体液肿瘤标志物.ppt

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1、第 十 七章 体 液 肿 瘤 标 志 物,教学目标与要求,掌握常用肿瘤标志物的应用和评价。熟悉其含义和分类以及基因类肿瘤标志物的进展与临床应用。,主要内容,（1）概念（定义、分类、临床应用）（2）酶类肿瘤标志物（3）激素类肿瘤标志物（4）胚胎抗原（5）特殊蛋白肿瘤标志物（6）糖蛋白类抗原（7）血中癌基因蛋白（8）其他肿瘤标志物（9）临床应用的几个问题,肿瘤（tumor）又称新生物（neoplasma），是机体在各种致瘤因素的作用下，组织和细胞在基因水平上失去了对其生长的正常调控，导致的异常生长和分化。即指失去了正常生物调控的异常生长、分化的细胞和组织。,第一节 概 述 一、肿瘤发生与分类（一）

2、定义,（二）特 点 和 分 类,特 点：细胞增殖、分化异常出现恶性生长；失去细胞与细胞间及细胞与组织间的正常联系；侵袭周围正常组织并发生转移。根据肿瘤的生物学行为和临床表现可分为：良性肿瘤：局部膨胀性生长，速度比较缓慢；常有较完整的包膜；压迫邻近组织器官，但不侵蚀破坏；不向远处转移，危害性较小。恶性肿瘤：表现为细胞的无休止和无序的分裂，有侵袭性（向周围组织侵润）和转移 性，危害性大。,（三）恶性肿瘤的分类,癌症（Carcinoma）起源于上皮细胞，约占恶性肿瘤的85%；恶性肉瘤（Sarcoma）:起源于组织细胞，如肌肉组织、骨骼及脂肪组织，约占肿瘤的6%左右；淋巴瘤和白血病（Lymphoma

3、and Leukemia）:起源于白细胞的产生组织，如骨髓、淋巴腺等，可发生于各年龄段，约占恶性肿瘤的5%左右；其它恶性肿瘤：包括脑瘤及其它罕见的癌症，约占恶性肿瘤的4%。,（四）恶性肿瘤的发生的机制,肿瘤是一种基因疾病，其发生是一个多因素、多阶段、多基因参与的复杂过程。,引起细胞癌变 外因通过内因起作用,癌 变 正常细胞 癌变细胞 细胞生物大分子（DNA、RNA、蛋白质）结构与功能异常 化学致癌剂 环境因素 致癌病毒 放射线,癌基因与抑癌基因其结构或表达异常 细胞增殖生长调节系统：癌基因（正调节）（促进增殖，抑制分化和凋亡）（通过表达产物-生长因子发挥作用）抑癌基因（负调节）（抑制增殖，促进

4、分化、成熟、衰老，最后凋亡）当多个癌基因异常激活时或当抑癌基因缺失、突变或基因产物失活时可引起细胞癌变。,细胞癌变的分子学基础,细胞癌变的免疫监视学说,1、机体免疫活化性细胞（T细胞、NK细胞、K细胞和巨噬细胞等）有识别肿瘤细胞的作用，在早期杀灭异常细胞。当机体免疫功能低下或受抑制时，肿瘤的发生率高。2、肿瘤细胞有逃脱免疫监视的能力，妨碍机体的免疫监视的功能。,二、肿瘤标志物的概念（一）肿瘤标志物定义（Tumor Markers，TM）,TM是指由恶性肿瘤细胞异常产生的或特征性存在于恶性肿瘤细胞的物质，或是宿主对肿瘤反应而产生的物质。当肿瘤发生、发展时，这些物质明显异常，标志肿瘤的存在。,TM

