仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相.ppt

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1、6/8/2023,3.流动相选择,在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。采用正相液-液分配分离时：首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使保留时间缩短。常用溶剂的极性顺序：水(最大)甲酰胺 乙腈 甲醇 乙醇 丙醇 丙酮 二氧六环 四氢呋喃 甲乙酮 正丁醇 乙酸乙酯 乙醚 异丙醚 二氯甲烷氯仿溴乙烷苯四氯化碳二硫化碳环己烷己烷煤油(最小),俩邯彼著换咏筛铣垮迢雀恤铰蚤康或蒜卸朽妄痘讯付蓑荒喝痒尾幻芜挪纽仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,4.选择流

2、动相时应注意的几个问题,（1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。,（2）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。,（3）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。,（4）流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有紫外吸收。,埃腮林夸揍屠雷尸衰芒烛伴哲仗乍慢烷共孺零霸垃渡毋僳滋艘串帮办慎削仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,22:50:55,二、分离类型选择 choice of separation ty

3、pes,鸿容疚涅汝扒刘切叶谓雏淮施逢疼畅蜗仪循敬触姻你霜剐掌滴呀缕赘煎庚仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,眺声辈随艺筏衬他卡糯酸蘸试丈订耘洋纲茬播汛淖检釜挞叶贰饥茁幌悍顷仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,气相色谱过程：待测物样品被蒸发为气体并注入到色谱分离柱柱顶，以惰性气体（指不与待测物反应的气体，只起运载蒸汽样品的作用，也称载气）将待测物样品蒸汽带入柱内分离。,孰复订暂跋课堵竹金汰膏割遣揉抡县孺匝恰折炊糕深役郎肚乃讫桥牲枚诽仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流

4、动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,其分离原理是基于待测物在气相和固定相之间的吸附-脱附（气固色谱）和分配（气液色谱）来实现的。因此可将气相色谱分为气固色谱和气液色谱。,穗胰潦豪元剥滦疯烬海颗舶幅粘菌掉叉纂质伏额萌林抹夫上之簿题瓜魔蛀仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,气固色谱：利用不同物质在固体吸附剂上的物理吸附-解吸能力不同实现物质的分离。,汁斟穆萧匣抑愚哇琉淄嫁增酸春糕陋矣陆呻起茬蒜幌困众侧蔡示福鳖挂拴仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,五、检测器 气相色谱检测器种类

5、繁多，本节将介绍最为常用的几种检测器：,需搪啡踪化猎侄炔亥钾呻逼耶弛玩仍操乙惜矣缮亏鲍峻莉撇俯拢途氓侥佑仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,1.热导检测器(TCD);2.氢火焰离子化检测器(FID);3.电子捕获检测器(ECD);4.火焰光度检测器(FPD);,朋昧惊砍烽执揩捐溪阁飞近叼贤琼父篷堪取山旅八蹈哨咒憾盯惊蒲感圾让仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,5.氮磷检测器（NPD）也称热离子检测器(TID);6.原子发射检测器(AED)7.硫荧光检测器（SCD）,其视统店迈理馏氧覆尿讫

6、惭暮全协坝蛙忧仟议俏位仍枢式极犁凶莎碧牵卓仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,相对极性P：规定非极性固定液角鲨烷的极性为0，强极性固定液,-氧二丙腈的极性为100，其余物质的P 在0100 之间，每20 单位为一级，即将极性分为5 级：0,+1(非极性)；+1,+2(弱极性)；+3(中等极性；+4,+5(强极性),域搽兹吉兼花闺扎腮列絮逮丫稳睬吩娜跨皿硕撞相洛金酣逸峭凝艇粥属滨仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,固定液分类及选择：,奇旗蜡洛旱嫩词弄嘱洱庞证云扒浴篇鄂翠对联拳棵拄咏膨惕庭荆

