实验室指标收集和判断.ppt

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1、第2节 实验室指标收集和判断,单元一 头发样品的收集,1.头发的生理学知识 生长速度1-2cm/月，头发的主要成分是角蛋白，由多种氨基酸组成，其中以胱氨酸的含量最高；还含有黑色素和铁等无机元素，并能影响头发的颜色。2.营养与头发 氨基酸和维生素是头发生长的必需营养成分；而铜、铁、锌等微量元素和泛酸又能防治头发的脱落。钙对头发的乌黑光润有特殊功用。另一方面，检测头发中微量元素的含量可以用来评价机体的营养状况。3.收集头发样品的目的和意义（1）采用头发样本检测其中无机元素的含量可以用来评价机体的营养状况和作为环境中某些元素污染的评价指标。测定头发中钙、铁、锌、铜、硒、镁、铬、铅、锰等元素，可反映机

2、体内相应元素的水平。（2）头发的收集与其他生物样本的采集不同，不会对人体造成直接的影响，容易被儿童和家长接受。（3）样本保存和运送方便，需要量少，保存时间长，有利于大样本量的收集。,不同部位的头发中微量元素的含量不一样；头发生长时间不同，其中无机元素含量也有差异。正确的方法应该是剪取被测者枕部发际处至耳后从发根部起23cm的头发。一方面是因为不影响美观，更重要的是因为脑后枕部头发不受激素水平的控制，生长慢，可以反映更长时间的营养状况。,4.头发样本收集的部位,微量元素检测属微量分析范畴，而且微量元素在自然界普遍存在，任何细微的内、外界因素都可能影响其结果的可靠性，所以质量控制在微量元素分析过程

3、中非常重要。（1）环境对头发的污染。（2）洗发或护发剂在头发中的残留，铅、锰。,5.采用头发样本评价机体营养状况的影响因素,（3）头发生长在人体末端，代谢活动低，只能反映前某一时间段的水平，而不能反映近期变化。（4）采集头发的部位不正确，也会影响结果。（5）头发中微量元素的水平还与头发的处理（染、烫等）因素有关。（6）头发中微量元素水平与当地环境中食物、水中微量元素水平有关，不同性别、年龄段的人群头发中微量元素含量也有差异。所以，用头发中的微量元素水平来评价机体的营养状况时，要选用当地的适当年龄段人群的正常参考值标准进行评价。,头发样品收集步骤,1.准备工作（1）不锈钢剪刀，并用纱布或滤纸擦干

4、净。（2）干净塑料杯或塑料试管或滤纸袋。2.工作程序 程序1 被测者自然站立或坐在凳子上；梳辫子或盘发结的，要解开辫子和松开发结，让头发披散着。,程序2 收集者站在被测者身后，让被测者稍微低 头，收集者左手带上一次性手套，找到脑 后枕部，在枕部发际至耳后处提起一小撮 头发，右手握剪刀，从发根12cm处剪断。程序3 将头发放到干净的塑料杯后塑料试管或纸 袋中。头发长的需要将头发远端剪掉丢弃，只保留剪下的头发近端35cm。程序4 将盛有头发的容器密封好，登记编号和姓名。程序5 温室保存,3.注意事项（1）动作要轻柔，不能粗暴的将头发提起，以免被测者感到疼痛。剪头发时要小心，更不能剪到头皮。（2）一

5、定要使用不锈钢剪刀，防止头发被微量元素污染。（3）位置要定位准确，不能只图方便，随便在某个位置剪一点头发。（4）只保留剪下的头皮近端35cm，丢弃远端头发。（5）剪下的头发不需太多，以免影响被测者发型美观，但要给前处理洗涤时留出损失量，一般收集12g样品。（6）如遇到枕后没有头发的儿童，可剪取其他部位头发。,1.尿液收集的种类,午餐后2h收集患者尿液，对病理性糖尿和蛋白尿的捡出更为敏感。,（1）任意尿,（2）晨尿,（3）餐后尿,即留取任何时间的一次尿液，适用于门诊、急诊患者。本法留取尿液方便。但易受饮食、运动、用药等因素的影响,即清晨起床后的第一次尿标本，为较浓缩和酸化的标本。受前天膳食影响较

6、小，其化学成分较恒定，故采用较多。,单元2 尿液的收集和保存,（4）白昼尿及夜间尿,（5）24h尿,（6）负荷尿,白天12h（早8点至晚8点)夜间12h（晚8点至明晨8点）的尿液，进行尿量、尿比重等对比测量，对心脏和肾脏疾病的诊断有一定价值。,1)早饭后排空膀胱中尿液，然后口服硫胺素5mg、核黄素5mg、尼克酸50mg、抗坏血酸500mg（按测定需要选服用）；2)最后将服药后4h内所排出尿液全部收集于棕色瓶中.量体 积后取约100mL放入预先加有100mg草酸的小棕色瓶中；3)尿液混匀后调pH值至4.0，即可测硫氨酸、核磺酸、抗坏 血酸或N1-甲基尼克酸胺的含量。,因为尿中的溶质（肌酐、蛋白质

