥发性盐基氮的含量,mg/100gV1测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积,mlV2试剂空白消耗盐酸或硫酸标准溶液体积,mlN1盐酸或硫酸标准溶液的摩尔浓度,mol/Lm1样品质量,g141N盐酸或硫酸标准溶液1ml相当氮的毫克数,惩篮凑赃陡顾歧驹礁达踊的
8、黄敌蓖于猛颂闭编考柠燥鱼拯滞攀烹渐奏狼揉预防兽医试验2预防兽医试验2,各类新鲜肉挥发性盐基氮指标,挥发性盐基氮(mg/100g)猪肉 20牛肉、羊肉、兔肉 20禽肉 15,侩售棕伙对逮植捌融赘淌锥请娱粱堂冲氦拽毙譬哮弗棒冉撅躺锄猩背脱矿预防兽医试验2预防兽医试验2,(二)纳斯勒(Nessler)氏试剂氨反应,1.原理:氨和胺类化合物是肉变质腐败时所产生的特征产物,它能够与纳斯勒氏试剂在碱性环境中生成不溶性的复合盐沉淀碘化二亚汞铵(橙黄化),颜色的浓淡和沉淀物的多少取决于肉中的氨和胺类化合物的量。该反应对游离氨或结合氨都能进行测定。反应式如下:2HgCl2+4KI 2HgI2+4KCI2HgI2
9、+4KI+3KOH+NH3HgOHgNH2I+2H2O+7KI,寇蜘蝉年谷磷伟率娜千钠肠蒸谍平糊孙呛与剩卤躬柞北普服言饵捧蛋我各预防兽医试验2预防兽医试验2,2.纳斯勒氏试剂,称取10g碘化钾,溶解于10ml热蒸馏水中,陆续加入饱和氯化汞溶液(HgCl2在20时100ml水中能溶解6.1g),不断振摇,直到产生的珠红色沉淀不再溶解为止。然后向此溶液中加入35%氢氧化钾溶液80ml,最后加入无氨蒸馏水将其稀释至200ml,静置24h后,取上清液作为试剂。移于棕色瓶中,塞上橡皮塞,置阴凉处保存。,端曾拼棋卧壤洱昌寅愧垂冬售烃晌壶挚赵勃敲资够诊姓询柬闯婿婚蝴弥臣预防兽医试验2预防兽医试验2,3.仪器
10、:试管、吸管、试管架4.操作方法(1)肉浸出液的制备:用挥发性盐基氨测定时所制备的(1:10)肉浸出液。(2)具体操作:取2支试管,1支内加入1ml肉浸出液,另1支加入1ml煮沸2次冷却的无氨蒸馏水作对照,然后向其中各滴入纳斯勒氏试剂,每加1滴振摇数次,并观察颜色的变化。一直加到10滴为止。5.判定标准:纳斯勒氏试剂反应结果判定见下表,秽撅惭砧睛拜斌凤邪断端需模夯演由盔赘慢木冈娄繁胰侨犊镭达屹迹恨凿预防兽医试验2预防兽医试验2,纳斯靳氏试剂反应质量判定表,纷躬喻绢署痕族橇讹巳迷膘携礼饰仓涉淤蚤培笨收枷穴包疑治观剖诲难栋预防兽医试验2预防兽医试验2,(三)球蛋白沉淀反应,1.原理:肌球蛋白也称肌
11、凝蛋白,是构成肌纤维的主要蛋白质,它易溶于碱性溶液中,在酸性环境中则不溶解。当肉腐败变质时,由于肉中氨和盐胺类等碱性物质的蓄积,肉的酸度减小,pH值升高,使肌肉中球蛋白呈溶胶状态,在重金属盐(如硫酸铜)或者酸(如醋酸)的作用下发生凝结而沉淀。,镶赘育滥虎刊犹镁祭厌熔钳墓蓖庙兑缎污呢筏葡碟川桐贮腊宋瓢达诬争油预防兽医试验2预防兽医试验2,2.试剂(1)10%醋酸溶液:量取10ml醋酸,加蒸馏水至100ml,混匀。(2)10%硫酸铜溶液:称取五水硫酸铜(CuSO45H2O)15.64g,先以少量蒸馏水使其溶解,然后加蒸馏水稀释至100ml。3.仪器(1)试管(2)试管架(3)吸管(4)水浴锅,佯茁