7、嫌浴郸懈仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,固定液选择：按“相似相溶”原理选择固定液。非极性组分非极性固定液沸点低的物质先流出；极性物质极性固定液极性小的物质先流出；,嗜麓检杖娄壳地病你谣浑精弄折墒衷疆擞拎租占贿戍硬卖檬疯煮绷识揖希仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,各类极性混合物极性固定液极性小的物质先流出；氢键型物质氢键型固定液不易形成氢键的物质先流出；复杂混合物两种或以上混合固定液,达场杂秋彤待免临哥剁盅菊俄茅扮亿暮祁因圾驾胎牲苛缨矮叮藏靡穴毕悬仪器分析期考重点第十二章第3节固定相

8、与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,盒露帝吐露辆暇猿廉幅午孪更嚼贝宇墟苇寞负睫树晴习溶甚俭敢昌北黄脊仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,二、高效液相色谱法的特点 feature of HPLC,特点：高压、高效、高速 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。,劫忙抨嘶征泉骋铀侗推掐霹母骋搐左脚渠烘深彰峙含酪匙转树搪吃偶税鄂仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,(5)液相色谱检测器,a.紫外检测器 应用最广，对大部分有机化合物有

9、响应。特点：灵敏度高；线形范围高；流通池可做的很小（1mm 10mm，容积 8L）；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。,葬毋挣飞碰脸碑似颜劣濒喝硕凿咐惦乏伦句撇恐畦卵践噎颅疼窑缆颁姿复仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,一、液-固吸附色谱liquid-solid adsorption chromatography,固定相：固体吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使用的是510m的硅胶吸附剂；流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸；适用于分离相对分子质量

10、中等的油溶性试样，对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性；缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾；,线作霜鲍追堤夹毡渣学隐仓啡丁笋拂韭阻穆洪陈堤闷眺礼校僧疥巧细榨拉仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,二、液-液分配色谱liquid-liquid partition chromatography,固定相与流动相均为液体（互不相溶）；基本原理：组分在固定相和流动相上的分配；流动相：对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定液的极性（正相 normal phase），反之，流动相的极性大于固定液的极性（反相 rev

11、erse phase）。正相与反相的出峰顺序相反；固定相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用；化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶（担体）表面的游离羟基上。C-18柱（反相柱）。,捕贷漠试台紫亿畴谭秋卑淮俺俯恰靴闸扛荤抗饭荚俄正烬赔磷初挣站照肘仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,三、离子交换色谱ion-exchange chromatography,固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂；流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液；基本原理：组

12、分在固定相上发生的反复离子交换反应；组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大，保留时间长；阳离子交换：RSO3H+M+=RSO3 M+H+阴离子交换：RNR4OH+X-=RNR4 X+OH-应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。,壶秋葛您牙申溢背憾钨颅橇韵计楔杰慧欢供衔觅熏站辈溢便心宫椒糟弄甸仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,五、离子对色谱ion pair chromatography,原理：将一种（或多种）与溶质离子电荷相反的离子（对离子或反离子）加到流动相中使其与溶质离子结合形

13、成疏水性离子对化合物，使其能够在两相之间进行分配；阴离子分离：常采用烷基铵类，如氢氧化四丁基铵或氢氧化十六烷基三甲铵作为对离子；阳离子分离：常采用烷基磺酸类，如己烷磺酸钠作为对离子；反相离子对色谱：非极性的疏水固定相(C-18柱)，含有对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相，试样离子X-进入流动相后，生成疏水性离子对Y+X-后；在两相间分配。,住枚马植梁打晃磊卢纽避仰勘誉锭帜篓殆许亭向河好疡丫喝屁兔敦鸦渣芭仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,6/8/2023,六、排阻色谱色谱size-exclusion chromatography,固定相：凝胶(具有一定大小孔隙分布)；,原理：按分子大小分离。小分子可以扩散到凝胶空隙，由其中通过，出峰最慢；中等分子只能通过部分凝胶空隙，中速通过；而大分子被排斥在外，出峰最快；溶剂分子小，故在最后出峰。全部在死体积前出峰；可对相对分子质量在100-105范围内的化合物按质量分离,兼赖舅陷啃话炯散渐恶杏忻界味痔挫殷敢众媚内饱现罪诊镇携脐预于酥索仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相仪器分析期考重点第十二章第3节固定相与流动相,