其他细胞型微生物.ppt

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1、其他原核细胞型微生物,螺旋体：柔软细长，螺旋状支原体：无细胞壁，无生命培养基上培养的最小微生物衣原体：特殊的生活史立克次体：严格活细胞寄生,人畜共患病节肢动物传播自然疫源性疾病性传播疾病新发传染病,第22章螺旋体Spirochetes,螺旋体 spirochete,特点细长、柔软、弯曲、螺旋状，运动活泼常用镀银染色，或负染色二分裂法繁殖对抗生素敏感,属和代表菌 引起人类疾病 传播方式或媒介,密螺旋体属（Treponema）814个螺旋，规则，细密，两端尖直 苍白密螺旋体苍白亚种 梅毒 性传播 苍白密螺旋体地方亚种 地方性梅毒 黏膜损伤 苍白密螺旋体极细亚种 雅司病 皮肤损伤 品他密螺旋体 品他

2、病 皮肤损伤疏螺旋体属（Borrelia）310 个螺旋，不规则 伯氏疏螺旋体 莱姆病 硬蜱 回归热疏螺旋体 流行性回归热 体虱 杜通疏螺旋体 地方性回归热 软蜱 奋森疏螺旋体 咽峡炎、牙龈炎 条件致病钩端螺旋体属（Leptospira）数十个 规则，更细密,一端/两端呈钩状 问号状钩端螺旋体 钩端螺旋体病 接触疫水,致病螺旋体的分类,培养,伯氏螺旋体 BSK培养基钩端螺旋体 Korthof培养基 液体云雾状生长 固体扁平透明菌落梅毒螺旋体 家兔眼前房、睾丸,密螺旋体属(Treponema),病例：某男，28岁，某年10月某医院皮肤科就诊。就诊2周前 二手掌发疹拌轻痒。曾疑为“多形性红斑”治疗

3、1周余无 效。大约近1月来在躯干、头部、四肢、手足陆续发疹，除手部外，其他处皮疹无痒感。经询问6月份有嫖娼史。7月份曾发生龟头糜烂，大腿根部有无痛硬结。体检：手足均见圆形红斑，躯干部散在丘疹伴鳞屑，大腿内侧 同样皮疹。阴部、口腔黏膜无皮疹。颌下、枕后、肘后、颈部淋巴结如豆大，可触之，无压痛。检验：USR 1：8（阳性）,梅 毒 病 人 病 例,问题,1、梅毒的病原体是?2、梅毒的传播方式？3、梅毒的临床表现？4、临床上哪一期梅毒传染性最强？哪一期的病人最常见？5、有哪些实验室检查有助于确诊梅毒的临床诊断？,梅毒螺旋体Treponema pallidum（苍白密螺旋体苍白亚种）,两端尖直、8-1

4、4个密螺纹，Fontana镀银染色呈棕褐色运动活泼无合适培养基，组织细胞培养 抵抗力极弱，对红霉素、青霉素、砷剂敏感,注：4血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险,二、致病性-梅毒,致病物质：透明质酸 荚膜样物质（唾液酸、粘多糖）传 染 源：梅毒病人（人是唯一宿主）传播途径：三种（性传播、血液传播、垂直传播）,先天梅毒：三联征：锯齿形牙、间质性角膜炎、神经性耳聋（垂直传播）后天梅毒：传染过程分三期，反复隐伏和再发（性传播、血液传播）,临床表现,第一期：硬性下疳期第二期：梅毒疹期第三期：树胶肿期,后天梅毒,早期梅毒,晚期梅毒,三期梅毒,橡胶肿,梅毒的临床分期及特点,先 天 梅 毒,先天梅毒儿,锯

5、齿形牙,免疫性,两种抗体特异性制动抗体-抗TP抗体反应素（IgA+IgM）-抗脂质抗体，辅助诊断，非特异性,传染性免疫细胞免疫,病史+临床症状+病原体检测+血清学检测,梅毒诊断,诊断早期：检测病原体/抗原 暗视野显微镜 硬下疳渗出液 镀银染色 淋巴液抽取液 免疫荧光 ELISA中晚期：检测抗体 初筛试验(非TP抗原）-VDRL、RPR、USR 确诊试验(TP抗原）-FTA-ABS（荧光密螺旋体抗体吸收试验）TPHA（梅毒螺旋体血凝试验）TPI（梅毒螺旋体制动试验）其他：PCR、PCR-EIA,非TP抗原试验,1.性病实验室玻片实验（venereal disease reference labo