7、、糖、尿素和激素等）在一天不同的时间排泄的浓度不同，为准确定量而要收集24h尿液。,单元2 尿液的收集和保存,尿液是一种良好的细菌培养基。尿液留取后应即时检验，若必须推迟检验或收集24h的样本，则应放冰箱冷藏或加防腐剂。,2.尿液的保存,(1)冷藏于4,如果收集的尿液所要进行的检测不宜加防腐剂，最好放入4度冰箱保存；在收集24h尿液样本过程中，每次留取尿后应立即冷藏。,抑制细菌生长和维持酸性,但有些对检验有影响，要选择合适的防腐剂。（P84四）福尔马林/甲苯/麝香草酚/浓盐酸 碳酸钠/氯仿/混合防腐剂,（2）加入化学防腐剂,单元2 尿液的收集和保存,检验尿液中的营养素及其代谢产物是重要的营养概

8、况评价手段。,用于测定人体蛋白质和氨基酸代谢。用于测定水溶性维生素的耐受实验和研究水溶性维生素的代谢。用于评价机体水溶性维生素的营养状况。用于研究人体矿物质（如钙、铁、锌等）的需要和代谢情况。研究和评价糖尿酸和药物等的代谢情况。,3.尿液用于营养评价的意义：,单元2 尿液的收集和保存,能力要求：24h尿液样品的收集和保存,【工作准备】:(1)收集容器:500mL的收集瓶或尿杯和盛装2L以上的容器(2)冰箱和防腐剂.,单元2 尿液的收集和保存,能力要求：24h尿液样品的收集和保存,【工作程序】:(1)在收集容器上贴上标签(姓名,性别,年龄和检测内容).(2)收集前用肥皂、清水洗净外阴及会阴周围，

9、然后排尿；前段小便不要，将中段尿直接排入准备好的消毒容器中，立即用消毒过的塞子或盖子封好送检。男性标本比较容易收集，女性的尿标本应注意不要被大便、月经等污染 若24h尿液的收集，要求被检者清晨8时排空小便但不收集,此后至次日晨8时的每一次都收集.,单元2 尿液的收集和保存,(3)标本收集后应立即检查是否有可见污染，尿量是否足够 足够的标本尿量一般不能少于12mL。若为24h收集的尿液，测量总体积,混匀，取出约60mL于棕色瓶并写上总尿量，如果一切符合要求，则送检或保存。送检样品不可过夜。(4)尿液保存 在不具备立即检测条件的情况下，收集的尿液样品可根据测定指标要求采取下列保存措施之一保存。A.

10、冷藏 放置4冰箱内保存。B、加防腐剂。每升尿中加入5mL福尔马林，或5-10mL甲苯，或10mL浓盐酸，或0.5-1g麝she香草酚（根据实验目的只加入一种即可），混匀后室温保存或放入冰箱中冷藏。,【注意事项】：收集容器要求清洁、干燥、一次性使用，有较大开口,无化学干扰物质（消毒剂），容器上有明显标记（姓名、编号、收集日期）。如要进行尿培养，应在无菌条件下用无菌容器收集中段尿液。避免阴道分泌物、月经、粪便等污染尿液。（3）应留有足够的标本，任意一次尿标本至少留取12mL，其余项目最好超过50mL。如果收集的是定时尿，容器应足够大，并加盖，必要时加防腐剂。将尿液放置在阴凉避光处，防止阳光的照射。

11、掌握正确的收集方法，及时送检。,一次性,单元2 尿液的收集和保存,正常粪便主要由消化后未被吸收的食物残渣、消化道分泌物、大量细菌和无机盐及水等组成。粪便检查的主要目的是了解消化道有无炎症、出血、寄生虫感染、恶性肿瘤等情况；可以判断胃肠、肝胆胰腺系统的功能状况;了解肠道菌群分布是否合理,检查粪便中有无致病菌以协助诊断肠道传染病;进行营养代谢实验.常要收集粪便，收集的时间至少3天.,单元3 粪便的收集和保存,知识要求:,1.粪便收集的种类 检测项目不同，所需粪便的量也是不同的。一般核桃大小的成形粪便或5-6汤匙的水样便对常规检查来说就足够了。如要做特殊检查（如离心或培养），则需要整次或整天甚至3天

12、的粪便。(1)常规粪便标本 通常采用自然排出的粪便，取1小块粪便放在纸盒内送检即可。标本不宜取得过少，以免干燥影响检验，一般取约拇指大小的即可。如为腹泻病人应采取脓血或黏液部分送检。(2)浓缩粪便标本 应将24h内排出的所有粪便收集于同一容器送检，注意防止小便的混入。,用干净竹签选择有粘液,脓血等病变成分的粪便.外观无异常的从深处取材.,单元3 粪便的收集和保存,2.粪便的保存:粪便本身含有大量细菌、水分、食物残渣、消化道分泌物等，因此，要求粪便标本应尽快送检，尤其是检查痢疾阿米巴原虫或滋养体时应排便后立即检查，不要超过10min,从脓血和稀软部分取材，寒冷季节标本传送及检查时均需保温。,单元