5、或是大分子的蛋白质（包括肽类激素和酶），或是小分子的脂类或氨基酸衍生物。存在于肿瘤细胞和组织中，存在于血液和其它体液。能利用免疫化学和分子生物学等技术进行定性或定量的检测。,（二）理想的肿瘤标志物条件,敏感性高；特异性高；肿瘤标志物的浓度和肿瘤大小相关；肿瘤标志物浓度和肿瘤转移、恶性程度有关，能协助肿瘤分期和预后判断；存在于体液特别血液中易于检测。,（三）肿瘤标志物的研究概况,1846年1928年，本周氏蛋白的发现（第1个发现的肿瘤标志 物，现已被确认为多发性骨髓瘤的标志）。1929年1962年，发现一些激素、酶及同工酶等在恶性肿瘤的应用价值。1930年Zondek发现人绒毛膜促性腺激素（HC

6、G）可辅助诊断 绒毛膜癌等。1932年Cushing等报道了促肾上腺皮质激素（ACTH）对恶性 肿瘤的辅助诊断价值。40年代报道了一些酶在肿瘤病人的血清中增高，成骨肉瘤血清中有碱性磷酸酶的升高。1959年Markert等发现恶性肿瘤患者体液中可出现异常变化的同工酶谱。,1963年1975年，现代肿瘤标志物研究以发现胚胎蛋白为 标志物。1963年Abelev发现甲胎蛋白（AFP）1965年Glod和Freeman发现癌胚抗原（CEA）。,1976年至今，其研究进展及应用主要表现以下三方面：第一，1975年Kohler和Milstein成功地创建了淋巴细胞杂交瘤技术，1979年Koprowski用

7、结肠癌细胞制备单克隆抗体，识别糖类抗原，建立了一系列特异性较强的肿瘤标志和CA系列。第二，发现肿瘤的基因标志，1976年Bishop和Varmug等发现癌基因与肿瘤的发生关系，是使肿瘤标志的研究从分子水平提高到基 因水平。第三，肿瘤标志的检测技术的灵敏度和特异性大为提高。免疫定量技术由半定量或灵敏度较低的过渡到高灵敏度并能准确定量的放射免疫测定或酶联免疫吸附测定单克隆抗体技术的广泛应用。,（四）肿瘤标志物的分类,按肿瘤标志物本身的化学特性可分为以下7类：肿瘤胚胎性抗原标志物；酶类标志物；糖类标志物；激素类标志物；微球蛋白类标志物；基因类标志物；其它类标志物。,三、肿瘤标志物的临床应用范围（一）

8、肿瘤的早期发现,肿瘤是单克隆的产物，由单一肿瘤细胞分化而来。根据肿瘤细胞动力学研究结果，大部分肿瘤细胞倍增时间约40140天，平均60天，转移瘤生长速度较原发瘤快1.52倍。直径1cm的肿瘤，大约含有109个肿瘤细胞，是原始肿瘤细胞倍增30次的结果。一个实体瘤从1个肿瘤细胞到109细胞约需818年。物理仪器的最低检测限是1cm（109个肿瘤细胞）,生物化学标志最低检测限为108细胞。在所有的标志中，能用于普查无症状肿瘤病人的标志只有两个，前列腺特异抗原（PSA）和甲胎蛋白（AFP）。,（二）肿瘤的鉴别诊断与分期,肿瘤标志物常用于鉴别良、恶性肿瘤，此时临床已获得足够证据证明患者可能患某脏器肿瘤，

9、肿瘤标志物往往能提供有用的信息帮助区分良、恶性肿瘤。由于血清标志的升高水平常和肿瘤的大小和恶性程度有关，肿瘤标志物的定量检测可以有助于临床分期，能判断疾病处于稳定期、进展期或恶化期。,（三）肿瘤的预后判断,治疗前肿瘤标志物浓度明显异常，表明肿瘤较大，患病较长可能已有转移，预后较差。一些指标专用于观察预后，如乳腺癌的雌激素受体和孕激素受体，如两者阴性，即使CA153不太高，预后也差，复发机会较高，治疗效果不好。类似的指标还有上皮生长因子受体（EGFR）、癌基因c-erB-2编码蛋白(c-erB-2)异常，这些指标阳性都预示较差的预后。,（四）肿瘤的疗效监测,大部分肿瘤标志物的测值和肿瘤治疗效果相

