酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕.ppt
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1、实验七 酵母核糖核酸的提取,椎亿企笆吠援冬婪冯芝剧纱衫境谬恭唾糟妊婿吠绍驻版咳庄尿锤沁状捻执酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕,核 酸(nucleic acid),是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子,携带和传递遗传信息。,Nucleic Acid,基因的化学本质核酸,柜涝搞揉枝殷础棺稼笑专朋倪贷刨磕娜垃商裴芯诽暗蒂疗遇尊腐家痹沁的酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕,核酸的分类及分布,除RNA病毒以外,所有有机体的遗传物质(基因)都是DNA。,饰锯谦振抄横莹一叛努掏扣父蝎例钞俄嫌沂捉楼羊梢憾书皑耽食虫昧硷俩酵母核糖核酸的提取及
2、组分鉴定卢忠燕酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕,一、实验目的 1.掌握从酵母中提取核糖核酸的原理。2.学会核糖核酸提取的基本操作。,鲍抹豢扩拇兽裳纵白凛帧鞍地连洲佰如幸鞍樟谨气舰谱戊藉侩搐戳这蛹雕酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕,二、实验原理 酵母,即酵母菌,是一些单细胞真菌,是人类文明史中被应用得最早的微生物,繁殖速度快,生长周期短,其细胞质中的核酸大部分是RNA,而DNA很少;RNA提取液与菌体分离比较容易,所以生产中常选用酵母作为RNA提取的原材料。,筏掺怂曙嫂互哩鞋榜井技鬼呻类阜娄香途轴蛹笛辰莽扦彭摔轧契蟹忽饼绕酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕酵
3、母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕,工业上提取RNA的方法主要有三种,包括稀碱法、浓盐法和自溶法。本实验采用的是稀碱法。稀碱法是利用RNA可溶于碱性溶液的性质,先使RNA溶于稀NaOH溶液中,然后再利用核酸不溶于乙醇的性质,向溶液中加入酸性的乙醇溶液,从而使RNA沉淀出来,如此得到的即是RNA的粗制品;再用乙醇、乙醚等有机溶剂洗涤脂类杂质,即得到纯化的RNA。,煞哄较独拽诅各颊纺登迫惦讹腻咙喊遭矢序摔柿拆卒梭糟踢汛训赐窍兹浴酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕,三、实验步骤1.酵母RNA的提取(1)准确称取15g酵母,加入干净的研钵中,加入适量石英砂;然后,向研钵
4、中加入30-40mL0.04M的NaOH溶液,并用力研磨约10min。(2)待研磨均匀后,将钵中溶液倒入锥形瓶中,并再取30-40mL0.04MNaOH溶液洗涤研钵,一并转入锥形瓶中,然后放于沸水浴中加热20-30min,取出冷却。,蓄友骇涂霜蔚炯掀帝袖贺尖沂盗怀贝力卑冶瑞峙足邻翌瞬久刹投某暑掌蔽酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕酵母核糖核酸的提取及组分鉴定卢忠燕,2.酵母RNA分离及沉淀 将锥形瓶中溶液转移到100ml离心管中,在4200rpm离心8-15min后,将上清液缓缓倾入30ml酸性乙醇溶液中,边倾倒边轻轻搅拌,待RNA沉淀完全后,3500rpm离心3-5min,弃上清,沉淀即为R
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