13、3 粪便的收集和保存,(1)固定液中保存(适用寄生虫及虫卵检测,采集24小时的)(2)冷藏保存(纸盒装的采集后放入有盖的玻璃瓶然后放入 冰箱保存.时间2-3天)(3)运送培养基保存(腹泻病人的粪便标本用作致病菌检测时需保存于运送培养基中)。(4)0.05mol/L硫酸保存(做氮平衡实验时收集的粪便应加入适量0.05mol/L硫酸后保存)(5)冷冻保存(用于矿物质代谢研究的粪便可冷冻保存),3.粪便用于营养学研究的意义(1)用于测定人体蛋白质的需要量(氮平衡法).(2)用于评价食物蛋白质的营养价值(氮平衡法).(3)用于研究人体矿物质(如钙、铁、锌等)的需要量.(4)用于评价食物矿物质的吸收率以

14、及影响矿物质元素吸收 的因素.(5)用于检测体内矿物质随粪便的排泄情况.,单元3 粪便的收集和保存,血液中很多化学成分受饮食、药物及离体后物理和化学因素的影响，因此，应在早晨空腹或禁食6h以上时采取血液，分析结果才具有真实的代表性。1.血液样品的种类 包括指血、耳垂血、足跟血、静脉血、眼眶取血等 2.抗凝剂的使用 抗凝剂的选用是否恰当，会直接影响分析结果。用量不足，达不到抗凝效果；用量过多，又会妨碍测定。常用抗凝剂中草酸钾最为常用，肝素也较常用。,单元4 血液的收集和保存,知识要求：,3.血清和血浆的分离 血清和血浆的区别:血液离开血管后，血液凝固并析出血清。血浆含有纤维蛋白原而血清没有,其他

15、成分一样.血清和血浆都需要采血后立刻分离。目前常用的化学或生化方法大多用血清进行。若需血清标本则直接将血液注入清洁的试管或小瓶内，待其凝固后取上层血清即可。若用全血或血浆进行检验，应将血液注入含有抗凝剂的试管或小瓶内尽快分离出血浆和各成分。血浆的分离比血清快且量多。,单元4 血液的收集和保存,能力要求：血样的收集和保存,【工作准备】:(1)采血容器 采耳垂或指尖血可用玻璃毛细管或聚乙烯管，每管以盛装2/3-3/4为宜，以留作封口。采静脉血一般用注射器，采血器具及装血样的容器都必须经过严格清洗及消毒，以防污染而影响结果。（2)抗凝剂:(常用的是草酸盐,肝素)。(3)离心机、冰箱、试管或离心管、试

16、管架等。,单元4 血液的收集和保存,程序1 血样的采集 专业人员操作 1)末梢采血 主要有耳垂取血和指尖取血(无名指内侧)两种方法,婴儿也可在脚后跟(应无冻疮、炎症、水肿、破损.).烧伤病人选择皮肤完整处.对于体内出血,凝血功能检测项目（血小板计数、出血时间或凝血时间等）的检测，应了解患者是否使用过抗凝、促凝的药物,以减少干扰因素的影响.,单元4 血液的收集和保存,【工作程序】:,程序1 血样的采集,先将采血手指充分按摩或浸于热水中片刻，使血旺盛。用75%的消毒棉球消毒皮肤，取血者左手紧捏采血手指的指端上部，右手持消毒的直形三棱针或弹簧刺血针刺破指端，刺入深度一般为2mm左右。第一滴血用棉球拭

17、去.然后用采血管吸取或用小试管承接血液。在冬季从寒冷的室外进到室内后不要立即取血，应待待采血的耳垂和手暖和起来。采指血前不要用热水烫手，保持手指干燥。采耳垂血时应将耳垂上的耳环等挂饰物取下，采血后不要立即挂上。采血后应用消毒棉块或其他消毒止血物品压紧针刺破处，不要触及赃物，不要立即浸水洗手。,2)静脉采血 用血量较多时用此法,采血器材应用一次性注射器。程序2 血清和血浆的分离 采样后应立刻分离,离心速度不应太高。不能及时分离时应放于在4度冰箱内保存不能超过72小时。,成人多用肘前静脉,肥胖者可用腕背静脉一般采取坐位重病人可躺在床上。,单元4 血液的收集和保存,程序3 血样保存 温度对血样的影响很大 保存中试管标签相当重要,一般用油笔或不掉的标签.,血清在38度放置1小时,VC可被破坏胡萝卜素在室温下仅仅保存几小时.血清样品在-30可放置几个月乃至数年,注意严密封口.),单元4 血液的收集和保存,