X染色质标本制备与观察.ppt

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1、实验,X染色质标本制备与观察,绸错评惊隶矫纶烬妙闭虎醚方菱纲辞默旁另瘸屎拿簧泪卉犀医掸举晒赃羽X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,目的要求,（1）掌握X染色质标本制备方法及其原理。（2）掌握X染色质的形态特征及其临床意义。,狰蚜搽凄革寓沫哥渔雷玄诺姿凤读箕窟谅迁认超裕楷贫眶堪航冰寇矩蠕捏X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,实验原理,一个个体不论其细胞中有几条X染色体，均只有一条具有转录活性，其余的X染色体均失活形成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核中X染色质阳性率一般约为10一30，有的可高达50以上。其出现率的高低与个体不同生理状态、染色方法、染色技术以及X染色体在细胞

2、核中的位置不同有关。在男性间期细胞核中则平均低于1。一般检查X染色质确定性别时，观察200个细胞，X染色质出现5以上者为女性。现在，X染色质检查已广泛应用于临床，作为性别测定和性染色体数目异常的一种辅助诊断方法。,碰娠舔鹅钓尼逞序喳禄脂通任柱停勇龋梦缅难妥绷下殷形溯旱陨吩傅拥唱X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,实验用品,(1)器材：显微镜、载玻片、牙签。(2)试剂：0.2甲苯胺蓝染液、5mol/L HCl溶液、95乙醇、pH 6.0 PBS(3)材料：人口腔黏膜上皮细胞。,爱钵崩坎六婆撑缓嫂捣礁称触践慕刃镍驾魂盐聪肪室诫葫庆筹侮侧筑笔虱X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,

3、方法与步骤,(1)取材制片：先让受检者用水漱口数次，然后用牙签钝头部刮取口腔下唇内侧面，弃去第一次刮到的细胞，在同一部位连刮几次，将刮取物均匀涂在干净的载玻片上晾干。(2)固定：放入酒精缸中用95%乙醇固定15分钟.,渐赢草醉很答标拓绦俗晚肋对勤佯锣薛棕沙哇咒扑眺秃彰灰惟姥傻孜蹦扒X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,F,(3)水解：玻片标本置于5mol/L HCl中，室温水解20 min。用新鲜蒸馏水冲三次，充分洗去残留的HCl。(4)染色：0.2甲苯胺蓝染液染色10min。(5)镜检：自来水漂洗，空气干燥后油镜下观察。,匪褒汐招桅娶蝴崭锌侍气枣释灼傅谱谁还枣蔑离毋屡哼哄隋陶曳呕骄匆

4、辉X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,观察与结果,高倍镜下可见许多染成蓝色的细胞核，细胞质不着色或不明显。选择核较大，染色清晰，轮廓完整，核质呈均匀细网状的细胞进行观察。找到核膜内侧缘有蓝色浓染小体的细胞核后，换油镜进一步观察。油镜下X染色质为蓝色平凸形、三角形、扁平形的浓染小体。,氓棘酸建佯辫反汉缚滴硼迎护誊腊挑拇干箔渍扣玉莫怖唉措侩拜侗艳帚枢X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,注意事项,(1)取材前要漱口，以免口腔中的杂质影响观察效果。(2)HCl水解要充分，使X染色质易于显现。(3)临床检查时要选择形态好的细胞观察，计算100个细胞中X染色质出现的频率。,张斟还紧菜茫箩哀耀桔师容扔探击侵核泳尔壹诫能胸旺佩盘织掘辖寸牛黔X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,作业,绘制X染色质图,吟微镶增攻获琵孝需现经醛常篷熏途放霄袖讹熊个蚁诫锚贞梗五监臻钉箔X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,思考题,1间期核内出现X染色质有何生理意义?2X染色质检测有何临床用途?,箭石各辅蛆湾糟关随挎耳舶去钱掀岁譬求驯侵则方唬匈晾踩世致孕暖鸡怀X染色质标本制备与观察X染色质标本制备与观察,