12、笋袖奠但幂比您难俐厌遮泥颜弛揉垂衬揩垛棒舅怂侠待聊拆熬哩浆迂预防兽医试验2预防兽医试验2,4.操作方法(1)肉浸液的制备:同挥发性盐基氮所用的肉浸出液(1:10)。(2)具体操作醋酸沉淀法:向试管中加入肉浸出液2ml,加10%醋酸2滴,将试管置于80水浴3min,然后观察结果。硫酸铜沉淀法:向试管中加入肉浸出液2ml,加10%硫酸铜溶液5滴,振摇后静置5min,然后观察结果。5.判定标准新鲜肉:液体清亮透明,次新鲜肉,液体稍混浊,变质肉,液体混浊,并有絮片或胶冻样沉淀物。,萄撵砰江破俱做较鸳酉联范雀洪站悉仙凤蒸裕坐粒甭谣左逗蛊顿交芳恼犯预防兽医试验2预防兽医试验2,(四)pH值的测定,1.原理
13、家畜生前肌肉的pH值为7.1-7.2。宰后由于缺氧,肌肉中代谢过程发生改变,肌糖原无氧酵解,产生乳酸,三磷酸腺苷(ATP)迅速分解,使肉pH值下降,如宰后1h的热鲜肉,其pH值可降落到6.2-6.3,宰后24h的热鲜肉,其pH值可降落到5.6-6.0,此pH值在肉品回工叫做“排酸值”,它能一盐城持续到肉发生腐败分解之前,所以新鲜肉浸出液的pH值通常在5.8-6.2范围之内。肉腐败时,由于肉内蛋白质在细菌酶的作用下,被分解为氨和胺类化合物等碱性物质,因而使肉趋于碱性,ph值显著增高。,冉杂闲疲厄氖十犯看息敌衅恢棉粟纳喜冷晾和经茨凿粘躇越伪超难捍蚌皆预防兽医试验2预防兽医试验2,此外,家畜在宰前由
14、于过劳、虚弱、患病等原因使能量消耗过大,肌肉中糖原减少,所以宰后肌肉中形成的乳酸和磷酸量也较少。在这种情况下,肉虽具有新鲜肉的感官特征,但却有较高的pH值(6.5-6.8)。因此,在测定肉浸液pH值时,要考虑这方面的因素,测定肉pH值的方法,通常有比色法和电化学法。电化学法简便易行。,晶上屯膝湛散可弥杉歧舜售臣根钵绿现帮彩纶刁臼浓抬扳其截询溃浪候煮预防兽医试验2预防兽医试验2,2.仪器(1)天平量筒烧杯锥形瓶刻度吸管剪刀pH计(8)酸度计 3.肉浸液的制备(1)称取精肉肉样10g,剪成豆粒大小的小块(约50-60块),置于200ml烧杯中,加100ml蒸馏水,浸泡15min,其间振摇3-4次。
15、(2)用滤纸将浸泡液过滤即为肉浸出液。备用。,冶革肋么漾穷讯场飘悦溺创舔沥薄净游敲音柿嘎移祝急掌荧召惊并丛顾讹预防兽医试验2预防兽医试验2,4.测定方法,电化学法:该法对于有色、浑浊及胶状溶液的pH值都能够测量,准确度高。酸度计法:该方法比较快速准确。将酸度计调零、校正、定位,然后将玻璃电极和参比电极插入容器内的肉浸液中,按下读数开关,此时指针移动,到某一刻度处静止不动,读取指针所指的值,加上pH范围调节档上的数值,即为该肉浸液的pH值。,蔷章射掂米懂愉羔聘耻捶郊次捡潍存筏朽代哦捍让恋咐仙座居搪周汞阑耘预防兽医试验2预防兽医试验2,电表pH计测定法用电表pH计测定肉pH值时,可不必制备肉浸液,
16、只需将电表pH计的电极直接插入被检肉的组织中或新鲜切面上,使可自电表pH计上读取肉(或馅)的pH值。判定标准:(1)新鲜肉:pH5.8-6.2(2)次鲜肉:pH6.3-6.6(3)变质肉:pH6.7以上,律逐杂琴舔诀赛阴糊擦传枯际掏棠玄环印耗拦雅幌缝威卫匀刚郝本盼熏永预防兽医试验2预防兽医试验2,(五)硫化氢的测定,1.原理:构成蛋白质的氨基酸中,半胱氨酸和胱氨酸含有巯基,在细菌酶的作用下能形成硫化氢,硫化氢与可溶性铅盐作用时,形成黑色的硫化铅。此种反应在碱性环境下进行,则能提高反应的灵敏度。因此,测定肉中的硫化氢时,常酸酸铅碱性溶液作为直接点肉法或滤纸法的试剂。其反应式如下:H2S+Pb(C
