中药及其制剂分析概论.ppt

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1、第十四章 中药及其制剂分析概论,基本要求概 述中药及其制剂分析中待测成分的提取分离与纯化方法中药及其制剂分析的一般程序练习与思考,返回主目录,基本要求,一、掌握中药及其制剂测定前的提取纯化方法。二、熟悉中药及其制剂分析的一般程序与方法。三、了解中药及其制剂的分类。,返 回,第一节、概 述,一、中药及其制剂定义 1中药：以中医药学理论体系的术语表述其性能、功效和使用规律，并且只有当按中医药学理论指导其临床应用的传统药物，才可称之谓中药。2中药制剂（中成药）：用中药为原料，按中医药学理论谴药、配伍和组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂。,3，中成药(Chinese patent med

2、icine)的定义 中药制剂中的一些药品经过药品监督局审批，在市场上允许出售，可以通过医生诊断给患者使用，也可由患者根据经验与常识直接使用的中药制剂产品。,二、中药及其制剂的质量标准 1现状：中国药典已收载中药品种992种，其中中药材532种，中药制剂460种。中药及其制剂的质量控制主要包括鉴别、检查和含量测定。2进展：如何确定中药制剂质量评价的指标是关键问题。只有在天然药物化学、药理学、药剂学、药物分析以及临床和基础医学等方面进行深入的研究，探明中药制剂的作用机理、主要成分及相互的作用关系后，才能评价其质量的客观指标，制定出比较完善的质量标准。,三、中药制剂分析的特点 1,由于中药制剂的组成

3、十分复杂，因此给分析测试带来一定困难，中药制剂分析的样品一般需要经过提取、纯化等预处理过程，以排除干扰组分的干扰。但过于繁琐预处理不宜作为药品常规检验的方法。中药制剂中有效成分的含量一般较低，因此要求方法有较高的灵敏度。,2，中药制剂的成分和作用复杂，认识其成分与作用之间的关系还需药学、中西基础和临床医学界的共同努力。3，影响中药制剂质量的因素多，如药材产地和采集时间、加工设备和工艺。4，中西医学的理论和对药物的认识不同。因此不能简单套用化学药品制订标准的方法。还需寻找控制其质量的新途径和新方法。,生长环境、采收季节及部位差异,GAP 中药材生产质量管理规范,益母草 水苏碱 营养期含量最高 益

4、母草碱 营养期含量最低,不同部位人参皂苷的含量,重量比(%)总皂苷含量(%),周皮 6.9 2.60,韧皮 46.6 3.04,木质部 46.5 0.31,五倍子 鞣质（70%）槐米 芦丁（20%）长春花 长春新碱（百万分之一）美登木 美登木碱（千万分之一）,各种有效成分在中药中含量相差悬殊,三黄泻心汤干浸膏,有效成分与浓缩干燥方法的关系(%),中国药典（2000年版）一部（二十六种）,丸剂 胶剂 膏药 颗粒剂 滴眼剂散剂 合剂 露剂 糖浆剂 软膏剂片剂 酒剂 茶剂 滴丸剂 注射剂锭剂 酊剂 搽剂 胶囊剂 滴鼻剂栓剂 巴布膏剂 橡胶膏剂 气雾剂喷雾剂 煎膏剂（膏滋）流浸膏剂与浸膏剂,四、中药及

5、其制剂的分类与质量分析要点,四、中药及其制剂的分类与质量分析要点 分类 中药材及其炮制品 液体制剂：合剂与口服液、酒剂和酊剂、注射剂 半固体制剂：煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂 固体制剂：丸剂、散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂,（一）中药材及其炮制品中药制剂的生产原料必须符合药品标准质量控制和分析重要性中药质量标准现代化的关键药物分析学科的重点之一。,用药材提取物制备的液体制剂,合剂、糖浆剂、酒剂、茶剂、酊剂 滴鼻剂、滴眼剂、露剂、搽剂等,（无植物组织与细胞，故无显微鉴别）,（单剂量合剂也可称为“口服液”）,合剂系指药材用水或其他溶剂，采用适宜方法提取，经浓缩制成的内服液体制剂,酒剂,酊剂,药材用蒸馏酒提