10、关。标志物下降程度反映了治疗成功程度。下降至正常或治疗前水平的95认为治疗成功。如手术或放、化疗后肿瘤标志物未能如预期的下降，说明治疗失败。肿瘤标志物下降的速度取决于标志的半寿期，肿瘤标志从高浓度降至正常，大约需要57个半寿期。,（五）肿瘤复发的指标,关于直肠癌和乳腺癌肿瘤标志应用中建议：手术后的病人应每隔23个月测定一次肿瘤标志，连续至少两年。在未再给予治疗时，至少连续二次（两个时间间期）肿瘤标志物呈直线上升，可认为肿瘤复发。正在治疗的病人，肿瘤标志物的升高，意味疾病恶化。恶化定义为肿瘤标志物测定值增加25，为了可靠，24周应再复查一次。,一些肿瘤标志物及其主要应用范围,第三节 肿瘤标志物生

11、物化学特性及临床应用,一、肿瘤胚胎性抗原标志物,肿瘤胚胎性抗原：指癌瘤细胞重新表达某些在胚胎细胞才有的而在成人后逐渐下降、消失的蛋白质成分。最常见的是：AFP CEA,（一）甲胎蛋白（-fetoportein，AFP）生物化学特性,AFP是胎儿血中的主要蛋白质成分，主要由胚胎期 的肝细胞和卵黄囊产生。妊娠6周开始合成；1214周合成达高峰（血清浓度为13g/L）；出生后下降，出生时的脐带血含量约10100mg/L，一年后约为 5.8g/L。MW：70KD，由590氨基酸组成，含糖量为4%，,临床应用,1.AFP与肝癌 诊断原发性肝癌；是目前公认早期诊断的主要标志物；（以血清含量400g/L作为

12、诊断阈值）肝癌普查（但需注意AFP阴性不能排除HCC）。AFP超过500gL，谷丙转氨酶（SGPT）基本正常，意味着存在肝癌。判断分化程度；用于病情监测、预后判断；AFP含量与肿瘤 的 大小呈正相关动态观察AFP含量和ALT酶活性的变化鉴别诊断良性肝脏疾病。2.AFP与生殖细胞瘤 AFP与HCG同时检测有利于生殖 细胞瘤的分型和分期。,（二）癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）生物化学特性,1、于结肠癌的提取物中发现，也出现在胚 胎细胞上，故称癌胚抗原。2、CEA是一种结构复杂的可溶性酸性糖蛋白，含糖量约为45%55%；和免疫球蛋白lgG的重链结构极相似。分子量

13、150300kD，由64l个氨基酸组成。3.CEA属细胞表面糖蛋白家族，胎儿在妊娠两个月后由消化道分泌CEA，出生后消失。正常组织分泌CEA的有：支气管，唾液腺，小肠，胆管，胰管，尿道，前列腺。成人CEA主要是由结肠粘膜细胞分泌到粪便中，少量重吸收入血。4.参考值上限：健康人CEA3g/L,吸烟者5g/L。,临床应用,CEA是一种低器官特异性肿瘤标志物。不适合作某种恶性肿瘤的诊断和筛查，但对预后判断、疗效观察及辅助诊断是一个有效的监测指标，也是发现复发的理想指标。1、用于辅助诊断：当CEA比正常持续升高510倍，强烈提示恶性肿瘤特别是肠癌的存在。肿瘤名称 阳性率 结肠癌 70%90%（70%）

14、胰腺癌（中晚期）88%91%，（55%）肺癌 76%，（45%）乳腺癌 70%（40%）2、检测胃液中的CEA对胃癌（50%）有一定的诊断意义。,3.在直肠癌，CEA浓度和Duke分期有关，28%的 A期和45的B期CEA都异常。4.高水平的CEA80g/L，肿瘤已有转移的标志，CEA是一种细胞粘附分子，极易浸润和转移。在早期和局部的乳腺癌，CEA常在正常参考值范围，一旦CEA升高，往往意味有转移。5.CEA是一个有效的治疗监视指标，是发现复发的理想指标.肿瘤治疗有效，CEA即行下降。如CEA水平又升高往往意味肿瘤的复发。6.注意排除非癌性CEA升高。良性疾病如吸烟者、酒精性肝硬化、肺气肿、结