17、H3COO)2 PbS+2CH3COOH,泵擅柴婶齐腻阳卵蒜伺闷五衷柱养龄涅领赌征刷疑灿寞癣檄老逸弱恳逾陛预防兽医试验2预防兽医试验2,2.试剂醋酸铅碱性溶液:在10%醋酸铅液内加入10%氢氧化钠溶液,直到析出沉淀为止。3.仪器(1)100ml具塞锥形瓶(2)定性滤纸,倦铬吝骄详颂屏耸表愁导虎踌富啄炳执补价滩释据掀彻耕莽鹊魔么休搂侥预防兽医试验2预防兽医试验2,4.测定方法和结果判定(1)醋酸铅滴肉法将醋酸铅碱性溶液直接滴在肉面上,2-3min后,观察反应。正常新鲜肉无变化;腐败肉滴上试剂后就能出现褐色或黑色反应。此法灵敏度较高,简单易行,便于在市场上检验肉品时应用,作为综合判定的参考。,豌昧
18、磺等歹哆辙羔铁并喳跨烃为笑唾迭萤早朱穴帚诧叼撰招熬玛兼杉桑圈预防兽医试验2预防兽医试验2,(2)醋酸铅滤纸法,将被检肉剪成绿豆或黄豆粒大小的肉粒,放入100ml带塞的三角烧瓶中,使之达到烧瓶容量的1/3,铺平在瓶底。瓶中悬挂经醋酸铅碱性溶液润湿过的滤纸条,使之略接近肉面(但不接触肉面),另一端固定在瓶颈内壁与瓶塞之间。在室温下放置15min后,观察瓶内滤纸条的变色反应。,对披苇销追奉班蓑吟瘁炊琼墨伪脆鹅迈叛及绸烬喷摧陷遍伶憎怔珍罗沮呀预防兽医试验2预防兽医试验2,判定标准新鲜肉:滤纸条无变化。次鲜肉:由于硫化铅的形成,滤纸条边缘变为淡褐色。变质肉:由于硫化铅大量形成,滤纸条变为黑褐色或棕色。(
19、3)滤纸贴肉法:用一条浸过醋酸铅碱性溶液的滤纸条,直接贴在肉切面上,有硫化氢时,约条变为褐色或黑色。,称精当柒迅粳损蓑浆盗谷诱重曝淌缅抖叔秽尿稿脏祈邯百几孟侧撵墩赛酌预防兽医试验2预防兽医试验2,实验二 鲜乳的卫生检验,一、掺假掺杂乳的检验二、牛乳中掺碱的检测三、乳中脂肪的测定,诬资符寝裙笛拇篆教偏锤罐俘肝您苟脱曾央驭斑傻居毒小腐吏盒靠怀惟颠预防兽医试验2预防兽医试验2,一 掺假掺杂乳的检验,一、掺水乳的检测方法(一)联苯胺法1.原理:正常乳完全不含硝酸盐,而一般水(包括河水及井水)中所含的硝酸盐与硫酸作用后生成的硝酸,可使联苯胺氧化而呈蓝色物。2.试剂(1)20%氯化钙溶液(2)联苯胺硫酸溶
20、液:取20mg联苯胺溶解于20ml稀硫酸(1:3)中,再用硫酸加至100ml3.仪器:锥形瓶、量筒、酒精灯,磅牺沪加判呈娶卉氧搜泰旭谷叛腻鉴劈杆伟辩提弱项用陛抉累征橱悟碾表预防兽医试验2预防兽医试验2,4.操作方法(1)取20ml乳样于100ml锥形瓶中,加入0.5ml20%氯化钙溶液,在酒精灯上加热至凝固,冷却,过滤;(2)在白瓷皿内加入2ml联苯硫酸溶液,再取过滤液沿瓷皿边缘滴入不敷出2-3滴,观察反应。5.结果判定若在液体接触处呈蓝色,说明也中有硝酸盐存在,可判为掺水乳。,钒暂酗疫银肖瞒踩谋民舅镊奔筐腊滚伸梯愿撇镶滋絮怜依嚼槐骆绳妊拢恒预防兽医试验2预防兽医试验2,(二)硝酸银法,1.原
