【SN商检标准】snt 2226 进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的检测方法 液相色谱质谱 质谱法.doc
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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖 犜 进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的检测方法 液相色谱 质谱 质谱法犻犿犪狀犾犻犪狉狅狅狀犻狉狋狅犳犲狉狀犿犪狅犻狋犇狅犲狉狌犵狀犻狉狅犳犻犿狆狋狉狅犪狀犱狓犲狆狊犳犲犱狌犳犻狅狌狀犲狀狋犻狊犲狅犱狅狉犳狆狋狉狅 犔犆犕犛 犕犛犺狅犱犿狋犲 发布 实施中华人民共和国发 布国家质量监督检验检疫总局犛犖 犜 前 言本标准的附录 和附录 均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、中华人民共和国重庆出入境检验检疫 局 、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准主要起草人:刘永、杨长
2、志、王国民、康庆贺、林维宣、李贤良、吴岩、程阳、王冰、郭伟。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的检测方法 液相色谱 质谱 质谱法 范围本标准规定了进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的液相色谱 质谱 质谱检测方法。本标准适用于进出口鸡肉、鸡肝脏、鸡肾脏和猪肉中乌洛托品残留量的检测和确证。 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。 凡是注明日期的引用文件,其随后所 有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方面研究使用这些文件的最新版本。 凡是不注明日期的引用文件,其最新版本适用于本标
3、准。 分析实验室用水规格和实验方法( ,:,) 方法提要用乙腈提取试样中的乌洛托品残留,正己烷除去脂溶性杂质,阳离子交换固相萃取柱净化,洗脱液 浓缩后残渣用碱性乙腈定溶,液相色谱 质谱 质谱仪测定,外标法定量。 试剂和材料所有试剂除特殊注明外,所用试剂均为分析纯,水为 规定的一级水。 乙腈:色谱纯。 正己烷:色谱纯。 甲醇:色谱纯。 乙酸()。 氨水()。 盐酸()。 乙酸铵。 乙酸溶液:量取乙酸(), 用水稀释至 。 盐酸溶液:量取盐酸(), 用水稀释至 。 乙 酸 铵 缓 冲 液 ( ): 准 确 称 取 乙 酸 铵 溶 于 水 中,用 乙 酸 溶 液()调 值至 。 氨水 甲醇(,体积比
4、)溶液:量取 氨水(), 用甲醇稀释至 。 乙酸 乙腈(,体积比)溶液:量取 乙酸溶液(), 用乙腈稀释至 。 乙腈饱和的正己烷溶液: 乙腈中加入 正己烷,充分振荡后,静置分层,取上层正己烷层备用。 无水硫酸钠:经 灼烧 ,冷却后在干燥器中储存备用。 乌洛托品标准物质(,分子式: ): 纯度大于。 标准储备溶液:准确称取按其纯度折算为质量的乌洛托品标准品 ,用乙腈溶解并定容至 ,浓度相当于 。 储备液在 冰箱避光保存,可使用 个月。 标准中间溶液:准确量取标准 储 备 溶 液(),用 乙 酸 乙 腈 溶 液()溶 解 并 定 容 至犛犖 犜 ,浓度相当于 ,在 冰箱避光保存,使用前配制。 标准
