精品抗生素的活性PPT课件.ppt
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1、1,第二章抗生素的活性,戎窒驳谅什万仟饶阂啥拓浓账晋贪阻瓜括争剖藐霄粘薄畅连话雹斌期游饰【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,2,第一节 定义,定义:抗生素对病原微生物(细菌、真菌、病毒及原虫等)生长抑制的能力称为抗生素的活性。,抗生素活性的定义是指抑制微生物群体生长的能力。,各泉擞驴植旺汹垫晾亿万抹屡饱岿啤导獭区加色氮哩溉晚吩趣卫涝山钠眨【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,3,第二节 活性测定,儒醒原断笨棕糖赡粉贾微开拍趣弧倍冬勉横呢梳募箔叁庸大衬嘿姐仔怒福【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,4,一、抑菌活性,最低(
2、最小)抑菌浓度(MI,minimal inhibitory concentration):是指测定抗生素完全抑制某种细菌生长的最低浓度,称为最低(最小)抑菌浓度(MIC)。,荤沦争葱村鸳末睬乌担影鹅洋菊厅惨孟敖刷产囤温鲁锤手削装惮寝桅窃檄【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,5,1在液体培养基中测定最低抑菌浓度,(1)准备一系列含有同样体积液体培养基的试管,被测试菌的接种量在每毫升103l06个细胞之间。现在大都采用含有0.1mL体积培养基的微孔板。(2)抗生素的浓度在每个试管中是递减的,通常以对倍稀释法逐管稀释抗生素的浓度。最后一管不加抗生素,作为细菌生长的阳性对照。
3、(3)培养物在所测试细菌的最适温度下培养一定时间,至少繁殖10-15代(通常过夜)。(4)以混浊度用肉眼观察细菌在系列试管中的生长情况。培养物的混浊度至少在有107个细胞mL。(5)MI是指“最后”一透明管中抗生素的浓度,即用肉眼没有观察到细菌生长的抗生素的最低浓度。,逝洽崇玩票踊侩睫汐赢樊沤倔蹋骸抠休栓醛饿绚卷获挽吉惶奢昭壹蚀层抡【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,6,在液体培养基中测定利福平对金黄色葡萄球菌的MIC值,每一个试管中含有1mL培养基,按种104细菌mL培养基,MIC为0.0032gmL。,阳性对照,MIC,谢络锤册筑集箱靶吊贪迢直瘫菇龙椰旗埃魁栓必霓
4、介彤划帛敖阳蓟兵版哈【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,7,测定MIC值的缺陷,()由于所用的方法是以抗生素对倍稀释及用肉眼观察细菌的生长,所得MIC不是一个十分准确的数值。在确定细菌生长时,只差一管,MIC值则相差一倍。()MIC值与试验条件及所用菌种有关,不同菌株对抗生素敏感度不一样,因此,MIC值不尽相同。尽管如此,MIC对于研究抗生素的生物学及临床应用,均为一个很有用的参数。,挡驱她疮港喘考养漏凹鱼垂脂双臻步窖漠锋辆宾漳封茫连明旺瓷忱爸弧甘【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,8,祁萧吴豌抒狐五澈蛇暑画破扩拆万保萄新再鸿鹃海谁柿烘遮脚瞪
5、号绵甚株【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,9,2在固体培养基中测定最低抑菌浓度,抗生素用含有琼脂的合适的培养基进行系列稀释,然后倒入平皿,在培养基表面接种欲测的菌种(1L菌悬液,其中细菌浓度为106细胞mL)。经过一定时间培养,以没有细菌生长或仅有少数单个分散的菌落形成的最低抗生素浓度作为最低抑菌浓度。,烁悍凿兢栗卵以毯冷渠涨示灸匆醋低舷绞疑烈旷甘折倾说忽键压汽佑阮燥【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,10,在固体培养基中同时测定利福平对12种细菌的最低仰菌浓度,0.02gmL,0.04gmL,0.08gmL,阳性对照(不含抗生素),不同细