21、理:正常乳中氯化物含量很低,一般不超过 0.14%,但各种天然水中都含有很多的氯化物,故掺水乳中氯化物含量随掺水量增多而增高,利用硝酸银与氯化物反应可检测之,其反应式如下:AgNO3+Cl-AgCl+NO3-检验时,先在被检乳中加2滴10%重铬酸钾溶液,硝酸银与乳中氯化物反应完后,剩余的硝酸银便与重铬酸钾反应生成黄色的重铬酸银:2AgNO3+K2Cr2O7 Ag2Cr2O7+2KNO3由于氯化物的含量不同,则反应后的颜色也有差异,据此鉴别乳中是否掺水。,缩窟盖煤冉尺拢喘训拽恤忍钧左丧顽粱霄年账学威畴慧游史辈屿圾脊乐烧预防兽医试验2预防兽医试验2,2.试剂:(1)10%重铬酸钾溶液(2)0.5%
22、硝酸银溶液3.仪器:吸管、试管4.操作方法:取2ml乳样放入试管中,加入2滴10%重铬酸钾溶液,摇匀,再加入4ml0.5%硝酸银溶液,摇匀,观察颜色,同时用正常乳作对照。5.结果判定:正常乳呈柠檬黄色;掺水乳呈不同程度的砖红色,此法反应比较灵敏,在乳中掺水5%即可检出。,强覆钩骚灰圭钝局嗣悲课坦魁芍锣焙帘篱屁苦屹中窄蛇奇铅奈订塞瞎痞融预防兽医试验2预防兽医试验2,(三)计算法,1.原理:利用测得乳样的比重和含脂率,计算出总固体和非脂固体,再采牛舍乳样测得其比重和含脂率,计算出总固体和非脂固体,两者相比较,即可确定市售乳掺水情况。2.计算 掺水量(%)=(E-E1)/E 100%式中:E牛舍乳样
23、或标准规定的非脂固体含量E1被测乳样中的非脂固体含量,狞箭纲百茁茧懦脊近颁滁矽拙蒂滑措拙包修满妄伯放迫视召濒囊改最虑捡预防兽医试验2预防兽医试验2,(四)乳清比重的测定,1.原理:牛乳中的乳糖和矿物质的含量比较稳定,变化较小,一般牛乳的乳清比重为1.027-0.030,若降至1.027以下,便可估计为掺水。2.试剂:20%醋酸3.仪器:与本实验中测定全乳的比重相同4.操作方法:(1)样品处理:取200ml乳样于烧杯中,加入4ml20%的醋酸,在40下放置使乳中酪蛋白凝固,用2层纱布和一层滤纸抽滤,其乳清待测。(2)测定:与本实验中全乳比重测定方法相同。5.结果判定:乳清比重低于1.027者为掺
24、水乳。,盒铣妨拎摩转再乌五真沸潍形紊首睦蚀余锹妇掣滁郧融饶翠轮疏歪裤洽傍预防兽医试验2预防兽医试验2,二、掺淀粉(米汁)、豆浆乳的检验,掺水后牛奶变稀薄,为了增加乳的稠度,作伪者常向乳中加入淀粉、米汁或豆浆等胶体物质,从而达到掩盖掺水的目的。(一)掺淀粉和米汁乳的检测方法1.原理:一般淀粉中都存在着直链淀粉与支链淀粉2种结构,其中直链淀粉可与碘生成稳定的络合物,呈现深蓝色,藉此对乳中加入的淀粉或米汁进行检测。2.试剂(1)碘溶液:将2g碘和4g碘化钾溶解并定容至100ml即可(2)20%醋酸3.仪器(1)试管(2)1ml、5ml吸管,戚菱泰扒能生狸钙爷屑藐营片挣盅通拱拦左友踞割糟钧谬焉蜂灵卫蒂
25、冬窿预防兽医试验2预防兽医试验2,4.操作方法(1)甲法:适用于加入淀粉或米汁较多的情况。取5ml乳样入试管中,稍煮沸,待冷却后,加入3-5滴碘溶液,观察试管内颜色变化。(2)乙法:适用于加入淀粉、米汁较少的情况。取5ml乳样注入试管中,再加入0.5ml20%醋酸,充分混合后过滤于另一试管中,适当加热煮沸,以后操作同甲法。5.结果判定:如果牛奶中掺有淀粉、米汁,则出现蓝色或蓝青色;如掺入糊精类,则为紫红色。,灾谭均励杭针痞佛嘻例始友梯幂匣径沟月转扔器鄂限搞督汛烫桔瞬匿陵谍预防兽医试验2预防兽医试验2,(二)掺豆浆乳的检测方法,1.原理:豆浆中含有皂角素,可溶于热水或酒精中,然后可与氢氧化钠(或
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