6、取制成的澄清液体制剂,药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液体制剂,3，注射剂（同化学药品）装量差异澄明度无菌不溶性微粒pH值,软膏,常用基质 油脂性、水溶性 乳剂型（乳膏剂）,药物、药材细粉、药材提取物与适量基质混合制成的半固体外用制剂,药材提取液的浓缩液,煎膏剂(膏滋)流浸膏剂与浸膏剂（半流体或固体）,（无植物组织与细胞，故无显微鉴别）,药材用水煎煮、去渣浓缩后，加炼蜜或糖制成的半流体制剂,应无焦臭、异味，无糖结晶析出,药材用适宜的溶剂提取，蒸去部分或全部溶剂，调整浓度至规定标准而制成的制剂,1ml流 浸膏 1g 原药材1g 浸膏 2 5g 原药材,生产提取溶剂大多为水或稀醇,检测时

7、一般需经有机提取后分析,（1）有效成分明确且有适当方法，测定 有效成分的含量,（2）有效成分不明或无定量方法的，可 测一定溶剂的浸出物含量,（3）对于流浸膏，有的测总固体量以控 制其质量,药材提取物、药材粉末加赋形剂、制备而成,丸剂、胶剂、颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、锭剂、胶剂、茶剂、栓剂,（有植物组织与细胞，可做显微鉴别）,指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等,大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸 15.0%水蜜丸、浓缩水蜜丸 12.0%水丸、糊丸、浓缩水丸 9.0%,高低,一种或多种药材混合制成的粉末状制剂，分内服和外用

8、散剂,取供试品适量置光滑纸上，平铺约5cm2，将其表面压平，在亮处观察，应呈现均匀的色泽，无花纹、色斑,药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂,粒度,药材提取物加药材细粉或药材细粉与适宜辅料混匀压制而成的园片状或异形片状的制剂，分为浸膏片、半浸膏片和全粉片,硬胶囊剂软胶囊剂肠溶胶囊剂,2质量分析要点注射剂：为了确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固体中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。中药指纹图谱包括色谱指纹图谱（HPLC、GC、TLC等），光谱指纹图谱及脱氧核糖核酸指纹图谱。,返 回

9、,五、中药及其制剂分析中待测成分的 提取分离与纯化方法,（一）提取方法1萃取法 2冷浸法3回流提取法4连续回流提取法5水蒸气蒸馏法6超声提取法7超临界流体萃取法,利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法,正丁醇 用于皂苷类,醋酸乙酯 用于黄酮类,氯仿 用于生物碱类,乙醚、石油醚 用于挥发油,（1）萃取溶剂的选择,（2）水相pH的选择,酸性成分 比其pKa低12个pH单位,碱性成分 比其pKa高12个pH单位,（3）仪器和提取次数,（4）酒剂和酊剂先挥去乙醇,（5）防止和消除乳化,分液漏斗,鉴别1次,含量测定 3 4次,样品置溶剂里

10、，室温下浸泡一段时间的提取方法,亲脂性,亲水性,石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水,样品置有机溶剂中加热回流的提取方法,通过更换溶剂，使提取更完全,样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法,适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定,麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油,6超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法速度快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由于超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失，所以用作含量测定时，应于超声振荡前先称定重量，提取完毕后，放冷至室温，再称重，并补足减失的重量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末的提取时，由于组分是由细胞内逐步扩散

11、出来，速度较慢，加溶剂后宜先放置一段时间，再超声振荡提取。,原理 超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐射，出现“空化”现象（气泡的形成、产生及破裂现象），形成超过1000个大气压的冲击力,7超临界流体萃取法（SFE法）1）超临界流体：是指当压力和温度物质的临界点时，所形成的单一相态。,常用的超临界流体有超临界CO2，它具有较低的临界温度（31）和临界压力（7390kPa），惰性、无毒、纯净、价廉。,2）特点：首先，它具有与液体相似的密度，因而具有与液体相似的较强的溶解能力；其次，溶质在其中扩散系数却与气体相似，因而具有传质快，提取时间短的优点，提取完全一般仅需数十分钟；超临界流体的表面张力为

