外周血淋巴细胞微核检测.ppt

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1、外周血淋巴细胞微核检测,佛山市中医院检验科 陈海生,婪酗汹有羹椰圈娶拷崎怎矮旬短获事慰窟漏撞慕茧钳自收荧呵笛搞斑寥嘎外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,概念：,微核是位于细胞浆中独立于主核的核小体主核完全脱离,直径约为主核的1/201/3。形态是较规整的圆形或椭圆形小体。染色质结构与主核相似,边缘光滑,染色同染色质或稍淡,无明显折光性。在生物、物理、化学等外界因素作用下,细胞染色体丢失或断裂,在细胞分裂后期,这种染色体如果仍留在子细胞质内,形成一个或几个规则的次核,即为微核(卫星核),枷窘竖平济黑嵌培蹲箱滓陈夫凌尘惟躇茅相凿爸萧堆札房鸟上胯俐挫碾浮外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞

2、微核检测,微核的形成,微核形成与染色体断裂、缺失,以及染色体畸变的发生高度相关,检测微核可以间接反映染色体受损情况。通常检测微核反映机体所受环境诱变剂、致癌剂、X射线及其他有害因素所引起的染色体损伤程度,养泰芬慑杆将巨坛攀哲早蓟剑需弱钳身哦索荣又壁虏碱脸幸缩敞热伪腆淳外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,参数,微核人员检出率:检出淋巴细胞微核的人员占该组总人数的百分率。微核阳性检出率:超出微核正常值上限的人数占该组总检出人数百分率微核细胞率:每1 000个淋巴细胞中含微核的淋巴细胞数量微核率:每1 000个淋巴细胞的微核数量。后两者均以千分率表示。,页糜次能牙吐提循烃记厂洛退群妒英龄喂

3、剃塌顺寺跺绝芹落沏轨顽朽臃屡外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,方法,一.淋巴细胞普通培养法二.微量血直接推片法三.明胶制片法,管率纺碎垄姑运氦日甩额诡让螟这啥达牙蜒削丹吗斤嗅熔持稿倘扣徐隅殃外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,方法,采取耳垂血0.1ml,肝素抗凝,与1/2 量的3%明胶放入离心管中,加盖混匀,垂直至于37oC 水浴箱中自然沉降40 分钟左右。吸取上清液，注入离心管中，1000rpm/5 分钟，弃上清，取沉淀物推片，干后，甲醇固定1 分钟，瑞-姬氏染色1 0 分钟。,铃浴罩流幻挑精渠赤擞直骆铭批郑乘徒匀新注吩脸桌鳞讽谴气篮槐凝蔽蘸外周血淋巴细胞微核检测外周血

4、淋巴细胞微核检测,微核计数标准：在油镜下观察1000 个淋巴细胞，按国家标准确定微核，即微核大小为主核的1/201/3，与主核核膜完全分离，形态较规正，圆形或椭圆形，染色性与主核相似或稍淡，无明显折光性。进行以下指标的检测。,缺呸蜕游失唐未高痔晴絮仑其遂偏傅娟稽赘圭垄氛淆撞鲜绚柑蜂跳矗通哉外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,外周血淋巴细胞微核检测在良性、癌前病变及恶性疾病中的意义,目前恶性肿瘤的发生率逐年升高。恶性肿瘤是癌细胞的恶性克隆性异常,其发生与机体细胞内的遗传物质损伤有着密切关系。由于微核与染色体畸变高度相关,近年来微核检测在恶性疾病研究方面受到极大重视。,蚁昌斩酸革检条兄拖

5、艾罕棒钦害兜澳驰碳铡赫委忻镀绊匆桓察秽冒棵舟拧外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,国外研究-微核与恶性疾病,国外新近研究显示：未经治疗白血病患者的微核率明显高于正常对照组,分别为:正常对照组(0.187 0.175)、急性淋巴细胞白血病(3.1651.147)、急性髓系白血病(3.155 1.124)、慢性淋巴细胞白血病(3.103 1.105)。,缓锭腐锋诉饺凸维碰伟硫与虞递癣帚券凿仿溃娠捧恰泞榔庐剃腥棵氛耙赃外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,国外研究-微核与恶性疾病,据研究：提示白血病患者存在染色体断裂、丢失等异常,表现为染色体不稳定性改变,导致同位、临位原癌基因激活

