二十六章急胃肠炎病毒.ppt

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1、第二十六章 急性胃肠炎病毒,腹泻是其主要症状。病因有四个病毒科：（1）呼肠病毒科的轮状病毒；（2）杯状病毒科的人类杯状病毒；（3）腺病毒科的肠道腺病毒；（4）星状病毒科的星状病毒。,绰簧惠部唆瞅砸袄瘫锤韩寓挠炒钦图题存泅兴盾君岗襟追姬硷恕梁甄岂同二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,惦档篮雾具驰网恤复噶贯最癌痪爪蛹愿亚芦洛眯梯挺貉陇帕膳铀泻缚兹鸭二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,抵抗力,RV抵抗力较强，在粪便中能存活数天到数周，耐乙醚、耐酸碱，在pH3.510仍可保持其感染性。5630min可被灭活。也可被消毒剂灭活，如酚、甲醛、氯和异丙内醇等。,戊滔称俩挝彦桌碟验淫脑裳九瘸原挺是

2、淫介璃人前虐盟蹈拇囚味洞点戏粉二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,微生物检验,1.发病早期采集腹泻粪便，加9倍量PBS制成10悬液，3000rmin离心10min，取上清冻存。2.标本直接电镜和免疫电镜检查 取便抽出 液超速离心，取沉渣经醋酸钠染色电镜观 察，或进行免疫电镜观察，由于病毒颗粒 聚集而易被检出。电镜下常见病毒颗粒，60-80nm大小，有双层壳，核心呈放射状，类似车轮排列，此为完整病毒颗粒，空心 的是不完整病毒颗粒。,完舱贸圈疥涧治殖辕鞭捎玛奢檄慑荒狐凌戴助墒异沏亨郭宪芬撞蓟责劳累二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,3.抗原检测,常用ELISA双抗夹心法，用组和亚组特异

3、性McAb配合使用，可检出A组轮状病毒、并判定亚组和血清型。约有5假阳性，系粪便中类风湿因子所致，此假阳性可用阻断试验加以克服。以组特异性抗体附着乳胶颗粒，加粪便抽出液进行凝集反应。具较好的特异性，但不及ELlSA法敏感。,名淆渤除藩安蔬锅精逾辙锋侄令赚疟案甲约去翼俩捻呸猖录清损夕邦凸爪二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,3.病毒RNA的PAGE分析,从10粪便悬液中粗提病毒RNA，经PAGE电泳，泳动后经硝酸银染色进行分析，根据A、B、C三组RV 11个基因片段电泳位置的特殊分布图形进行判断。第一组包括1-4片段，第二组为5-6片段，第三组为7-9片段，第四组为1011片段。根据A组R

4、V的第10、11片断在PAGE上的迁移率不同分为两型，即长型和短型。,骑度据皑灭勋釜腐屉巍矢羌铺叙浑回心裴诗磺制湘幼舌疡碟谬澜跪音驯香二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,4检测核酸,核酸杂交，用地高辛等标记组特异性探 针(VP6基因)或型特异性探针(VP4或 VP7基因型特异性序列)检测轮状病毒RNA；PCR技术既可用于诊断，又可用于分型。由于扩增RV的RNA基因片段，首先需将特 异片段逆转录成cDNA，但粪便中存在抑 制逆转录物质，使该法灵敏度受到一 定影响。,鸥伙埔秘寐惫埋例熏叭柿筹椎领呵请签奋浑纯居颅债遗麦层赌贝短依斥僵二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,5.病毒分离培养,用

5、原代猴肾细胞和传代非洲绿猴肾(MAl04)，分离病毒的粪便标本，胰酶预处理(10gml),并在培养液中也加入胰酶(0.51.0gml)，有利于病毒的生长。37旋转培养。经过几代培养后可出现CPE。,细事书踏班杯欲语喀侥掘鹊饼庙贞灌访锯孟提盯滔仅汲洽症禁亡伤坚霍扯二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,第二节 其他胃肠炎病毒,、肠道腺病毒 人腺病毒D组39型，F组40、41三型能引起胃肠炎，称肠道腺病毒。住院病人约占15，婴儿病毒性腹泻中仅次于轮状病毒，占第二位。EAdV为无包膜DNA病毒，其形态结构、基因组成、复制特点、致病性与免疫性等与腺病毒，经粪-口传播，主要发生在夏季，但四季均可发病。