12、零，这使它很容易渗透到样品的里面，带走测定组分；超临界流体萃取的选择性强，通过改变萃取的条件，如温度、压力等，可以选择性的萃取某些组分；超临界流体在通常状态下即成为气，因此萃取后溶剂立即变为气体而逸出，容易达到浓集的目的。,3）超临界流体萃取的因素：温度、压力、改性剂和提取时间。,（二）纯化 萃取的方法不仅用于测定组分的提取，也可用于纯化。例如二次萃取和柱色谱法。,返 回,1、,萃取法,利用药物与杂质溶解性能的不同进行分离,（1）保留测定组分在柱上，洗去杂 质，再用适当溶剂洗下组分,（2）保留杂质于柱上,中药及其制剂分析的一般程序包括：取样、检验依据和分析方法准备、样品的真伪鉴别试验、样品的杂

13、质检查、样品中主药的含量测定和检验记录等。一、取样取样原则：供试品要具有一定的代表性；必须严格按照规定的取样方法进行 取样。,第二节、中药及其制剂分析的一般程序,二、鉴别试验1鉴别试验的重要性：中药及其制剂的鉴别可以通过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检出而达到鉴别的目的。目前部分中药尚无含量测定项目，因此，鉴别就成为中药制剂质量控制的一个非常重要的环节。,鉴定有临床疗效的已知成分,黄连 小檗碱（抗菌消炎）麻黄 麻黄碱（支气管哮喘）乌头 乌头碱（毒性）洋地黄 强心苷（强心）延胡索 延胡索乙素（镇痛）,2鉴别方法 性状鉴别 显微鉴别：显微组织和显微化学反应鉴别法 理化法鉴别：微量升华法 荧

14、光与光谱鉴别法 颜色反应及沉淀反应鉴别法 色谱鉴别：纸色谱法 毛细管分析法 TLC、GC、HPLC,1）显微鉴别：用光学显微镜或电子显微镜进行鉴别。该法通常在下列情况中应用：药材及炮制品的外形鉴别特征不明显或外形相似难于鉴别而组织构造不同时；药材破碎或呈粉末不易用肉眼辨认或区分时；含原药材粉末的中药制剂。显微化学反应鉴别法：一般可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生的结晶、沉淀物，以及特殊的颜色变化，作为鉴别特征。该法可以确定基础品种中特殊化学成分的存在及在组织中的分布。,（含生药粉制剂）,丸剂、片剂、胶囊剂、散剂,快速，简便，覆盖面大,例：黄

15、连：纤维素鲜黄色 左金丸 均含石细胞：不能采用 吴茱萸：腺毛例：黄连粉末+水+稀盐酸 黄色结晶 槟榔粉末+水+稀盐酸,滤液+碘化铋钾,浑浊,显微观察：红石榴球形或方形结晶,振摇,微热,过滤,载玻片上,抗干扰能力差,显色、荧光,TLC法应用最多（Rf、颜色、荧光）,GC法 适用于含挥发性成分的药物,HPLC法常与含量测定同时进行,阴、阳对照法,阳性对照 将要鉴别的药材按制剂 工艺处理，再按鉴别方 法提取的溶液,阴性对照 把制剂中要鉴别的药材 除去，用剩下的各味药 按制剂工艺处理，再按 鉴别方法提取的溶液,O O O O O O O O O O 阴 样 阳 对 品 对,例,大补阴丸 黄柏的TLC法

16、鉴别,例,薄层板的选择,硅胶G板（可加0.2%0.5%CMC-Na）多用,氧化铝板 常用于生物碱类药物,聚酰胺板 常用于黄酮类及酚类药物,纤维素板 常用于氨基酸类药物,TLC法薄层板：最多的是硅胶G板，也可另加0.2%0.5%的CMC作为黏合剂，可用软铝笔在板上做标记；能经受一般的化学试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，可将酸在水中洗去，然后烘干保存。一般通用的展开剂：无水乙醇-苯（1：4）苯-氯仿（1：3）丙酮-甲醇（1：1）显色方法：紫外灯下观察荧光斑点 选用显色剂,a,定义 中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标定该中药材或中药制剂特性的共有峰的图谱,4）中药鉴