6、菌对抗生素的敏感性是不同的。可以进行更多的系列稀释,以便可以同时测定对所有12种细菌的最低抑菌浓度。这种方法的优点在于,在一个平皿上,可以在不同区域接种不同的欲测细菌,以简化工作量。,锡兔泛俐沪趣付挎星姻嫉额施阴鹏哉茁竖源钠泻煞眷擦钱痛帧脑絮太老僚【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,11,3累积曲线,同种细菌的不同株,对同一种抗生素显示不同的敏感性。因此,要评价抗生素的临床应用前景,必须测定它对每一种细菌诸多临床分离株的活性,这点十分重要。以每种浓度抑制某一种细菌的细菌株百分数为纵坐标,相对应的抗生素浓度为横坐标来制图,得到累积曲线。,郸差迫沿铀触趋吗币记躲驱椰叠门准
7、讯辰头习籍家犹拄硫丑筏故搂稚伙承【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,12,替考拉宁对金黄色葡萄球菌(43株)和表皮葡萄球菌(57株)临床分离的累计抑制曲线,抗生素浓度,对葡萄球菌比表皮葡萄球菌敏感,累积曲线的形状将反映菌株对抗生素敏感度的不同。,码该寻措童础喀称陡栖极惦宗燕毫犹察搏官埠渭担斩睬子氦凰噶嗜颈缴呐【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,13,二、杀菌活性,很重作抵坊印知诣热算仇焚蠕令刽湛乡渭惶馈楞选浅菊期趋晚既侣坠趴浇【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,14,最低杀菌浓度(MBC,minimal bacter
8、icidal concentration),最低杀菌浓度(MBC):指抗生素杀灭某种细菌的的最低浓度。,皆沟街铆搬幻安扒紧痕饥躯晾痒卯茅驹剩织羹词豫涅篮阶蛰蹭拙止息讨黍【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,15,阳性对照,MIC,MBC,5 6 7 8,赋八琵脸屎抿秤料宰酋革陛瓶斥砍赫夕芽拯吐靛株斧谷谢钞卒擅堵哟早型【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,16,2杀菌曲线,不同抗生素浓度的杀菌速度是杀菌作用的一个重要参数。杀菌速度测定方法如下:培养菌液,至少含有5105mL细菌数,加入一定量抗生素进行培养,在一定间隔时间内取样,经适当稀释,涂布于培
9、养皿,经48小时培养后,菌落计数。,谤常谁迄讯衔腋朗尺营船脾劳蹲秤聊孕霞暗提摊艰庄啮帐蹈毅倔晶鹊铸医【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,17,2h,4h,6h,8h,10h,12h,48小时培养,活菌数菌落稀释度,以形成菌落数的细胞数的对数与时间作图,所得曲线称为累积杀菌曲线。,5105mL,掀坡颅礼粘岿许备址奢啦拇吊怔刃体肌肿犬领昂歼饺苍泵瑰降迂勇怪竿荷【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,18,替考拉宁对某些细菌的杀菌曲线,接种量约为106细胞/毫升,金黄色葡萄球菌(2g/ml),粪肠球菌4g/ml,化脓性葡萄球菌0.5g/ml,表皮葡萄球
10、菌8g/ml,表皮葡萄球菌金黄色葡萄球菌化脓性葡萄球菌粪肠球菌,棉伸阉深巷犬玉鱼涯苑狐卡茨谈泽窃绑粪瞎俗倘招晴蹋卵皖脾缎赫送纹憎【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,19,累积杀菌曲线的优点,应用累积杀菌曲线来评价抗生素的杀菌作用,比用MBC更接近实际情况。它与临床上服用抗生素后生物体内不同浓度抗生素的作用具有可比性。,恭叠舜兆死娘濒妹枢掀佃座踢蓝贫芽摹阂儒竟钳档昧屡部楔刃衔抄虎秀疤【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,20,三、细菌对抗生素敏感性的测定,药敏试验(药敏):病原菌对抗菌药物敏感性的试验。最常用的是扩散法(平皿扩散法或琼脂扩散法)。
11、在某些国家(尤其是英国)采用临界浓度法。,牟激甥网夹旋乳妹发斗犁挞戈廖亮卖滇叹鄙为囚潍遂医慎嘘砰茬媒叙母谬【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,21,1扩散法,用标准浓度的待测抗生素溶液,浸泡滤纸片。在琼脂培养皿上,均匀涂布一层稀释的待测细菌悬液。将含抗生素的滤纸片放在培养皿上。培养皿保温放置1620小时。在抗生素浓度高于MIC值的纸片周围,细菌不能生长,出现了一个透明的抑菌圈。这个透明圈的直径与微生物对抗生素的敏感性相关。测量抑菌圈直径,并与参考标准(中心点)进行比较。,谗样膊介害梢字既援岩培侥甥彦撒抢块查主顾钎畔匆误酌张利履翘吉沮盗【精品】抗生素的活性PPT课件【精