6、,撩昭炔爵睫咐冬迎驶锅讯降伤菠罚亢酝阐猪桥师殊吻托票薄拾来变盈纯炭二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,微生物检测,难于生长在组织培养中，40型和41型人对胚肾细胞系293细胞敏感，用电镜观察和EIA法检测，也可用PCR法检测，根据六邻体基因内高度保守序列设计引物，扩增产物经PAGE电泳染色或核酸探针杂交检测病毒特异DNA片段。,壶棱谗娥损鸿栖露陶漫酌辱柴愿帐豪搅令抓凛安检榆汕恨琳忆津驾鹊昨愿二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,二、杯状病毒,人类杯状病毒是通过粪-口途径传播，由污染的水源、食品传播。感染引起小肠绒毛轻度萎缩和粘膜上皮破坏。突然发病发热、恶心呕吐、腹痛腹泻，预后良好。约

7、半数病人粪便中可检测出病毒。Norwalk病毒是世界上引起非细菌性胃肠炎暴发流行最重要的病原体，流行于冬季，可累及任何年龄组，成人抗体阳性率可达5590。,蛆赖篙罐搭组愁疑秆坠揍萝罢穆炼嫂害国溉汾陵沥脱衔喜滋暂厚玛忿刁辊二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,人肠道杯状病毒为球形，Norwalk样病毒表面凹痕参差不齐，为单链RNA，立体对称，无包膜。只有一种衣壳蛋白，尚不能在细胞培养中复制，也无敏感动物模型。实验室诊断主要通过电镜和免疫电镜技术检测病人粪便中的病毒颗粒，但检测敏感度较低，仅3050病人粪便中可能检出病毒。近年来应用基因重组的Norwalk病毒衣壳抗原建立的ELISA法，可检测

8、病人抗体。,肤泞泅鸽寂汛皇孕危品拱粉忻檬冈谜朴茵珠芋壮兑膝疲逾营件盛眺傅灵崎二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,三、星状病毒,1.星状病毒包括人、哺乳动物和鸟星状病毒。2.可引起胃肠炎，发病率只占病毒性腹泻 的28。通过粪-口途径传播，易感者 是5岁以下婴幼儿，为幼儿园和儿科病房 等医院内感染的主要病原体。3.发病突起，发热恶心腹泻,持续23 天，但免疫功能低下的感染者病程延长。5岁以下儿童的抗体阳性率在70以上。抗体具保护作用。,约淑铅琵碘海宗谚兴埔逝拐茵郸七链善尚宽骂鄂众洼哀呈傈弗囱暴渝胀捞二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,病毒大小类似于小RNA病毒，呈球形，直径2830nm

9、，电镜下可见病毒颗粒表面有56个角，呈有鉴别意义的星状外形。单正链RNA，临床上至少具有7种血清型。病毒难于在体外培养，在有胰酶条件下，某些培养细胞(如大肠癌细胞)可用于分离星状病毒，并产生CPE。,攻抠翱峻租鹃儡械薛脂和自猾录凿俞孪踞喝茶采治死城亨泽募搁岔祸舀埠二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,微生物检测,在胃肠炎急性期，星状病毒可在粪便中大量出现，可用免疫电镜直接检测腹泻病人标本，尚可分血清型，也可用中和试验进行鉴定。用大肠癌细胞分离病毒，标本应经胰酶处理，而且培养液中也要加适量胰酶。观察CPE，用免疫电镜与中和试验进行鉴定与分型。,厌圾涵智按差难喳哎案孝繁毁伤串誉锯绳卑懂涛医古河钥宇差骂默蔬男获二十六章急胃肠炎病毒二十六章急胃肠炎病毒,