17、别新技术中药指纹图谱,b,色谱指纹图谱的基本属性,整体性 将指纹图谱作为一个整体来分析和比较它的综合特征以达到鉴别的目的。,模糊性 强调分析、比较指纹图谱的相似性，而不是完全相同。是一种综合的、量化的色谱鉴别手段。,色谱指纹图谱在中药质量评价中能够尽可能多地反应中药的全貌。不需要清楚每一个组分的化学结构；不需要对每一个组分都进行定量；只要求不同批号的同一种药品的指纹图谱保持一致。,雅莲,云莲,味莲,雅莲,云莲,c.指纹图谱的应用,I,III,II,诃 子,小诃子,大诃子,绒毛诃子,人参须根,人参主根,不同产地高良姜的气相指纹图谱,指纹图谱研究过程中的注意事项1、在药效学指导下进行研究，保证指纹

18、图谱反映的化学成分包括中药材中有效部位所含的绝大部分成分或有效成分的全部。2、样品的预处理过程及测定方法应简便、经济、易行，且专属性、准确度与重现性好。,三、杂质检查杂质检查项目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属、农药残留量、浸出物、挥发油、总氮测定等。,杂质来源及检查意义,水分 结块、霉变或有效成分水解,灰分 控制药物本身及泥土、沙石 等无机杂质,砷盐 剧毒，常由除草剂、杀虫剂 或化肥引入,重金属 环境污染和使用农药引入,残留农药 有毒,三、杂质检查1水分检查法 中国药典（2005年版一部）附录收载以下四种方法：烘干法、甲苯法、减压干燥法和GC法。,烘干法（不含或少含挥发性成分）甲苯法

19、（含挥发性成分）减压干燥法（含挥发性成分贵重药）GC法(2000年版新增）,2总灰分和酸不溶性灰分总灰分：是指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物，包括药物本身所含无机盐（称为生理灰分）、泥土、砂石等药材外表黏附的无机杂质。酸不溶性灰分：主要是外来杂质，如泥土、砂石,酸不溶性灰分的测定,总灰分的测定,3重金属与砷盐检查 与化学合成药物不同的是，检查前必须对样品进行有机破坏，破坏方法有干法和湿法两种。,干法破坏（ChP）,湿法破坏（USP）,碱融法破坏湿法破坏,4农药残留量 农药的来源 常用的农药：有机氯类：艾氏剂、氯丹、六六六等 有机磷类：三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷等 检查原则：农药不明的样品测定

20、总氯量、总磷量，已知农药的样品可采用GC法测定某个农药 的量。总氯量的测定 样品细粉+乙腈-水 滤液+石油醚 萃取液（65:35）,搅拌,过滤,萃取,浓缩,氧瓶燃烧,吸收液：硫氰酸铵比色法,GC测定取样 萃取农药 柱纯化 GC测定 测定有机氯时，使用电子捕获检测器（ECD）；测定有机磷时，使用火焰光度检测器（FPD）。,上法得的石油醚萃取液,总磷量的测定,洗脱液,吸收液：磷钼酸比色法,柱层析,浓缩,氧瓶燃烧,中国药典中药制剂含量测定所占比例 版本%1977 1.48 1985 5.31 1990 8.73 1995 12.81 2000 62.09（HPLC 36%TLCS 24%GC 3%)

21、,测定项目的选定原则,1 首选君药及贵重药、剧毒药建立 含量测定方法2 其次考虑臣药及其他味药3 有效成分明确的，可选有效成分4 成分类别清楚的，可测某一类总 成分的含量,5 检测成分应归属某单一药味6 检测成分应与中医用药的功能主 治相近7 确无法含量测定的，可测定浸出 物含量,重量分析法 容量分析法,特点 A、准确度、精密度高 B、抗干扰能力差,UV法 比色法,特点 A、灵敏度高 B、简便、快速 C、精密度稍低 D、干扰多,芦丁,黄芩苷,小檗碱,丹皮酚,测定薄层板上斑点对单色光的吸收或反射的强度而进行定量的方法,特点 A、分离效果好 B、适用于无法用UV、HPLC 法测定的组分 C、准确度

22、、精密度低于HPLC,2000年版中国药典（2000年版）薄层扫描法品种,品种数量 TLCS数量 占总数%534（药材）20 3.74458（成药）32 6.99978（总数）52 10.73,（1）薄层色谱条件,分离好 不拖尾,（2）检测方法,吸收测定法荧光测定法,反射法透射法,（3）扫描方式,单波长双波长,线性扫描法锯齿扫描法,外标法内标法,扫描方式：单波长 双波长 测定波长选在被测组 分的最大吸收波长，参比波长选在组分无 吸收的位置上，若背 景有均匀污染时，可 选择背景光谱中与测 定波长的等吸收处。,（4）散射参数SX,薄层板的散射使,Kubelka-Munk方程,（1）薄层板 均匀、平

