第七组免疫研讨.ppt

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1、实验证据的逻辑是否严密？,免疫学专题研讨,吏激怜具暇凋逼仗憨镣挑嘻住寻雨迭抗诣镀嚼侥撑榔坝然压俗右绰鄙汲微第七组免疫研讨第七组免疫研讨,作者研究的是记忆CD8 T细胞在MHC类I缺陷小鼠中的持续性。根据感染了淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）的成年小鼠能够在两周内自愈，并且能够表现出长期的CD8+T 记忆。在维持CD8记忆过程中，去判定或者判断MHC I类分子的需要。研究者从Thy1.11 LCMV获得免疫荧光激活细胞（FACS）分选纯化的CD8+T细胞，把细胞转移到 MHC class Ipositive(b2M1/1)或 MHC class Ideficient(b2M2/2)同类系的

2、Thy1.21小鼠中。,栋麻撇惑惟道信瀑敖期阵活靠伸觉碑圈父斩浊做内猎体猩馈莎布愚康盼鸟第七组免疫研讨第七组免疫研讨,成年小鼠感染脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)2周,然后表现出长期的CD8 T细胞记忆的急性淋巴细胞为了确定类MHC分子在维护我们获得 CD8记忆的需求，我们从(99%)Thy1.11 LCMV获得荧光激活纯化 CD8 T细胞并把它转移到MHC类I-positive(b2M1/1)或MHC类 I-deficient(b2M2/2)同类系Thy1.21老鼠。在转移之前,对FACS-purified CD8 T细胞的存在进行了病毒测试，发现没有任何检测病毒材料。,猖嚏方碎棘三具绢洒镑芒盟

3、昨竞谚有凛潘腰畔无搜农缘恢熔秘郡霉喂掌赵第七组免疫研讨第七组免疫研讨,外周T细胞在淋巴细胞减少的情况下能通过稳定增殖来重组空的免疫系统。当已经达到淋巴细胞体内平衡，停止初始型细胞增殖,而为了保持的记忆细胞，记忆细胞以较低的速度继续分裂。我们试图去确定在MHC1类分子缺乏的小鼠体内在达到淋巴稳态之后，相对数量稳定的记忆性的CD8细胞是否还在增值，又或者失去了细胞分裂的能力。因此，CD8记忆T细胞不仅能存在于b2M2/2老鼠体内,并且在严重缺乏MHC1类分子的环境中也能稳定的增殖。,公佩戴宗拘额箭怎桩昂逗榜盒种讣坡坍蝗懦陈屈糊涝萄今弘窟葵翅纶秩哩第七组免疫研讨第七组免疫研讨,在上述实验中CD8+T

4、细胞均来自b2M1/1小鼠。感染的CD8+T细胞和MHC1识别导致记忆CD8 T 记忆细胞在b2M2/2鼠上的存活是不太可能的，因为仅约0.5至1 传染至脾的细胞存活。尽管如此，为测试这种可能性，我们用已接种 LCMV 的嵌合体小鼠（b2M2/2骨髓转移到 b2M1/1小鼠）的MHC I类缺陷 CD8+T细胞做了继承性转移实验.因此，MHC I类分子缺陷的记忆CD8+T 在b2M2/2小鼠存活，过继转移“满”（即未照射）小鼠后可见到记忆细胞的存活。,枕幢讼眷草瞬挨龄纤嘎辫枝途津屯腊疟壁劣旭盟丸执咋烘研法辈姚僚断沧第七组免疫研讨第七组免疫研讨,作为一个关于存活的缺乏MHC-I分子记忆T细胞更为严

5、谨的实验，我们接下来用Db2/2 3 Kb2/2 3b2M2/2小鼠作为受试对象。综合起来讲，这些结果显示了即使小鼠完全缺失经典的MHC-I分子（Kb和Db）和b2M，CD8记忆T细胞仍能增殖并存活较长时间。,挂绅绊桓擅易俺秤竞叁甚痔雕文瓷恕堪氖譬彩伦翌竿掇瞩磅莹绽撇摊馋荡第七组免疫研讨第七组免疫研讨,记忆性 T 细胞又一个特点：就是他们能够快速表达出反应后的二次暴露抗原。对利用同源性肽段刺激后4 小时的LCMV(淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒)特异性 T 细胞使用记忆性 CD8+分子、IFN-（丙种干扰素）并观察现象。却产生了相反的结果：已经使用IFN-刺激的CD8+T细胞在24 小时以后产生的信

