消化道寄生虫的病原检查.ppt

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1、第十九节 消化道寄生虫的病原检查,主要是根据,蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片，原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊，某些节肢动物；,可随粪便排出体外,有些虫体可在肛周产卵，绦虫孕节主动从肛门逸出过程中被挤破、虫卵可散落在肛周，,所以，采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫,注意：保证粪便新鲜，一般不超过24小时盛粪便的容器须干燥、洁净，无污染；容器外贴有标签，受检粪量一般为510g，或不少于30g，要严格按照粪检程序进行操作，以免漏检。,1.直接涂片法用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简便，连续作3次涂片，可提高检出率。（1）蠕虫卵检查：滴一滴生理盐水于洁净的载玻片，用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便

2、块，在生理盐水中涂抹均匀；涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下检查，如用高倍镜观察，需加盖片。应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵内含卵细胞或幼虫。,（2）原虫检查 活滋养体检查：涂片应较薄，方法同查蠕虫卵。气温愈接近体温，滋养体的活动愈明显。必要时可用保温台保持温度。包囊的碘液染色检查：直接涂片方法同上，以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多，可用吸水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查活滋养体，可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液，取少许粪便在碘液中涂匀，再盖上盖片。涂片染色的一半查包囊；末染色的一半查活滋养体。,

3、二、厚涂片透明法（改良加藤法）取约5mg（已用100目不锈钢筛除去粪渣）粪便，置于载玻片上，覆以浸透甘油孔雀绿溶液的玻璃纸片，轻压，使粪便铺开（2025mm）。置于3036温箱中约半小时或25约1小时。待粪膜稍干，即可镜检。玻璃纸准备：将玻璃纸剪成2230mm大小的小片，浸于甘油孔雀绿溶液（含纯甘油100ml、水100ml和3孔雀绿1ml的水溶液）中，至少浸泡24小时，至玻璃纸呈现绿色。使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。如粪膜厚，透明时间短，虫卵难以发现；如透明时间过长，则虫卵变形，也不易辨认。,定量透明法适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数。此法系应用改良聚苯乙烯作定量板，大小为403

4、01.37mm，模孔为一长圆孔，大小为84mm，两端呈半圆形，所取的粪样平均为41.7mg。操作时将大小约44cm的100目尼龙网或金属筛网覆盖在粪便标本上，自筛网上用刮片刮取粪便，置定量板于载玻片上，用一手的两指压住定量板的两端，将刮片上的粪便填满模孔，刮去多余粪便。掀起定量板，载玻片上留下一个长形粪样，然后在粪条上覆盖含甘油孔雀绿溶液的大小约为5.02.6cm的玻璃纸条，展平后加压，使玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经12小时粪便透明后置镜下计数。将所得虫卵数24，再乘上述粪便性状系数，即为每克粪便虫卵数。,三、浮聚法：利用比重较大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面。常用的方法有两

5、种：（1）饱和盐水浮聚法：此法用以检查钩虫卵效果最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯（高3.5cm，直径约2cm的圆形直筒瓶）中，加入少量饱和盐水调匀，再慢慢加入饱和盐水到液面略高于瓶口，但不溢出为止。此时在杯口覆盖一载玻片，静置15分钟后，将载玻片提起并迅速翻转，镜检。,（2）硫酸锌离心浮聚法：此法可用于检查原虫包囊，球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约1g，加1015倍的水，充分搅碎，按离心沉淀法过滤，反复离心34次，至水清为止，最后倒去上液，在沉渣中加入比重1.18的硫酸锌液（33的溶液），调匀后再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处，离心1分钟。用金属环取表面的粪液置于载玻片上，加碘液一滴，镜检。