23、整,（2）点样量 准确,（4）显色剂 均匀、适当,（5）保护斑点 用相同大小洁净玻璃盖住薄层板，并用透明胶纸封住边缘，以起固定和隔绝空气作用,（3）斑点 应完全分离，不拖尾,外标法（两点校正法）,RP-HPLC,PIC,反离子 氢氧化四丁基铵,色谱柱 ODS,RP-PIC,反离子 烷基磺酸盐 无机阴离子,外标法和内标法,离子对色谱法（PIC）极性流动相中加入离子对试剂，与被分析离子生成中性离子对，从而增加在非极性固定相中的溶解度，使分配系数增大,2000年版中国药典（2000年版）HPLC法品种,品种数量 HPLC数量 占总数%534（药材）54 10.11458（成药）48 10.48978

24、（总数）102 20.59,应用实例-小青龙合剂,处方 麻黄125g 桂枝125g 白芍125g 干姜125 五味子125g 细辛62g 甘草(蜜炙)法半夏188gNOTES：合剂是在传统汤剂基础上改进后的一种新剂型,生物碱,桂皮醛,芍药甙,挥发油,三萜皂甙,应用实例-小青龙合剂,制法 以上八味，细辛、桂枝提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，药渣与白芍、麻黄、五味子、甘草加水煎煮至味尽，合并煎液，滤过，滤液和蒸馏后的水溶液合并，浓缩至约1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏剂项下渗漉法，用70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，漉液浓缩，与上述药液合并，静置，滤过，滤液浓缩至1000ml，加入苯

25、甲酸钠3g与细辛、桂枝挥发油，搅匀，即得。,性状 本品为棕黑色的液体；气微香，味甜、微辛。功能与主治 解表化饮，止咳平喘。用于风寒水饮，恶寒发热，无汗，喘咳痰稀。用法与用量 口服，一次10-20ml，一日3次，用时摇匀。,方药分析君 麻黄发汗为君臣 桂枝解表为臣佐 甘草恐发汗太过,佐以甘草缓之使 白芍、干姜、细辛、法半夏、五 味子几药合力共为使。可外发汗，内行水，散表里之邪。,汉代张仲景伤寒论小青龙汤近代由重庆桐君阁中药厂改汤剂为合剂本方治疗伤寒表不解，心下有水气，干呕，发热而咳。近代也用于慢性支气管炎，支气管哮喘、肺气肿，均见咳、喘、痰白清稀者。,供试品溶液与阴性对照液的制备 取合剂10 m

26、l，石油醚分3次萃取，合并石油醚萃取液油层，浓缩至1ml，为供试品溶液A；水层用Na2CO3调PH11-12，用氯仿萃取，合并氯仿萃取液，回收氯仿至干，残渣用1ml甲醇溶解，为供试品溶液B；NOTES：阴性对照液如上法同步进行。,1.桂皮醛的鉴别 取供试品液A、阴性对照液、桂皮醛对照液（1ug/ml）15ul，点于同一硅胶G板上，环己烷-乙酸乙酯（17：3）展开，晾干，喷2，4二硝基苯肼乙醇T.S，供试品A与对照品在相应位置上显相同的橙色斑点，而阴性对照液无此斑点。,2.细辛挥发油的鉴别 取供试品液A、阴性对照液、细辛挥发油对照液（1：10乙醚液）5ul，点于同一硅胶G板上，环己烷展开，晾干，

27、喷10%香草醛浓硫酸T.S，加热至显色，供试品A与对照品在相应位置上显相同的粉红色斑点，而阴性对照液无此斑点。,3.麻黄碱的鉴别 取供试品液B，阴性对照液，麻黄碱对照品液（1mg/ml）各5ul，点于同一硅胶G，氯仿-甲醇-浓氨水（20：5：0.5）展开，晾干，喷茚三酮T.S，加热至斑点显色，供试品B与对照品在相应位置上显相同的蓝紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。,取合剂5ml，上聚酰胺柱，DW洗脱，洗脱液水浴浓缩至干，用1ml甲醇溶解，为供试品溶液C；聚酰胺柱再用95%乙醇洗脱，弃取洗脱液，用3M氨乙醇液洗脱，收集洗脱液水浴蒸干，1ml甲醇溶解，为供试品溶液D。,4.芍药甙的鉴别 取供试品液C