5、工作溶液:根据需要用适当浓度的标准工作溶液溶解空白样品浓缩残渣,配制成适当浓度的标准工作溶液,使用前配制。 固相萃取柱(): , ,或相当者。 固相萃取柱使用前分别用 甲醇、 水 、 乙酸铵溶液预处理,并保持柱体湿润。 微孔滤膜: 仪器和设备 ,有机相。 高效液相色谱 质谱 质谱仪:配电喷雾离子源()或相当者。 分析天平:感量为 , 。 固相萃取装置。 计 :测量精度。 旋转蒸发器。 氮吹仪。 旋涡混匀器。 组织捣碎机。 均质器( )。 离心机( )。 玻璃离心管。 试样的制备与保存取样品中有代表性的约 ,用组织捣碎机捣碎,混匀,均分成两份作为试样,分别装入洁净容器,密封并做好标识,于 冰箱内
6、保存。在抽样和制样操作过程中,应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 测定步骤 提取准确称取 试样(精确到 )于 离心管中,加入 无水硫酸钠、 乙腈,用均质器以 均质,以 离心,上清液转移至 具塞离心管中,样品再用 乙腈重复上述提取、离心操作,合并两次提取的上清液,加入经乙腈饱和的正己烷溶液() ,用漩涡振荡器混匀移至浓缩瓶,浓缩近干后待净化。 净化后 ,以 离心 ,弃去上清液,乙腈相过无水硫酸钠,转用 乙酸铵缓冲液()溶解浓缩瓶中残渣,以 的速度过固相萃取柱(), 再用 乙酸铵溶液分两次洗涤浓缩瓶,过固相萃取柱,用 水 、甲醇依次淋洗固相萃取柱,弃去流出液,在 以下减压抽使柱体干涸;用氨
7、水 甲醇溶液()洗脱,洗脱液在 下用氮吹仪浓缩至近干,用 乙酸 乙腈溶液( 测定)溶解残渣,经 滤膜过滤,供液相色谱 质谱 质谱测定。 液相色谱条件 ) 色谱柱: ? (内径) ,粒径 ) 流动相:乙酸 乙腈(,体积比); ,或相当者; ) 流速: 或根据仪器条件优化;犛犖 犜 ) 柱温: ; ) 进样量: 。 质谱条件 ) 离子源:电喷雾离子源; ) 扫描方式:正离子; ) 检测方式:多反应监测(); ) 其他质谱 质谱参考条件参见附录 中表。 定量测定根据样液中乌洛托品残留量浓度大小,选定峰高相近的标准工作溶液,标准工作溶液和样液中乌洛托品残留的响应值均应在仪器的检测线性范围内。 对标准工
8、作溶液和样液等体积参差进样测定,在上述色谱条件下,乌洛托品的参考保留时间约为,标准溶液的多反应监测色谱图参见附录 中图 。 定性测定在相同的实验条件下,样品与标准工作液中待测物质的质量色谱峰相对保留时间在以内,并 且在扣除背景后的样品质量色谱图中,所选择的离子对均出现,同时与标准品的相对丰度允许偏差不超过表 规定的范围,则可判断样品中存在对应的被测物。表 使用定性液相色谱 质谱 质谱时相对离子丰度最大容许误差相对离子丰度 最大允许偏差 空白试验除不加试样外,均按上述操作步骤进行。 结果计算和表述用数据处理软件中的外标法,或绘制标准曲线,按照式( )计算样品中乌洛托品残留量。式中:犡 犮 犞 犿
9、 ( )犡 试样中待测组分含量,单位为微克每千克( );犮 由标准曲线而得的样液中待测组分的浓度,单位为纳克每毫升( );犞 样液最终定容体积,单位为毫升( );犿 最终样液所代表的试样质量,单位为克( )。 测定低限、回收率 测定低限本方法乌洛托品测定低限为 。 回收率回收率试验数据见表 。表 乌洛托品添加回收率(狀 )食品名称添加浓度( )平均测定值( )回收率 相对标准偏差 鸡肉 犛犖 犜 表 (续 )食品名称添加浓度( )平均测定值( )回收率 相对标准偏差 鸡肝 鸡肾 猪肉 犛犖 犜 附 录 犃(资料性附录)串联质谱条件 )串联质谱条件: ) 电离方式: ; ) 毛细管电压:; )