6、,（3）蔗糖离心浮聚法：此法适用于检查粪便中隐孢子虫的卵囊。取粪便约5g，加水1520ml，以260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心510分钟，吸弃上清液，加蔗糖溶液（蔗糖500g，蒸馏水320ml，石炭酸6.5ml）再离心，然后如同饱和盐水浮聚法，取其表液膜镜检（高倍或油镜）。卵囊透明无色，囊壁光滑，内有一小暗点和发出淡黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大，常紧贴于盖片之下，但1小时后卵囊脱水变形不易辨认，故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖溶液。,浓聚法,1沉淀法：原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底，有助于提高检出率。但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差

7、。（1）重力沉淀法：取粪便2030g、加水成混悬液，经金属筛（4060孔）或2、3层湿纱布过滤，再加清水冲洗残渣；过滤粪液在容器中静置25分钟，倒去上液，重新加满清水，以后每隔1520分钟换水一次（34次），直至上液清晰为止。最后倒去上液，取沉渣作涂片镜检。如检查包囊，换水间隔时间宜延长至约6小时换一次,（2）离心沉淀法：将上述滤去粗渣的粪液离心（15002000rpm/min）12分钟，倒去上液，注入清水，再离心沉淀，如此反复沉淀34次，直至上液澄清为止，最后倒去上液，取沉渣镜检。,（3）醛醚沉淀法：置粪便12g于小容器内，加水1020ml调匀，将粪便混悬液经2层纱布（或100目金属筛网）过

8、滤，离心（2000rpm/min）2分钟；倒去上层粪液，保留沉渣，加水10ml混匀，离心2分钟；倒去上液，加10甲醛7ml。5分钟后加乙醚3ml，塞紧管口并充分摇匀，取下管口塞，离心2分钟，即可见管内自下而上分为4层。取管底沉渣涂片镜检。如检查原虫包囊，可加卢戈氏液染色，加盖片镜检。,六、钩蚴培养法 钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫。如冷开水约1ml于洁净试管内（110cm），将滤纸剪成与试管等宽但较试管稍长的T字型纸条，用铅笔书写受检者姓名或编号于横条部分。取粪便约0.20.4g，均匀地涂抹在紧竖条纸条的上部23处，再将纸条插入试管，下端浸泡在水中，以粪便不接触水面为度。在2030条件

9、下培养。培养期间每天沿管壁补充冷开水，以保持水面位置。3天后肉眼或放大镜检查试管底部。钩蚴在水中常作蛇形游动，虫体透明。如未发现钩蚴，应继续培养观察至第5天。气温太低时可将培养管放入温水（30左右）中数分钟后，再行检查。,五、肛门拭子检查法适用于在肛周产卵（蛲虫），或常在肛门附近发现带绦虫的虫卵检查。1棉签拭子法：先将棉签浸泡在生理盐水中，取出时挤去过多的盐水，在肛门周围擦拭，随后将棉签放入盛有饱和盐水的试管中，用力搅动，迅速提起棉签，在试管内壁挤干盐水后弃去，再用饱和盐水法，覆盖一载玻片，5分钟后取载玻片镜检。,2 可将擦拭肛周的棉签放在盛清水的试管中，经充分浸泡，取出，在试管内壁挤去水分后

10、弃去。试管静置10分钟，或经离心后，倒去上液，取沉渣镜检。3透明胶纸法：用长约6cm，宽约2cm的透明胶纸粘擦肛门周围的皮肤，取下胶纸，将有胶面平贴玻片上，镜检。,八、淘虫检查法 为考核驱虫疗效，常需从粪便中淘取蠕虫进行鉴定与计数。取患者服药后2472小时的全部粪便，加水搅拌，用筛（40目）或纱布滤出粪渣，经水反复冲洗后，倒在盛有清水的大型玻皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时，应在玻皿下衬以黑纸。,带绦虫孕节检查法绦虫节片用清水洗净，置于两载玻片之间，轻轻压平，对光观察内部结构，并根据子宫分支情况鉴定虫种。也可用注射器从孕节后端正中部插入子宫内徐徐注射炭素墨汁或卡红，待子宫分支显现后计数。卡红染液配制：钾明矾饱和液100ml，卡红3g，冰醛酸10ml。混合液置于37温箱内过夜，过滤后即可应用。,