28、、阴性对照液、芍药甙对照液（1mg/ml）10ul，点于同一硅胶G板上，氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸-甲酸（8：1：2：0.04）展开，晾干，喷10%硫酸乙醇液，加热至显色，供试品C与对照品在相应位置上显相同的紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。,5.甘草酸的鉴别 取供试品液D、阴性对照液、甘草酸铵对照液（2mg/ml）2ul，点于同一硅胶G板上，乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-蒸馏水（30：2：2：4）展开，晾干，喷10%硫酸乙醇液，加热至显色，UV灯365nm观察，供试品D与对照品在相应位置上显相同的紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。,含量测定,HPLC法测定芍药甙的含量仪器与色谱条件 BECKMAN

29、332型高效液相色谱仪163型可变波长紫外检测仪，220nm427型记录及数据处理仪色谱柱为YWGC18流动相乙腈-水（15：85）,标准曲线制备 精密称取芍药甙5.08mg，溶于水至50ml量瓶中，定容，分别吸取0.50、1.00、1.50、2.00ml于10ml量瓶中定容。回收率测定 精密吸取除去白芍制成的合剂（即阴性对照液）0.3ml与适量芍药甙对照品液，通过0.5g聚酰胺柱，用水洗脱至50ml量瓶中至刻度，依前述条件测定，平均回收率为99.42%，RSD为0.23%（n=3）。,样品测定 取自制小青龙合剂摇匀，用滤纸过滤，精密吸取0.3ml滤液通过聚酰胺柱，以不同回收率测定条件进行测定

30、。,分析实例万氏牛黄清心丸,处方 牛黄10g 朱砂60g 黄连200g 黄芩120g 栀子120g 郁金80g,分析实例万氏牛黄清心丸,制法以上六味，除牛黄外，朱砂水飞或粉碎成极细粉；其余黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜100-200g制成大蜜丸，即得。,古方为糊丸，亦有水丸,性状本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；气特异，味甜、微涩、苦。功能主治清热解毒，镇惊安神。用于热邪内闭，烦躁不安，神昏谵语，小儿高热惊厥。,方药分析 本方来源于明.痘疹世医心法，本方为清心开窍剂，主治热邪内陷心包所致窍闭神昏症。方中牛黄，清心解毒，豁痰开窍为君药；黄连、黄芩、

31、栀子清热泻火，为臣药；朱砂清心，重镇安神，郁金行气开窍共为佐使药，合用以奏透邪泻热，开窍安神之效。,方药分析牛黄清热解毒药，主含胆酸类成分。黄连清热燥湿药，主要为小檗碱。黄芩清热燥湿药，主要为黄酮类。栀子清热泻火药，主含栀子甙。朱砂安神药，主含硫化汞（HgS）。郁金活血去瘀药，主含挥发油。,鉴别,显微鉴别郁金糊化淀粉团块几乎无色。栀子种皮石细胞。黄芩纤维淡黄色，梭形，厚壁，孔沟细。黄连纤维鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显。朱砂不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色或棕黄色。,郁金糊化淀粉团块栀子种皮石细胞黄芩纤维黄连纤维朱砂不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色或棕黄色,化学鉴别,1.朱砂的鉴别

32、取本品3g，加水适量，研匀，反复洗去悬浮物，可得少量朱红色沉淀，取出，加入盐酸1ml及铜片少量，加热煮沸，铜片由黄色变为银白色。HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2S NOTES：在酸性条件下，朱砂与铜片发生置换反应析出金属汞，在铜片表面形成银白色汞齐。,2.人工牛黄的鉴别 取本品，剪碎，加硅藻土0.6g，研匀，加氯仿10ml、冰醋酸0.5ml，加热回流30min,放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。胆酸和猪去氧胆酸加乙醇制成1ml含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。,TLC法 CMC-Na，硅胶G展开剂 醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇（32:6:1:

