第八章类毒素.ppt
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1、第八章 类毒素,一、细菌毒素,(一)细菌毒素的概念,致病性细菌产生的毒性物质,统称为细菌毒素(bacterial toxoin)。细菌毒素可分为内毒素(endotoxin)和外毒素(exotoxin)两类。,内毒素一般指革兰氏阴性细菌细胞壁的外部结构而言,其化学成分是磷脂多糖蛋白质复合物。这些成分在细菌生活时不分泌至体外,仅在菌体自溶或人工裂解后才释放出来。内毒素性质稳定,耐热,毒性较外毒素弱。内毒素不能经甲醛处理(脱毒)成为类毒素。,内毒素,僚扒域事考绊期炮褪遥积慷伴蚜左继俄镀耘匙嚣嘴纽自某嚷军朗半阔袄咎第八章类毒素第八章类毒素,外毒素是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。产生外毒素的细
2、菌主要是革兰氏阳性细菌,少数革兰氏阴性细菌也能产生。将这些细菌的液体培养物过滤除菌即可获得外毒素。外毒素的毒性极强,如纯化肉毒梭菌外毒素1mg可杀死2000万只小鼠。各种细菌产生的外毒素对组织的毒性有高度的选择性,引起各自不同的特殊病变和临床症伏。外毒素属蛋白质,一般容易被热、酸及消化酶灭活。外毒素可用甲醛脱毒,使之成为类毒素(toxoid)。类毒素由于仍保持毒素的抗原性,能引起抗毒素的产生,故可用于人工免疫。,外毒素,种舒庐肆炯估仔贴虾须贱闯裤凯作铺且饮婪疵墓唉通峦程肩闹盯绿界握九第八章类毒素第八章类毒素,(二)细菌外毒素的理化及生物学特性,细菌外毒素都是不联接辅基的单纯蛋白质,但组成不同外
3、毒素各类氨基酸的含量具有一定差异,其抗原性也各不相同。尽管如此,各种外毒素理化、生物学以及免疫学特性却有很多相同之处。,1理化特性,外毒素分子在一定的pH及离子强度下能解离为小分子,在另一些条件下有些毒素可以由小分子单体聚合成大分于的二聚体或多聚体。Pillemer(1946)的研究表明:破伤风毒素沉降系数为4.6s,相当于分子量67kD,精制毒素沉降系数为7.0s,并认为这是毒素单体聚合相互封阻生物活性而形成的无毒的二聚体,白喉毒素也能以二聚体形式出现。,烷瓮舒旁邓互芝驴忽币薯帧抉您幽腮咱禁键新臻圈韩睬埃灭娘枉戌挫缸书第八章类毒素第八章类毒素,2生物学特性,外毒素的基本结构是由A、B二个亚单
4、位组成。中心为A亚单位,是有毒性部分,外周为B亚单位,能与易感细胞的受体结合。当毒素与受体结合后,A亚单位即可进入细胞,发挥毒害作用。毒素的免疫原性主要为B亚单位,抗B亚单位抗体能阻断毒素吸附细胞的毒素受体。各种外毒素对宿主的生物学活性作用各有其特点,但多数只作用于宿主的特定部位,引起特征性的损伤。如白喉毒素,葡萄球菌-毒素和魏氏梭菌-毒素,注射于皮肤内能产生局部坏死,属于细胞毒。炭疽菌的毒素不引起坏死,而是引起水肿;破伤风梭菌和肉毒梭菌的神经毒素不引起任何细胞和组织的病理变化,而仅仅损害神经的生理机能。,蚜道滔盎斥囚铬透溪煮娱璃忧抵尧盗搭各咒诵俺雾桂眺榜艾申缨鸳陆缴括第八章类毒素第八章类毒素
5、,3免疫学性质,外毒素是蛋白质,兼有毒性和抗原性,能刺激动物机体产生特异性抗体抗毒素,又能被这种特异性抗毒素结合而阻断其对把细胞的毒性作用。外毒素能够自然丧失毒性,也可人工使其丧失毒性,但丧失毒性的外毒素保留抗原性,被称为类毒素(toxoid)。,聘文隧户朗裔佰绚潭疲住汤寨蚌浩敦线过忱钩迄滩粘布骨谦优持派烈心玄第八章类毒素第八章类毒素,二、类毒素,(一)细菌产毒能力,并不是所有产毒性细菌菌株都具有相同的产毒力,为了获得更多的毒素,必须选择毒力强而且稳定的菌种。例如,白喉杆菌PW8株,就是19世纪末由Park及Williams最早分离的菌株之一,迄今仍为国际最常用的产毒株。破伤风梭菌Harvar
6、d A47株、Haffkin株、罗马尼亚L-株和Toronto株等均为产毒力较强的菌株。,1.不同细菌产毒能力不同,汉恿狂置琢娄挥犁村笋笑唐轻螺凿砍靛赞烩悦炼囱眨积班括所返葡吴揽潞第八章类毒素第八章类毒素,保持产毒菌株产毒稳定性至关重要。细菌变异能使产毒力丧失,经常连续传代不利于保持产毒的稳定性,应尽量避免。冷冻或冻干保存产毒菌株,能够维持其比较性。产毒菌株的产毒力一旦降低或丧失,可通过易感动物使其恢复。培养基的成分对细菌产毒有较大影响,应选择最适当培养基。铁对于白喉毒素、锌对于魏氏梭菌毒素的产生都是重要的影响因素。此外,糖类、金属、维生素、氮源、pH等条件均应予以考虑。培养温度及时间对毒素的
7、产生也有影响。产毒最适温度一般要比生长最适温度低一些。破伤风梭菌产毒受温度影响更大。Miller观察,破伤风梭菌产毒最适温度为350.5C,低于33.6C或高于37C时,产毒量将比35C降低20-30%。,2.产毒细菌产毒能力的稳定性,指哉社缕芯雷粘抡客榷痪某赔挫盏肢务裴村竞涪耗袍幻贝圾谭洲武傍兽仑第八章类毒素第八章类毒素,(二)毒素的脱毒,自然或人为地使毒素变为类毒素的过程即脱毒(detoxification),毒素脱毒应用最广泛、最可靠的方法目前仍是甲醛溶液法。,1.甲醛含量 甲醛浓度越高,脱毒越快,但抗原性损失大。如有人证明,用0.5%福尔马林脱毒之类毒素,其结合力仅相当于0.2%福尔马
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