10、源温度: ; ) 去溶剂温度: ; ) 锥孔气流: ; ) 去溶剂气流: ; ) 碰撞气:氩气,碰撞气压 ; ) 监测模式:多反应监测条件见表。表 犃 多反应监测条件化合物母离子子离子驻留时间锥孔电压 碰撞能量乌洛托品 离子用于定量。 ) 非商业性声明:附录表 所列参数是在质谱仪上完成的,此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考,并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。犛犖 犜 附 录 犅(资料性附录)标准样品色谱图 ) ) )图 犅 乌洛托品高效液相色谱 质谱 质色谱图犛犖 犜 犲犉狉狅狑犱狉狅犃狀犲狓犃犪狀犱犃狀犲狓犅狊犳狅犻犱狉狀犪犺犱犪狋狊狏狉狊狅犲犻犳犻狀犿犻狋犪
11、狀狀犲狓犲狊狊犻犜犱狉犪狀犺犱犪狋狊狑狊犪狅狀犻狋狅犪犮狀犻犪狀犻犱狋犳犪狋犻犲犃犱狋狉犮犆狉犲狆狅狉狆 狅狊犲犱犫狔 犪狀犱狊犻狌狀狉犱犲犺犲狋狉犮犺犪犵 犲犳狅狀犪犻犾犆狅犺狀犪犻犚犖犲狋犪犵狉狅狋犪犾狌狔 犆狅犿狅狀犻狊犿狉狅犻犳犱狉犜犲犺犪狀犱犪狋犱犲狊狋狑狊犪犳犪狉犫犱狔 犻狅狀犎犲犾犼犵狀犪犻犵 狉狋犈狀狔狋狊狀犻犐犈狓狆狅狀犻狋犲狀犱犮犪犲犻狌犪狋犲狀犪狉犅狌狉犙犪狌犳狅犲犺狋犘犲狅狆犲犾 狊犚犲 狆犮犻犾犳狌狅犫狀犪犻犆犺,犆犺狅狀犵狇 狀犻 犵 狉犈狋狀狔狋狀狊犐犻犈狓狆狅狀犻狋犲犮犪狀犱狀犲犻狋犙犪狀狉犅犲犪狌狉犪狌犳狅犺犲狋犘犲狅狆犲犾狊犚犲狆犮犻犳狅犾狌犫狀犪犻犆犺狀,
12、犻犪狅狀犻犔犵 狉犈狋狀狔狋狀狊犻犈犐狓狆狅狀犻狋犲犮犪狀犱狀犲犻狋犙狀犪狉狌犅犲犪狌狉狌犳狅犺犲狋犘犲狅狆犲犾狊犚犲狆犮犻犾犳狅狌犫狀犪犻犆犺犜犺犲狊狀犿狉犻犲狋犪犳犪狉犱犳狅狊犻犺犱狋狉犪狀犱犪狋狊犲狉犪狌犻犔犢狅狀犵 ,犢犪狀犵 犆犺犪狀犵犻, 犠犪狀犵 犌狌狅狀犿犻,犓犪狀犵 狀犵 犺犲,狀犻犔犠狓狌犻犪狀犲犪狀,犻犻犔犾犪狀犵 ,犠狌犢犪狀,犆犺犲狀犵 犢犪狀犵 ,犠犪狀犵 狀犻犅犵 ,犌狌狅 犠犻犲狊犻犜犱狉犪狀犺犱犪狋狊犻犪狆犾犱狉狅狀犪犱狀犪狋犻狊狉狊狅狊犲犳狅狉狋犲狀狔狋狀狊犻犲狓狆狅狀犻狋犲犮犪狀犱狇狀犲犻狋犪狀狉狌犪狆狅狉犿犾狌犵犲犱狋犪狉狅犳犺犲狋狋犻狊犿狉狋犻犲犳犖犲
13、狋狅:狊犻犜犺犈狀犵犺狊狅犻狀犻狊犾狉狏犲狅狀犻狅狉狋,犳犪犿犾犪狊狀犪狉犺犲狋犲狀狊犲犻犆犺犲狋狓狋,犾狊犲犻犾狊狅狔 狉狅犳犵犱犲犮狀犪犻狌犛犖 犜 犻犾犻犿狉狀犪狅狅狀犻狅狉犳狋狅犪狀狉狌犿犻犲狋犇犲狊犳狆犲犳犱狌狀狅狌犻犲狋狀犐狅狊狅狊犱犻犳犲狉犵狀狉犻狅犳犻犿狆狋狉狀犱狅犪犲狓狆狋狉狅 犔犆犕犛 犕犛犺狅犱犿狋犲 犛犮狅狆 犲狊犻犜犱狉犪狀犺犱犪狋狊狊犲狊狆犻犺犲犳狋犻犲犮犿犺狋狅犲犱狊犳狅犪狊犿狆犲犾狆犲狉狆狅狀犻狋犪狉犪狀犱犪狅狀犻狉狋犲狀犪狋犱犿犲犻犫狔犻犾 狇犱犻狌狅狉犮犺犿狅狋犪犵犪狉狊犻犱犜狉犪狀犺犱犪狋狊犻犪狆犲犾犪犮犫狅狋犻犺犾犲狋狅狀犻狉狋犲狀犪狋犱犿犲犪狀犻犱狅狀
14、犻狋犪犮犳犻狅狇犳狅狉犻狋犝狅狉犾狌犪狏犲犻犱狉狀犻狅犳狌狅犱狊犾狀犮犻犵狆犽狉狅,狆狉狋犾狅狌狔 狏狉犲犻犪狀犱狉犻犾犺犲狋,犱狀犲犻犽狔 狆 犺 狔 犿狊犪狊狆狅狉狋犲犮犿狉狋犲狔 犳狅狅狉狋犝狅狉狆狀犲犱犻狌犲狊犻狀狊犲狉犻狊犳狅犳狌狅狋犱狊犳狅犻犿犪狀犾犻犪狉狅犵狀犻 狆狀犲犱犻狌犲犻犲狊狀狉犻犱犲犻犿犪狀犾犪 犖狏狉犲狅犻犲狀狊犮犲狉犿犲犳狋犲犪狉狅犜犾犺犲狀狑犻犾狅犳犵 狏狀狉狅犲犻犿狋犪犱狅犮狌犿狊狋狀犲狀犻犪犮狅狋狀狆狅狀狊犻狊狅犻狉狏犮犺狑犻犺,狅狉狌犺狋犵 犺犲狀犮犲狉犲犳狀犲狊狉犻犺犲狋狓,犻犮狋狅狀狊犲狋狌狋狅狀狊犻狊犳狅狆狅狀狊犻狊狅犻犾狉狊犱狏犳狅狉狅犪狀狀犱犪犻狋
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