6、ratory,VDRL)牛心肌类脂与TP脂质成分或TP损伤宿主细胞释放的抗原有交叉，可与反应素IgM或IgG结合:,牛心肌类脂(抗原),病人血清(含反应素),絮状沉淀（）,2.快速血浆反应素环状卡片试验（rapid plasma reagin,RPR）VDRL的改良试验，适合大规模筛选，初筛,VDRL抗原+活性炭颗粒,病人血清（含反应素）,黑色凝集块,五、防治原则,加强卫生宣传和社会管理避免经性接触而感染病人应早诊断及彻底治疗治疗首选青霉素且剂量要足,形态 两端钩状，密螺纹，运动活泼 Fontana镀银染色 培养 易人工培养（Korthof）抵抗力 湿土或水中强抵抗力，对青霉素敏感,钩端螺旋体

7、属 Leptospira,钩端螺旋体,抗原结构内部抗原-类脂多糖复合物，分群依据 刺激产生补体结合抗体 可用以诊断表面抗原-多糖蛋白复合物 分型依据：25个血清群，273个血清型 我国：黄疸出血群和波摩出血群 刺激产生保护性抗体,致病物质:溶血素、细胞毒因子、内毒素样物质：发热、炎症与组织坏死 传染源与储存宿主：鼠类和家畜（猪等）传播方式：接触疫水或疫土时通过破损皮 肤、粘膜（完整）；垂直传播；哺乳等 流行季节：秋收水稻、雨季或洪水时,致病性,致病 鼠 鼠 排泄物猪 猪 疫水 人体 早期：感染毒血症期 中期：器官损伤期淋巴系统、血循环 肺出血型、流感伤寒型 黄疸出血型、肾衰竭型 钩体血症 脑膜

8、脑炎型 晚期：恢复/后发症（免疫损伤）,临床特征：寒热“三痛”爬不起，拒绝检查腓肠肌，眼红出血淋巴肿，流行多在夏秋季。,免疫体液免疫为主，病后可获针对同型的牢固免疫力诊断检测钩体或相应抗原镀银染色免疫荧光免疫酶染色暗视野显微镜（结合疫水检查及动物试验结果）检测抗体显微镜凝集试验：抗体滴度 1：300为阳性，特异性、敏感性高间接凝集试验 特异性不强但简便快速补体结合试验 协助早期诊断,首选青霉素多价全细胞死疫苗 新一代外膜疫苗,防 治,疏螺旋体属(Borrelia),有 3-10个稀疏而不规则的螺旋，呈波浪状,可进行人工培养，但营养要求较高，生长缓慢,疏螺旋体,致病物质：侵袭力，内毒素样物质所致

9、疾病莱姆病（自然疫源性传染源）传播方式储存宿主：白足鼠、鹿传播媒介：硬蜱（伯氏螺旋体在其肠中繁殖）传播方式：叮咬（蜱粪便、唾液感染伤口）病程潜伏期（3-30天）及表现叮咬处慢性移行性红斑（2-3W）早期症状：头痛、发热、肌痛等晚期症状：皮肤、神经、关节、心脏，一个或多个系统损害免疫性:体液免疫为主,微生物学检查和防治,血清学检查及分子生物学诊断技术加强防护，防止硬蜱叮咬人用疫苗仍在研制中。,回归热螺旋体,回归热是多种疏螺旋体引起的疾病虱传回归热（流行性回归热）回归热疏螺旋体蜱传回归热（地方性回归热）其他15种疏螺旋体急起急退的高热，反复发作，肌肉酸痛，黄疸、肝脾肿大、出血倾向等体液免疫为主高热

10、期涂血片查螺旋体,第19章支原体Mycoplasma,支原体是一类缺乏细胞壁的，能在无生命培养基上生长繁殖的；最小原核细胞型微生物,柔膜体纲支原体目支原体科，共4个属，支原体属和脲原体属与人类疾病有关,生物学性状,多形性：球形、球杆形、长丝状及分枝状等着色困难：G-，常用Giemsa染色法染成淡紫色。繁殖方式:二分裂方式、出芽、分枝,细胞膜：三层内外为蛋白质和多糖中间层为脂类（磷脂）胆固醇位于磷脂之间,对作用于细胞壁的抗生素不敏感对干扰蛋白质合成的药物敏感作用于胆固醇的物质可使其细胞膜破裂而死亡，如两性霉素B,生物学性状,培养特性:荷包蛋样菌落,含人或动物的血清(1020%)及酵母浸液的培养基