15、肠息肉、非特异性结肠炎、胰腺炎、良性乳腺疾病等也可引起CEA的上升.,二、酶 类 肿 瘤 标 志 物酶类标志物特点,酶类存在广泛，肿瘤的发生、发展涉及全身多种酶类；许多脏器在其损伤、炎症和功能改变时都能引起酶的异常酶类标志物特异性不高；主要用于肿瘤治疗和预后监测。正常时，组织中酶的浓度是血清中的许多倍，酶类标志物的敏感性较高，但其低特异性限制了酶类标志物的应用；同功酶分析的应用提高了酶标志物的敏感性和脏器特异性；,（一）前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）生物化学特性,1、PAS是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白。由238个氨基酸组成，分子量28.

16、4kD。2、具有酶活性，与精液液化有关。,临床应用,PSA是前列腺癌的特异性标志物前列腺癌的筛查和早期诊断；一般以4.0g/L作为参考值的上限，t-PSA 4 g/L判断为阳性病情、疗效监测和预后判断 PSA和前列腺癌的恶性程度及转移有关。监测前列腺癌的复发临床发现前列腺手术后，即使没有症状，PSA0.5gL,其复发比例远高于PSA0.5gL者。,（二）神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)生物化学特性,又称磷酸烯醇转化酶。是糖酵解中的关键酶，催化2-磷酸甘油酸裂解生成水及烯醇式磷酸丙酮酸。有5种形式，即、。二聚体是该酶的活性形式。亚基主要存在于肝、肾等

17、组织；亚基主要存在于骨骼肌和心肌组织中；亚基组成的同工酶和存在于神 经元和神经内分泌组织中，故称为NSE。,临床应用,放免和酶免都可以用来测定NSE，血清NSE正常参考值上限为12.5mg/L。NSE是小细胞肺癌和神经母细胞瘤的标志物。NSE对小细胞肺癌敏感度为80%，特异性为80%90%，NSE对儿童型的神经母细胞瘤阳性率为90%。应用于疗效观察、预报复发及预后判断 NSE和病情的发展相关，其值越高，疾病恶性程度越高。患者血清NSE初始化水平低于100mg/L者预后良好，存活率高。NSE水平升高还可见于某些神经内分泌肿瘤如嗜铬细胞瘤、黑色素瘤、胰岛细胞瘤，甲状腺髓样瘤等,AFU存在于多种细胞

18、的溶酶体及体液中，为一种酸性糖蛋白，是水解糖蛋白或糖脂中-L岩藻糖苷键的酶，参与糖脂、糖蛋白、糖的代谢,临床意义,1、主要用于遗传性AFU缺乏引起的岩藻糖贮积病的诊断2、作为原发性肝癌又一敏感、特异的新标 志物。,生化特性,（三）-L岩藻糖苷酶（AFU）,（四）碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase,ALP）,生物化学特性：在碱性条件下，水解各种磷酸酯键释放出无机磷，在磷酸基的转移中起重要作用。ALP来自肝脏、胎盘和骨组织。临床意义：ALP升高最常见于原发性和继发性肝癌。ALP特别肝型同工酶判断肝癌转移好于其他生物化学指标；怀孕的妇女血清胎盘型ALP(PALP)升高。PALP在正

