乳酸菌的筛选及应用.ppt

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1、乳酸菌的筛选及应用,乳酸菌的分类乳酸菌的筛选乳酸菌的应用,第一部分、乳酸菌的分类,指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌；分为18个属，共有200多种；大部分是人体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群，其广泛存在于人体的肠道中。,一、乳酸菌,二、乳酸菌的分类,运动性：通常不运动，有的能 够运动,具有周生鞭毛。营养类型：化能异氧型需氧情况：微好氧性,1、乳杆菌属（Lactobacillus）形态：细胞呈长或细长杆状、弯曲形短杆状,一 般成链状排列,形态：细胞呈球形或卵圆形，成对或成链排列 运动性：一般不远动 营养类型：化能异养型 需氧情况：兼性厌氧型,2、链球菌属（Strept

2、ococcus）,形态：细胞球形或豆状，成 对或成链排列 运行性：不运动 营养类型：化能异养型 需氧情况：兼性厌氧型,3、明串珠菌属（Leuconostoc）,形态：细胞呈多样形态：Y字形、V字形、弯曲状、勺形，典 形形态为分叉杆菌运行性：不运动营养类型：化能异养型需氧情况：专性厌氧,4、双歧杆菌属（Bifidobacterium）,形态：细胞球形，成对或四联状 排列 运行性：不运动 营养类型：化能异养型 需氧情况：兼性厌氧,5、片球菌属（Pediococcus）,第二部分、乳酸菌的筛选,乳酸菌绝大多数都是厌氧菌或兼性厌氧的化能营养菌。生长繁殖于厌氧或微好氧、矿物质和有机营养物丰富的环境中。具

3、体如下：（1）与动物相关分布：乳汁、消化道、粪便等；（2）与植物相关分布：花蜜、树液、植物残骸、果实损伤部位等；（3）发酵食品：泡菜、酱油、发酵肉制品等；（4）乳酸饮料：酸奶等。,一、乳酸菌的分布,（一）溶钙圈法 利用一些产酸类细菌在含CaCO3的培养基上产生CaCO3溶解圈，从而筛选出这些产酸类细菌，可用于乳酸菌的筛选。其中培养基中加入CaCO3的作用是：鉴别能产生酸的细菌；中和产生的酸，以维持培养基的PH。,二、筛选方法,1、乳酸菌筛选培养基（MRS培养基）配方（1L）:蛋白胨 10.0g，牛肉膏 10.0g，酵母提取物 5.0g，K2HPO4 2.0g，柠檬酸三铵 2.0g，乙酸钠 5.

4、0g，葡萄糖 20.0g，吐温80 1.0mL，MgSO47H2O 0.5g，MnSO44H2O 0.25g,配制：1.调PH至6.26.4；2.称取20g CaCO3加入到100mL蒸馏水中，制成CaCO3乳浊液；3.将MRS培养基和CaCO3乳浊液分开灭菌；4.倒平板前，待培养基融化冷却后，平板上加入一定量的CaCO3乳浊液，晾干了以后再接种。,样品预处理梯度稀释至10-6选择合适的稀释度涂布37培养48h挑选产生溶钙圈的菌落反复在MRS培养基上划线挑起单菌落染色，经镜检确认为纯种挑选革兰氏阳性单菌落试管穿刺4冰箱保存。,2、筛选过程,（二）溴甲酚绿指示剂法,1、培养基：MRS培养基（含溴

5、甲酚绿酒精溶液）2、筛选过程：同上，不同之处是稀释涂布后长出菌落，挑取使溴甲酚绿变色的菌落。,（三）几种乳酸菌筛选举例,样品来源：市售酸奶 培养基：M17改良培养基 培养温度：42 需氧情况：兼性厌氧 筛选方法：常规的稀释涂布 和划线分离,1、嗜热链球菌,2、保加利亚乳杆菌 样品来源：市售酸奶 培养基：牛肉浸膏 1.5，酵母浸膏 0.5，葡萄糖 3.0，柠檬酸三铵 0.2，七水硫酸镁 0.02，琼脂 1.5，pH 5.1。培养温度：42 需氧情况：兼性厌氧 筛选方法：常规的稀释涂布和划线分离法,样品来源：婴儿新鲜粪便 培养基：MRS培养基、NPNL培养基、TYP培养基、PTYG培养基 培养温度

6、：37 需氧情况：严格厌氧 筛选方法：常规的稀释涂布和划线分离法,3、双歧杆菌,第三部分、乳酸菌的应用,一、乳酸菌的生理功能,维持肠道菌群的微生态平衡；增强机体免疫功能；预防和抑制肿瘤发生；提高营养利用率、促进营养吸收；控制内毒素、降低胆固醇；延缓机体衰老。,二、乳酸菌的应用,1、乳酸菌在食品、饮料中的应用（1）酸奶；（2）乳酸饮料；（3）酿造调味品中的应用；（4）功能性食品的开发；（5）防腐、保鲜；（6）肉制品加工；（7）腌渍物等。,2、乳酸菌在医药中的应用（1）乳酸菌素；（2）-氨基丁酸(GABA),3、开发可降解的聚乳酸塑料,（1）聚乳酸（PLA）简介 聚乳酸是以微生物发酵产物乳酸为单体

7、用化学合成方法聚合而成的一种高分子材料，它无毒、无刺激性。聚乳酸制品废弃后在土壤或水中，30天内会在微生物、水、酸和碱的作用下彻底分解成CO2和H2O，不会对环境产生污染，因而是一种完全可生物降解的材料。,目前聚乳酸的生产和制备主要有：,（2）聚乳酸的生产过程,直接聚合法；间接法；聚合法。,（3）聚乳酸的应用,医用领域：如生产一次性输液用具、免拆型手术缝合线、骨科用固定件及手术器件、医用支架、生物导管等；包装材料：目前，各种包装材料是聚乳酸最大、最有潜力的应用市场。适合于加工一次性饭盒以及其他食品、饮料等外包装材料等；纤维：聚乳酸纤维是由聚乳酸经常规纺丝工艺制得的生物合成纤维，可制成复丝、单丝、短纤维、针织物、非织造布等，还可用作建筑材料、农业用材等。,PLA作为一个新型的医用、生物可降解塑料在我国有广阔的市场发展前景。生物降解塑料大多数是天然高分子与常用塑料复合体系，或基于天然高分子(主要是淀粉、纤维素)的改性。PLA合成直链脂肪族聚酯，在医用领域是最重要的可降解高分子材料，已越来越受到重视。PLA树脂替代现有降解材料已成为市场发展的必然趋势，并具有与烯烃类聚合物竞争的能力，“绿色生态塑料”的市场前景将十分看好!,（4）前景,谢谢！,