11、。鸡胚绒毛尿囊膜细胞培养,抵抗力:对醋酸铊、结晶紫强抵抗力，对强力霉素、红霉素敏感。,支原体污染是细胞培养的重要原因之一,支原体与细菌L型的区别,支原体自然界广泛存在在遗传上与细菌无关（独立的微生物）生长时需胆固醇等渗培养,L型由细菌诱导生成在遗传上与细菌相关（可回复）生长时不一定需胆固醇高渗培养,两者相同点？,解脲脲原体分解尿素产氨，使酚红变红，液体清亮，为阳性（右）,生化反应,肺炎支原体：只分解葡萄糖人型支原体：仅水解精氨酸解脲支原体：利用尿素,二、致病性与免疫性,顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上,夺取宿主细胞膜上的脂质和固醇,产生毒性代谢产物,粘附并损伤精子、干扰精卵结合（溶脲

12、脲原体）,粘附、侵入CD4 T淋巴细胞（穿透支原体）,细胞免疫：巨噬细胞吞噬杀灭作用,体液免疫：IgG的调理作用,粘膜免疫（SIgA）,免疫性,主要病原性支原体,肺炎支原体（M.pneumoniae）原发性非典型肺炎（占非细菌肺炎的1/2），5-15岁易感，夏末秋初高发泌尿生殖道感染支原体：性传播疾病（STD）人型支原体 M.Nominis：能引起渗出性咽炎及尿道炎，也与卵巢脓肿、产褥热等有关生殖支原体 M.genitalium解脲脲原体（U.urealyticum）：非淋菌性尿道炎，可致不孕不育症，常与衣原体、淋球菌合并感染其他支原体：穿透支原体 M.penetraus发酵支原体 M.fer

13、mentans梨支原体 M.pirum,微生物学检查分离培养含特殊营养成分培养基上特殊菌落生化反应生长抑制试验（GIT）代谢抑制试验（MIT）血清学检查补体结合试验冷凝集试验ELISA测抗原,微生物学检查 生长抑制试验（GIT）:方法类似药敏试验，只是滤纸片中抗生素换成抗血清，抗原抗体相应，就会出现抑菌圈。,代谢抑制试验（MIT）：培养基中加抗血清，若抗原抗体相应，支原体不能分解葡萄糖，指示剂酚红不变色，为阳性，反之，变色为阴性。,微生物学检查冷凝集试验：检测患者血清中是否含有抗红细胞类抗原的特异性IgM抗体效价及动态变化，该IgM抗体在04时能与自身红细胞或O型人红细胞发生凝集反应，37时已

14、凝集的红细胞又完全散开 单份血清滴度为1：64或双份血清效价4倍以上上升有诊断意义。50的支原体感染者会呈阳性，但特异性不高。临床上很多疾病都会出现冷凝集试验阳性，需结合临床其他指标作出判断。,防治原则,预防：目前尚无有效疫苗。治疗 选敏感的抗生素如四环素、红霉素等抑制蛋白质合成的抗生素，抑制细胞壁合成的抗生素通常无效。,第21章衣原体（Chlamydia）,概念：是寄生真核细胞内 有独特发育周期 能通过细菌滤器 的一类原核细胞型微生物。,世界首次分离培养成功沙眼衣原体；“沙眼金奖”获得者汤飞凡教授,生物学性状,独特生长发育周期：,始体或网状体(Reticulate body,RB),包涵体：

15、指在易感细胞内繁殖的始体和子代原体的空泡，具有鉴别意义，成熟的包涵体含大量原体。,抵抗力：对热、常用消毒剂、红霉素敏感 75%乙醇 0.5min可杀灭；耐低温和干燥（冷冻干燥保存30年）,感染性 胞外稳定性 繁殖力 代谢活性 原体 0.2-0.4um+-始体 0.5-1.0um+,培养特性：鸡胚卵黄囊接种 Hela细胞,抗原结构：属特异性抗原（位于胞壁，脂多糖）种特异性抗原（主要外膜抗原，MOMP）型特异性抗原（种间分血清型依据）主要外膜蛋白易变异,分类,根据抗原性分类：按细胞壁上LPS、脂蛋白LPS抗原性分属按细胞壁上主要外膜蛋白（major outer membrane protein,M