19、常人几乎为0，其升高见于各种癌症，如卵巢癌、胃肠道癌、精原细胞癌和霍奇金氏病；ALP骨同功酶(BALP)是判断癌症骨转移的很好标志。动态观察ALP及其同功酶的变化可以有助于判断预后。,定义：是当正常细胞转化为恶性细胞时，细胞表 面糖蛋白发生变异而形成的一种与正常细胞不同的特殊抗原物质，或是由肿瘤细胞分泌的含糖的复合物。,命名：CA后面的数字代表的是制造该抗原的肿瘤细胞株的编号,分类：CA125、CA15-3、是哺乳动上皮细胞分泌的大分子量粘蛋白，其中CA15-3，是乳癌的肿瘤标志物；CA19-9、CA50、CA72-2、CA242是唾液酸岩藻糖的衍生物，常是消化道肿瘤的标志物。,三、糖类抗原（

20、Carbohydrate antigen，CA）,生化特性,CA125是一种分子量200KD的高分子糖蛋白。主要存在于上皮性卵巢癌组织和病人的血清中，健康人群血清中CA125的含量很低，其上限为35KU/L。,（一）卵巢、乳腺肿瘤标志物 1、CA125,临床意义,鉴定良性和恶性骨盆肿块较好的标志物，敏感度78、特异性95、阳性预测价值82%、阴性预测价值91%。某些良性疾病如子宫内膜异位症，盆腔炎、卵巢囊肿等疾病也有不同程度升高，但阳性率较低，其他恶性肿瘤及其他妇科肿瘤CA125也可升高，胰腺癌、肺癌、乳腺癌、直肠癌及子宫内膜癌等。,主要作为卵巢癌肿瘤标志早期诊断、监查已诊断病人、评价疗效果及

21、预报肿瘤复发。,CA153是1984年发现，分子量300500kD。血清CAl53参考值上限为25kUL。CA153是一种在乳腺癌细胞表面含量较高的细胞表面糖蛋白，是监测乳腺癌的重要抗原。对乳腺癌具有较高特异性，但灵敏度较差，不适用于早期诊断和肿瘤筛查，主要用于治疗评价、预后判断和转移、复发监测。被认为是诊断转移性乳腺癌的首选指标。当CAl5-3比原来水平升高25预示病情进展或恶化。无变化意味病情稳定。其他多种腺癌也有CA15-3升高，包括有胰腺癌、肺腺癌、卵巢癌、直肠癌、肝癌等。,2、CA15-3,CA19-9是一种大分子量(2001000kD)的低聚糖类粘蛋白抗原。CA19-9分布于正常胎

22、儿的胰腺、胆囊、肝、肠等组织中及正常人胰、胆管上皮处，在血清中以唾液粘蛋白的形式存在。用人结肠癌细胞株SW-1116制备的单克隆抗体116-NS-19-9识别糖类抗原。,参考值上限为37kU/L，99正常人37kU/L。CAl9-9脏器特异性不强，是一种与胰腺癌、胆囊胆管癌、结肠癌、胃癌相关的肿瘤标志物，又称为胃肠癌相关抗原。消化系癌肿患者血清CA19-9明显增高。,（二）消化道肿瘤标志物1、CA19-9,CA50是一种与CA19-9密切相关，以唾液酸脂和唾液酸糖蛋白为主要成分的糖类抗原。遍布于结肠、胃肠道、肺、胰腺、肝脏、胆囊、脑膜等恶性肿瘤组织中；细胞正常代谢过程中不分泌CA50成分。可用

23、结肠、直肠癌COCO205细胞制成的单克隆抗体CA50来进行检测，不同的方法测得血清CA50的正常参值不同（14 kU/L20kU/L）。临床应用 与CA19-9有良好的相关性，诊断胰腺癌、胆管癌。肝癌、胃癌、结直肠癌、肺癌、卵巢癌等亦有较高的价值。CA50和其它肿瘤标志物如CA19-9、CA242、CEA、AFP等联合测定，可有效提高恶性肿瘤检测的特异性和敏感性。,2、CA50,常用糖类抗原标志物一览表,原位激素（eutopicd hormone）：具有分泌激素功能的细胞癌变导致其所分泌的激素量发生异常。这些异常的原位激素具有高度的腺体特异性，有助于该内分泌腺或内分泌细胞肿瘤的诊断。异位激素

