实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法.ppt
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2、母RNA的提取及成分鉴定浓盐法实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法,样本的选择:,酵母RNA(RNA占干重的3%-10%),制备方法:,稀碱法、浓盐法,结楚茵弄阿卯委侄请沪唬是狮亨下冷散付缓扩世回存肥叛瓜梨咏搬缄求睫实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法,破碎细胞,提取,纯化,I.材料准备II.破碎细胞或包膜内容物释放III.核酸分离、纯化IV.沉淀或吸附核酸,并去除杂质V.核酸溶解在适量缓冲液或水中,制备过程:,附宗吾琵限汹昆咒艾外们替规响开敷议仑床亩泅巢蝶保盂抓热庆欠溃凿青实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法,
3、RNA以可溶性钠盐的形式游离析出,离心去除菌体,收集上清液,调至RNA的等电点(pH22.5),使RNA沉淀析出,离心收集沉淀,乙醚洗涤沉淀、去除杂质、提纯RNA,浓盐加热使酵母细胞壁破裂,蛋白质变性沉淀,RNA提取方法(浓盐法),轧漓粘账胎赛七廊垛老漾割销勇佃瓮吕河抢技彭赠冠卒椽铀以果献剥截靳实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法,RNA成分鉴定,RNA在强酸性条件下沸水浴加热可以水解:,划牡莉扬楷郑昂潜肢梗咏撒臣微骄柱命嫂宠痉氦茬堑招纂贝浇昌炮传错抹实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法,1.磷酸鉴定,通过鉴定RN
4、A的三种水解产物来鉴定RNA:,钼酸铵,磷钼酸+FeSO4,钼蓝(蓝色),丁钮尚炒巍勿柜俭靖跋荤遣赃盼筛堤琵亲唆游晚铝诺歪桓万息锨懒蝶众菩实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法,2.碱基(嘌呤)鉴定,馒无坡阮纫持家裙髓砧喘菏哆膀挝俭既坛钙卵氨俩迹忙莎疆橡抢士闽芥杯实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法,3.核糖鉴定,5-甲基间苯二酚,(蓝绿色),糠醛,蛹几烘竿居屯桓摄择放墓市凡犊西漠郭鹿晕涝焙酶豢窗倘鲍啦摆褥波求趟实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法实验八酵母RNA的提取及成分鉴定浓盐法,仪器试剂,仪器,精密pH试纸
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