16、OMP)抗原性分种按MOMP上可变区抗原表位分型（分4个型）根据基因结构分类：衣原体属：沙眼衣原体、淋巴肉芽肿衣原体嗜衣原体属：肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体,衣原体分类：,衣原体属：沙眼生物变种沙眼衣原体 性病淋巴肉芽肿变种 鼠生物变种 肺炎衣原体 鹦鹉热衣原体 兽类衣原体,二、致病性与免疫性,致病物质与机制：脂多糖（LPS）阻止吞噬体与溶酶体结合 表位变异而逃避抗体的中和 热休克蛋白 沙眼瘢痕的形成 免疫病理损伤（型超敏反应）,外膜蛋白,免疫性：细胞免疫为主 不强且短暂 易持续感染，反复感染 迟发型超敏反应,沙眼生物变种 14个血清型 1.沙眼(A、B、Ba、C血清型)2.包涵体结膜炎、新生儿眼

17、炎(B、Ba、D-K血清型)3.非淋菌性泌尿生殖道感染、婴幼儿肺炎(D-K血清型)性病淋巴肉芽肿生物变种 4个血清型 性病淋巴肉芽肿(L1、L2、L2a、L3血清型)肺炎嗜衣原体肺炎、咽炎、支气管炎、飞沫、冠心病、心肌炎、Alzheimer disease（TWAR血清型）鹦鹉热衣原体 鹦鹉热（鸟疫）、婴儿肺炎，早产、流产（3个血清型）,主要致病性衣原体,沙 眼,1.世界上致盲的主要病因,2.传播途径：眼眼 或 眼手眼,眼结膜上皮细胞易感，其胞质内形成包涵体,3.症状：早期，流泪，结膜充血及滤泡增生，伴脓性分泌物,晚期，结膜瘢痕，眼睑内翻，倒睫，角膜血管翳，失明,沙眼衣原体,新发现：沙眼衣原体

18、G型与宫颈鳞癌的发生密切相关,沙眼角膜血管翳,包涵体结膜炎,新生儿包涵体结膜炎：产道感染 性接触手眼成人滤泡性结膜炎 污染的游泳池水眼,滤泡性结膜炎：症状似沙眼，但无沙眼的后期症状,沙眼衣原体,泌尿生殖道感染,非淋菌性尿道炎,男性：并发附睾炎、前列腺炎等,女性：并发宫颈炎.卵巢炎.盆腔炎等,沙眼衣原体,STD,多与淋球菌混合感染,性病淋巴肉芽肿,人是唯一宿主,性传播疾病,侵犯淋巴组织,男性：腹股沟淋巴结炎和慢性肉芽肿,女性：会阴肛门直肠狭窄和梗阻,沙眼衣原体,腹股沟淋巴结炎,沙眼生物型D-K血清型均可引起婴幼儿肺炎,沙眼衣原体,人是唯一宿主,飞沫或呼吸道分泌物传播,是呼吸道疾病重要的病原体，肺

19、炎、支气管炎等,表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等,新发现：肺炎嗜支原体与冠状动脉粥样硬化的形成有关,TWAR株,肺炎嗜衣原体,细胞培养：金标准（Gloden standard)McCoy细胞、Hele-229细胞 鸡胚卵黄囊接种 微量免疫荧光试验：检测TWAR感染敏感方法 IgM1:16；IgG1:512；急性感染 双份血清抗体滴度增高4倍以上,ELISAPCR、DNAProbe,微生物学检查与防治,Giemsa染色,Lugal碘液染色,特异性荧光抗体血清检测衣原体原体,注意个人卫生（流水洗脸、防治性病等）红霉素、喹诺酮类药物治疗疫苗（尚无）,防治原则,第20章立克次体（Rickettsia）,

20、节肢动物为传播媒介，严格活细胞内寄生的原核细胞型微生物，可引起斑疹伤寒、恙虫病、斑点热等,Howard Taylor Ricketts发现,立克次体,立克次体的共同特点：,活细胞内寄生的原核细胞型微生物 有细胞壁(脂质）、细胞膜和微荚膜，DNA和RNA，酶系统不完善大小介于细菌和病毒之间有细胞壁，但多形态，二分裂法繁殖对抗生素敏感人畜共患病原体，引起自然疫源性疾病以节肢动物为传播媒介或储存宿主,生物学性状,形态染色：球杆状或多形性，Giemsa染色 呈紫色或兰色,培养特性：活细胞内寄生（鸡胚接种、细胞培养、动物接种）,活细胞内排列方式：立克次体在细胞内常呈致密团 块排列，不同种立克次体在细胞内