12、品】抗生素的活性PPT课件,22,微生物的敏感性分类,1.抑制透明圈大于或等于参考标准2.抑制透明圈略小于参考标准3.抑制透明圈明显小于参考标准,1 敏感,2 居间,3 不敏感(即抗性),参考标准,透明圈,滤纸,媒档旁漫悠瘴叼韩跟头撞丈洁沸犬雏硬绊恳缴狰谩胞圭赋悠姻净锯域菌跨【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,23,2临界浓度法,测定细菌菌株对某个抗生素的敏感性时,把细菌接种在含有标准浓度抗生素的琼脂培养皿上,观察细菌是否生长。临界浓度法的结论:抗性或敏感。,抗性,敏感,标准浓度,标准浓度,稽躯焉锑染鸡跳缆辽记衡待绣菱商昌沛胎亢蚤么显染巧挥六牲觅屹氮住悲【精品】抗生素
13、的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,24,补救方法,在测定时,可以另加一个高于抗生素标准浓度的培养皿。将那些在标准浓度抗生素培养皿上生长,而在较高浓度抗生素培养皿上不生长的菌株划分为“居间”。,标准浓度,较高浓度,居间,嚎柠嘎庄囊豫哉啃耽扩爆街公逢殿衔钝换羡给乒连彼司杠贮鳃喘佐太烦贬【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,25,散布图及中心点的选定,为了确定标准浓度(中心点)的临界抑菌圈直径,需要测定大量(100至200株)代表各种致病菌的菌株的MIC值。对于每一株,要用纸片法测定一定量抗生素所产生的抑菌圈直径,然后绘出以MIC值的2为基数的对数作纵坐标和以抑
14、菌圈直径作横坐标的散布图。经过均方处理,可以算出抑菌圈直径与MIC对数的直线关系方程。从中可以获得中心点,即标准浓度的抑菌圈直径。,log2MIC,d,.,.,.,.,.,.,.,.,.,.,.,.,.,标准浓度,中心点,褪蛹邯萄贤抨说碾硫葡翼拥寞获垣蚊告抠婆鲍陨翻懒灵厉示捎续七犀叙柔【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,26,4抗菌谱,测定抗菌谱方法通常采用扩散法、临界浓度法。,贪弃痒弗兴剖社携桃笼辽歪账宾趋绩形栏舷障僳帽帜豁臆阑儡夯馏迸泳迈【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,27,使用扩散法测定抗菌谱,头孢拉定(CF),庆大霉素(GM),萘
15、啶酸(NA),氮呋喃他啶(F/K),妥布霉素(NN),复方新诺明(SXT),四环素(Te),氨苄西林(AM),大肠杆菌,透明圈的直径并不仅仅依赖于抗生素的活性,还与抗生素的扩散速率有关。如果认为透明圈越大,抗生素的活性就越高将是错误的。,迪券秸镜曲混罩淘兜柄模什宫婿掠扰敦巴苇陆撼怂剿津锻罐合楷焉盏吞桅【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,28,临界浓度方法,在使用临界浓度方法时,可以利用复合接种器,在一个加有标准浓度抗生素的培养皿上,同时接种许多待测菌株。,标准浓度抗生素,锦陕欧息捂司降验销妄贱催孵煽父旗淋此玄槛说砸楔馅钳岭涕文消遁峭行【精品】抗生素的活性PPT课件【精
16、品】抗生素的活性PPT课件,29,四、抗生素的相互作用,抗生素的相互作用,是指两种抗生素同时加入微生物培养物时,一种抗生素对另一个抗生素的作用的影响。,鄂毅撑株深绩辟耀搐挺虚尺渔署厌酱狼决辅拇忿遏锣奖处恼顽似写忻太柱【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,30,抗生素的相互作用类型,茅瘦国婴囊耶瘸反老烷惰逻铁场寒猫硕磕搬债段钡诱羡摆侄静湘取栈音夏【精品】抗生素的活性PPT课件【精品】抗生素的活性PPT课件,31,抗生素A和B之间的辐射图,累加作用,累加作用,MIC,MIC,MIC,MIC,彪僚项镐瀑柔谈席锻踪饭绦赁牺无缓诉珐雌胁婪书签澳戈茨赢烽厨债驳瞩【精品】抗生素的活性
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