24、（ectopic hormone）：是指在正常情况下，不产生激素的细胞癌变后所生成的激素。这些激素几乎都是肽类激素，具有与原位激素相同或相似的结构，和天然激素有相同的免疫原性，可用天然激素的抗体检测出来。,四、激素肿瘤标志物激素类肿瘤标志物分类,1、大部分肿瘤和激素关系并不固定，许多产生异位激素的恶性肿瘤能分泌一种或多种激素或类激素，或者几种肿瘤可分泌同一种异位激素。2、恶性肿瘤异位激素分泌量少且不恒定的，激素类标志很少用于恶性肿瘤的诊断。3、最易产生异位激素的肿瘤是肺癌，特别是小细胞癌，最常见的异位激素是ACTH及其衍生物。,异位激素作为肿瘤标志物特点,生化特性,HCG是由胎盘滋养层细胞所分

25、泌的糖蛋白激素，由a和两个亚基组成，每个亚基上有两条N-糖链。a亚基的生物特性与促黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）、促甲状腺激素（TSH）的a亚基氨基酸排列顺序基本相同，亚基决定了各类激素的免疫学性质和激素的特异性，现行的许多测定HCG的分析方法都是专为检验HCG分子的链而设计。,（一）人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotrophin,HCG）,临床意义,1、用于早孕诊断及用于了解胚胎生长情况及随访观察。2、是睾丸肿瘤和胎盘肿瘤最基本的标志物。良性葡萄胎、恶性葡萄胎、绒癌患者血清HCG有不同程度增高。腺癌、前列腺癌、肺非小细胞癌、肝癌、白血病及淋巴瘤等其他

26、肿瘤患者HCG也可见升高。,（二）降钙素(Calcitonin,CT),生物化学特性：降钙素是由甲状腺C型细胞分泌的一种由32个氨基酸组成单链多肽激素，分于量约为3.5kD，半寿期412min。它在血清钙升高时分泌，抑制钙自骨中释放，增加尿磷，降低血钙和血磷。正常参考值上限为100ng/L。临床意义：CT常用于筛查甲状髓样瘤病人的无症状家族成员。用于监测甲状髓样瘤的治疗。肺癌病人也常见CT升高，乳腺癌、消化道癌症病人偶见CT升高。,激素与肿瘤关系一览表,结构：核心（结晶状的氢氧化高铁）外壳（去铁蛋白，呈球状，由24亚基组成）作用：贮铁和供铁，,五、特殊蛋白类肿瘤标志物（一）铁蛋白（Ferrit

27、in，Ft）,1、衡量有无严重铁代谢失调和体内铁贮存水平，正常人铁蛋白300g/L为增多指标，SF是诊断体内缺铁最敏感、最特异的指标，也是铁负荷过多性疾病的诊断和鉴别诊断2、是一种新的肿瘤标志物 急性白血病患者SF显著升高，其它的恶性肿瘤的患者如霍奇金病、肝癌、胰腺癌、乳腺癌肺癌、卵巢癌等SF含量升高，升高的程度与肿瘤的活动及临床床分期有关。,应用：,2-M是一种分子量为11.8KD的单链多肽，为HLA轻链部分.存在于除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞以外的几乎所有有核细胞表面，特别是淋巴细胞表面尤其丰富。血清2-M 2.5mg/L，尿平均值为98g/L，上限为320g/L。应用：1、评估肾功能 2

28、、监测肿瘤病情变化 淋巴细胞增生性肿瘤如多发性骨髓瘤、慢性淋巴性白血病等病人血清中2-M浓度可明显增高，在确诊的肝癌病人血清2-M与AFP有良好的相关性。,（二）2微球蛋白（2-microglobulin,2-M）,在成年期关闭的基因（原癌基因，proto-oncogene）由于种种原因发生了突变，变成了有活性的癌基因（oncogene），在一些癌基因（至少3种4种）共同作用下，正常细胞转化为恶性细胞，异常生长、分化，导致了肿瘤的发生。癌基因的激活实质：结构异常；表达异常,抑癌基因的失活：一是抑癌基因的缺失或突变 二是抑癌基因产物失活。,六、肿瘤基因标志,癌基因的激活,常见癌基因类肿瘤标志物,