21、 分布的位置不同（鉴别）,普氏立克次体,恙虫热立克次体（Giema染色）,抗原：群特异性抗原脂多糖 种特异性抗原外膜蛋白,外斐反应(Weil-Felix reaction)是一种非特异凝集反应，立克次体抗原与某些普通变形杆菌的菌体抗原具有共同的耐热多糖类属抗原，用普通变形杆菌株OX19、OX2、OXk抗原代替立克次体抗原，测定体内相应抗体含量的方法。抗体效价1:160或双份血清效价有4倍升高者有辅助诊断立克次体病的价值。*假阳性反应:变形杆菌所致的尿道感染钩体感染、严重肝病等,立克次体,变形杆菌,抗体,抗体,交叉反应,外裴氏反应示意图,加热56 30min灭活 对常用消毒剂如石炭酸、酒精、来苏

22、敏感 对氯霉素、四环素等敏感 耐低温、抗干燥 磺胺药刺激生长！,抵抗力,致病性与免疫性,传播媒介：吸血节肢动物，如虱、蚤、蜱、螨等。致病物质：内毒素（发热、微循环障碍、DIC、休克）磷脂酶A（溶解宿主细胞膜或吞噬体膜，有利于立克次体穿入宿主细胞并在其中生长繁殖）微荚膜（粘附、抗吞噬）,致病机制 节肢动物的叮咬、或其粪便污染伤口 局部淋巴组织或小血管内皮细胞 生长繁殖 初次立克次体血症 小血管内皮细胞中大量增殖 第二次菌血症，释放内毒素、磷脂酶A 相应临床症状丘疹，水泡，溃疡和焦痂，致热、微循环障碍、中毒性休克等基本病理改变损伤血管内皮细胞，引起血管增生性、血栓性或坏死性血管炎,主要立克次体病及

23、流行病学特点,病名 病原体 媒介贮存宿主 传播方式流行性斑疹伤寒 普氏立克次体 人虱、人 虱粪擦入皮肤伤口地方性斑疹伤寒 斑疹伤寒 鼠蚤、鼠类 虱粪擦入皮肤伤口 立克次体恙虫病 恙虫病立克次体 恙螨、鼠类 恙螨幼虫叮咬落矶山斑点热 立氏立克次体 蜱、野生啮齿类 蜱叮咬,传播方式：人虱普氏立克次体 人 人 人虱,流行性斑疹伤寒（高热、头痛、皮疹）,主要致病性立克次体,传播方式：鼠 鼠蚤 鼠虱 鼠蚤 人 鼠莫氏立克次体,地方性斑疹伤寒（鼠型斑疹伤寒）（临床症状轻，少累及神经及心脏系统）,传播方式：可经卵传代 卵 成虫 稚虫 鼠等 幼虫 幼虫（第二代）人等 稚虫 成虫 卵,恙虫病（局部有黑色焦痂、余

24、同斑疹伤寒）,免疫性：以细胞免疫为主，体液免疫为辅。多数可获得持久的免疫。,微生物学诊断,病原体的分离培养与鉴定,血清学试验（外斐反应、ELISA）,立克次体易引起实验室感染，注意无菌操作！,防治原则,预防:1、控制和消灭中间宿主灭虱、灭蚤、灭螨、灭蜱、灭鼠2、改善环境，注意个人卫生3、特异性预防斑疹伤寒鼠肺灭活疫苗治疗：选用敏感的抗生素如氯霉素 四环素、多西环素,磺胺类药物禁用！,教学要求,掌握梅毒螺旋体的致病性及临床分期的特点梅毒的主要诊断方法熟悉“四体”的主要生物学特点及所致疾病“四体”的主要诊断方法及防治要点了解“四体”的分类,思考题,KEY WORDS,Spirochete 螺旋体T

25、reponema pallidum 梅毒螺旋体 Leptospira 钩端螺旋体Mycoplasma 支原体Chlamydia 衣原体Rickettsia 立克次体 Weil-Felix reaction 外斐反应,作业：在下面及每章节后的思考题中，任选8个题目，12月30日前，由班长或学习委员统一收齐，交1号楼-333。,导致创伤感染与皮肤感染的病原,感染特点导致脑膜炎或神经系统损伤的病原，致病物质，诊断要点导致食物中毒或胃肠炎的病原及该类疾病临床微生物学检验要点呼吸系统感染的病原，诊断及防治原则性传播疾病的病原及诊断方法感染中存在超敏反应或免疫病理损伤的病原，致病性及防治原则可以通过细菌涂片镜检,做出初步诊断的病原及镜检特点医院感染常见的病原及控制,常见的耐药性强的细菌.细菌耐药性产生的原因及如何防控超”级细菌”.控制细菌耐药性，你应该做些什么？,