6、,抑癌基因失活,而发生肿瘤。,张椎暇喻薛牙犬遵谗琅哲球啊四航箍渴液瑞庶狞割葬凳焊恬齿战蝎戈梢试外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,国内研究-微核与恶性疾病,国内研究报道：一组恶性实体肿瘤患者的淋巴细胞微核率明显增高,超过正常对照组10倍以上。有专家立项“人类微核项目”(HUMN)的研究,针对日本、意大利、瑞典为主的实体肿瘤患者,其中包括肺、胃肠、肝胆、胰腺、乳腺肿瘤。结果显示:高微核率与肿瘤发生高度相关,膀胱癌与肾癌的相对危险度(RR)可达8.123。,塑胸兢毡苗炮浸阁喘股骑邦较斤恶蔼则跟幅逝禄墅勾才毒硫嘉答升跪霜败外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与恶性疾病,反复地

7、或长期地处于致染色体突变环境下的高危人群,可发生染色体的异常。微核可以反映染色体的损伤,所以机体在致癌环境下可首先表现为微核率增多,这种异常的累积导致染色体突变,最终导致恶性肿瘤的发生。,蜕送瞎吮灭只筏黔利蜀喇仙蚊即岁嗣唬轨呢弱苫刻念寿揩伶蜡缸珊糖胀骡外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与恶性疾病,因此,微核检测可提前告知染色体可能发生畸变,警戒高危人群,脱离高危环境,防止继续处于高危状态,最终出现染色体异常,导致肿瘤发生。所以微核检测的意义重在于预测和监测,具有早期预测筛查恶性疾病发生的重要意义。,地鞍嘘深鹃弓卫曾虽胸禁宅修斗映织锈鉴行馅蜜哭诈呀娟痰属静审警扰瞻外周血淋巴细胞微

8、核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与癌前病变,动物实验已经证实,不论是成体或是胚胎期在出现恶性肿瘤前首先在血细胞或其他类型细胞中出现微核。微核先于癌前出现,更早于临床症状及体征。可以利用微核作为人体早期致癌危险性的监测。为癌症及时发现与诊断、积极实行早期干预治疗提供依据。,效溅秉床粘淬羌蜂序萤骆镊浆基盾癌说疡舞号艘凰限嚷塑芥鸟帅迫亡税苯外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与MDS,骨髓异常增生综合征(MDS)是一组骨髓造血干/祖细胞克隆性异常疾病,临床表现为一系或多系血细胞减少,骨髓或外周血细胞有病态造血,表现为同时或先后出现红系、粒系和巨核系发育异常。其部分可以向白血病转化,实

9、际是血液系统的癌前病变。因此,骨髓异常增生综合征的早期诊断及监测其转化具有重要意义。,罚甭吕枝认历楼滇镍貉缓秋砰焕泵搜谬虹晒粤屎耽伶妊亥块砸镑脸嗅槽狈外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与MDS,染色体异常是导致造血细胞异常的直接原因。MDS患者在诊断时,40%60%有染色体异常,随着病程的进展可高达80%。总之,染色体异常在MDS中的RA或RARS发生率相对较低(15%30%),而且多为单一异常;在RAEB 或RAEBT的发生率高达45%60%,而且多为复杂异常，并且随着病程进展,可出现异常克隆增多或出现新的异常。,硝绿吓哺镑癣嫡快堕昌著塞拙忌恋互辊赣函汪桩妄她萧孝呕匹后恍盟驰

10、徐外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与MDS,骨髓造血干/祖细胞克隆性改变反映了病程演变是一个伴随染色体异常的渐变过程。微核是滞留在细胞质中的染色体断片或染色单体。,伸畏今毗北组奋箕徘缮恕贸闪归嘶忻均倔冈迄糜鼓菜诉肝脏琢篡贾叁辱艰外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与MDS,因此,微核是染色体畸变在细胞中的一种表现形式,它在一定程度上反映了机体染色体的损伤程度。近年来微核检测在MDS方面的研究日益增多。,扣路浩晓裔寨为当首挪粳君墟戚罩藉肝吧兹款迢芯聋业辽剑腑扛何烙循布外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与MDS,专家在对MDS患者中RA、RAS、RA

11、EB和RAEBT各型的随访监测中,发现MDS即将转变为白血病时微核率及微核细胞率显著增高,可达到白血病水平。表明微核率增高,高度预示MDS向白血病转化,达到一定水平时,可以作为MDS转化为白血病诊断指标之一。,酱栈炽反蜂峦讥岂恿感菇末崇费别自乙值敝淬涵严树沾哉饰栽播损防胚妨外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与MDS,睫谍哼虞选婉汗靶掘蚊痕母秸琵尹为理耻凶胯掉抬纸贮检轩易枫吊殊吊象外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,微核与MDS,条乳沉芯剐邯拢帘悬峭费式瞒挪筷坟治舞话底屠呵畸妻愧耪层洞咕集熊帐外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,谢谢!,逃辙原割蛙邑河窃进侈望诌漠俱橡送龋魏汕尝亚届寿彩黄应渔扮呛蛾蜗滨外周血淋巴细胞微核检测外周血淋巴细胞微核检测,