29、常见抑癌基因类肿瘤标志物,1、定量病理学：原位图像分析（确定细胞中总DNA含量）细胞测量学方法（用于研究小肿瘤）2、免疫组织化学法（利用单克隆抗体检测其相关的蛋白质以检测癌基因和抑癌基因的产物）3、分子生物学方法：聚合酶链反应（PCR）技术：PCR-ASO法；PCR-SSCP；PCR-RFLP；直接测序法。,肿瘤基因标志检测方法,（一）癌基因肿瘤标志物,1.ras基因家族 2、myc基因家族成员,（二）抑癌基因,1RB基因 2、P53基因,肿瘤基因标志分类,（一）ras基因蛋白,ras族基因编码酪氨酸激酶，位于人类1号染色体短臂。它的表达产物为188个氨基酸，分子量21kD组成的p21蛋白。它

30、由K-ras、H-ras和N-ras组成，在DNA水平上三者高度同源，均有4个外显子，相互间同源性达85。当ras基因的第12位、第13位、第61位碱基发生点突变，编码产物发生变化这是癌症形成的关键一步，又称启动基因。临床上ras基因突变多见于神经母细胞瘤、膀胱癌、急性白血病、消化道、乳腺癌，在上述疾病时ras基因突变后的表达产物-p21蛋白增加并且和肿瘤的浸润度、转移相关。,ras基因家族与肿瘤的关系,（二）myc基因蛋白,myc基因是从白血病病毒中发现的，它和转录的调节有关，myc家族也有4个：c-mycN-myc，L-myc，R-myc。c-myc由三个外显子组成，其表达蛋白是64kD的

31、磷酸蛋白p42。myc基因和DNA合成、细胞信号转录、细胞分化相关，尤其在G1和S期myc表达最强。myc基因蛋白标志主要用在判断肿瘤和复发和转移上。,myc基因家族成员与肿瘤的关系,基因产物为P105蛋白，P105磷酸化修饰对细胞的生长、分化起重要的调节作用，非磷酸化的P105能促进细胞分化，抑制细胞增殖。RB基因失活见于成视肉膜细胞瘤、骨肉瘤、小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌等许多肿瘤,（三）RB基因（retinoblatoma，RB）,基因产物：53KD蛋白，是由393个氨基酸组成的含磷蛋白 功能：野生型的P53蛋白维持细胞正常生长；时刻监控基因的完整性“基因卫士”抑制恶性增殖 野生型的p53

32、基因突变使这一控制作用消失，诱发肿瘤。检测：应用多种P53的单克隆/多克隆抗体来检测野生型/突变型P53蛋白，一般测得的只是突变型P53蛋白。,（四）P53基因,P53基因与肿瘤的关系,第四节 肿瘤标志物 实验室诊断评价的几个问题,一、肿瘤标志物临床判断值确定（一）常见的评估肿瘤标志物的指标（二）ROC工作曲线确定肿瘤标志物判断值二、常用肿瘤标志物的联合应用,一、肿瘤标志物临床判断值确定（一）常见的评估肿瘤标志物的指标,真阳性检测结果阳性的肿瘤病人数，真阴性检测结果阴性的非肿瘤病人数，假阳性检测结果阳性的非肿瘤病人数，假阴性检测结果阴性的肿瘤病人数。,乳癌时CA15-3的ROC曲线,常用肿瘤标志物联合应用,临床实践表明，肿瘤标志物联合应用可以提高检测的敏感性。基本原则是选用不同性质、互补的、相对敏感的34个标志组成标志群。,思考题,1肿瘤标志物定义，理想的肿瘤标志物条件。2.肿瘤标志物的分哪几类？3简述肿瘤标志物的临床应用范围。4肿瘤标志物临床应用时应考虑那些问题？,