33、1）显色剂 10%磷钼酸乙醇液，1100C,10min,人工牛黄,供试品,牛黄空白,猪去氧胆酸,胆酸,3.黄芩的鉴别 供试品溶液的制备：取本品3g，剪碎，加硅藻土0.5g，研匀，加甲醇20ml，加热回流1hr,放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备：黄芩甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。,TLC法 CMC-Na，硅胶G（4%醋酸钠）展开剂 醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）显色剂 2%三氯化铁乙醇液,使斑点更为集中,-OH与Fe+3络合,黄芩甙,供试品,黄芩空白,4.栀子的鉴别 供试品溶液的制备：取本品3g，加乙醚15ml，研磨，弃去乙醚。残渣挥干乙醚

34、，加醋酸乙酯30ml，加热回流1hr,放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备：栀子甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。,TLC法 CMC-Na，硅胶G展开剂 醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（10:7:2:0.5）显色剂 10%硫酸乙醇 1050C,10min,栀子甙,供试品,栀子空白,5.黄连的鉴别 供试品溶液的制备：取含量测定项下剩余的盐酸-甲醇提取液4ml，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，使成1ml作为供试品溶液。,对照药材溶液的制备：黄连对照药材50mg，加甲醇10ml，回流加热15min,滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，

35、作为对照药材溶液。对照品溶液的制备：再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含 0.5mg的溶液，作为对照品溶液。,TLC法 硅胶G CMC-Na展开剂 苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（12:6:3:3:1）显色剂 UV（365nm）,公式品,含量测定,1.朱砂 取本品约5g，剪碎，精密称定，置250ml凯氏烧瓶中，加硫酸30ml与硝酸钾8g，加热俟溶液至近无色，放冷，转入250ml锥形瓶中，用水50ml分次洗涤烧瓶，洗液并人溶液中，滴加1%高锰酸钾溶液至显粉红色，两分钟内不消失，再滴加2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml，用硫氰酸铵滴定液滴定，即得。每1ml的硫氰酸铵滴

36、定液相当于11.63mg的硫化汞。,硫酸与硝酸钾分解试样及有机破坏高锰酸钾溶液除去试样分解时产生的亚硫酸粉红色两分钟内不消失亚硫酸可将Hg2+还原Hg+使含量变低，观察两分钟完全除去亚硫酸硫酸亚铁溶液除去过量的高锰酸钾滴定反应 Hg2+2CNS-Hg(CNS)2显色反应 CNS-(过量)+Fe3+Fe(CNS)2+(红色),2.黄连 取本品约4g，剪碎，精密称定，置索氏提取器，盐酸-甲醇（1:100）适量，加热回流提取至提取液无色，提取液移至50ml量瓶中，用盐酸-甲醇适量稀释至刻度，摇匀，照柱色谱法，精密量取5ml，上AL2O3柱,25ml洗脱，收集洗液置50ml量瓶中，乙醇稀释至刻度，精密

37、吸取2ml置50ml量瓶中，加0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀。UV345nm测定A。为728,本品含总生物碱按盐酸小檗碱计不得少于1.7%。,黄连 方中臣药之首 用量最大有效成分清楚 黄连有效成分为小檗碱，尚含其它少量生物碱，如黄连碱、甲基黄连碱、药根碱、巴马亭等，均为原小檗碱型生物碱。,硫酸溶液 在酸性条件下，N原子呈共轭体系的季铵状态，在345nm处有最大吸收。其它五味药的空白提取液在该波长处略有吸收，约相当于0.3%小檗碱，因此测定结果偏高。本品为蜜丸制剂，其黄连生物碱溶出速率较药材相对缓慢，回流至提取液无色后应放置一段时间。,五、检验记录1要求：原始资料真实、详细、整洁。2内容：送检单位、送检日期、检品名称与规格、批号、检验项目、检验方法、检验者、审核者及检验日期。对用显微镜或电镜检验所锝的图象，应真实描绘，注明放大倍数或附相片及说明。检验中所用仪器应标明型号。所得到得数局，应详加核对，并进行统计学处理。,返 回,练习与思考,1中药制剂分析有何特点？2中药制剂分析中样品的前处理方法有哪些？3简述中药制剂分析的一般程序。,返 回,