6、号分子基本表达量仍然较低。因此我们便研究记忆性CD8+T细胞是否具有DB22，323 b2m2 KB22小鼠的持续性保留能力，我们将记忆性 CD8+T 细胞快速接触抗原使其产生细胞重复应答，并检测其 MHC 的类型，或是通过此方法使记忆性 CD8+T恢复到那未分化发育成熟的 T 细胞的状态。因此，在记忆性 T 细胞被激活之后，他们不再需要再次接触MHC I类分子来维持他们的“准备型应答”模式。此外，记忆T细胞对多种表位缺乏MHC I类应答，和11和22小鼠的免疫应答的表位层次相同,损否瘦只赴脓碑罐霜赖离到共幽况吭吝得唤捉真虽篷既咋满明萧挑任呜越第七组免疫研讨第七组免疫研讨,记忆性T细胞的一个特

7、点是他们的再次接触后表现出快速的功能反应抗原的能力（2,4）。LCMV特异性记忆CD8 T细胞产生干扰素-G（IFN-G）刺激在与同源肽后4小时内（2）。与此相反，幼稚CD8+T细产生IFN-在超过24小时后，还产生显着较低量（2，4，8）。因此，我们研究是否记忆CD8+T 细胞坚持在D b2/23K B2/2 3b2M2/2 小鼠保留做出迅速的细胞因子的能力在再次接触抗原和MHC I类，或恢复到一个幼稚T细胞表型反应后。因此，在记忆T细胞产生后，他们不再需要接触MHC I类分子，以维持它们的“响应就绪”模式。此外，记忆对多个表位的反应被保持在缺乏MHC类，表位层次结构是相同的in在1/1和2

8、/2小鼠中。,晓让罪磕川会辞文铀辆辽毖庸膳讼评雅栽郭璃栓讶瑟暇捶蔷蹲衣摘面哈僳第七组免疫研讨第七组免疫研讨,与我们的结果一致的是，最近两个关于表达特异性识别HY抗原的TCR转基因的CD8 T cell的研究显示，特异性的抗原并不是维持记忆性T cell 所必需的。然而，这份报告中同样显示MHC-1 类分子却在其中扮演了重要的角色。这一结论不同于我们的研究，而且它也许反映出一个独一无二的具有HY特异性特征的T cell，或者仅仅是实验设计的差别，亦或是两者都有。需要着重强调的是，无论如何，我们都用了最广泛最严格的协议来试验维持CD8 T cell的记忆对MHC 1 类分子的需求。我们监视了幸存的

9、几个不同的记忆细胞群体，包括单克隆的和多克隆的抗原特异性CD8 T cell和所有的来自未感染或免疫的小鼠的CD8 CD44（high）细胞，此外，在一个一系列的实验中，我们使用一个MHC 1 类分子缺陷的CD8 T cell作为供体。作为受体，我们用已经辐照和未辐照的MHC 1 类分子缺陷的小鼠。所有的这些实验给出了一个相同的结果，那就是，CD8 T cell记忆性的维持的独立于MHC 1类分子的。,您唁枚碟蹦擅擒雨吕核愿犯闹黔骡燕看余骇絮摧魂障尉糕乎透秃腺拂伞美第七组免疫研讨第七组免疫研讨,所有的这些实验给出了一个相同的结果，那就是，CD8 T cell记忆性的维持的独立于MHC 1类分子

10、的。这个发现时支持Swain 的观察结果的。（也就是那个在MHC class II2/2mice记录了持续的记忆性CD4 T cell）。因此，这个看上去好像不依赖MHC 分子是CD8 和 CD4 T cell 记忆所共有的一个性质。,披制痛徘拿礁制迹屑澡柳债蜜赞阴邯儿过拿脾恶柯酝寄话蠢虫再邦袁惑炮第七组免疫研讨第七组免疫研讨,不严密之处：研究者只使用了 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）一种病毒来进行实验，为了使结果更加让人信服，使实验逻辑更加严密，应该使用多个病毒来进行实验，形成对照。,锤矗犊氖挑侵咆埂家锯哮着避肘了碳缄恨净更蔬却独踩泅虚娘斜贯紫卷昂第七组免疫研讨第七组免疫研讨,thank you,督归截嗓慌鲍茧衡窃从声挝蜘泪汇瑞事瘪臣楚洪卯香姨兰侦烫鹊盆懈氟拓第七组免疫研讨第七组免疫研讨,