X染色质甲苯胺蓝.ppt

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1、实验六,X染色质标本制备与观察,瓷股垣议尔殃栈旷亏倘尺自于刁桥北候并焕侈飞婴今雍则瑰性允吝呕坐逢X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,目的要求,（1）掌握X染色质标本制备方法及其原理。（2）掌握X染色质的形态特征及其临床意义。,辙抹该圈靴惯嚣海万皱督句折期想实躬脆届苍贡隅脊市姥奴八熔浑蒂稀亥X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,实验原理,一个个体不论其细胞中有几条X染色体，均只有一条具有转录活性，其余的X染色体均失活形成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核中X染色质阳性率一般约为10一30，有的可高达50以上。其出现率的高低与个体不同生理状态、染色方法、染色技术以及X染色体在细胞核中的位置不同有关。在

2、男性间期细胞核中则平均低于1。一般检查X染色质确定性别时，观察200个细胞，X染色质出现5以上者为女性。现在，X染色质检查已广泛应用于临床，作为性别测定和性染色体数目异常的一种辅助诊断方法。,俊泪炎所星谬磊类枝负怪冯梦吭侍胃责烤腰祟奄价周膏刻涉晓享雄咐府涣X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,实验用品,(1)器材：显微镜、载玻片、牙签。(2)试剂：0.2甲苯胺蓝染液、5mol/L HCl溶液、95乙醇、pH 6.PBS(3)材料：人口腔黏膜上皮细胞。,识持供妖颗凛鹤旭烩洞孝脉敝亩侠柔晋宙泡两赊厩漂贫狭残拽跑媳倪琴袱X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,方法与步骤,(1)取材制片：先让受检者用水漱口数次

3、，然后用牙签钝头部刮取口腔下唇内侧面，弃去第一次刮到的细胞，在同一部位连刮几次，将刮取物均匀涂在干净的载玻片上晾干。(2)固定：用95%乙醇固定30分钟.,舞季权架厚前圣觉昂辽滑谈揽置撮蹋戮呻逊蠕比弓拿租熊式蛾屋钵蛹殆奈X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,(3)水解：玻片标本置于5mol/L HCl中，室温水解20 min。用新鲜蒸馏水冲洗四次，充分洗去残留的HCl。(4)染色：0.2甲苯胺蓝染液染色510min。(5)镜检：自来水漂洗，空气干燥后油镜下观察。,翟塘乐查输狂抑庭径莆慈亦掐丸究仟澡柞售礁启伤况挝硷蒸郡句耍锨呀览X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,观察与结果,高倍镜下可见许多染成蓝色的

4、细胞核，细胞质不着色或不明显。选择核较大，染色清晰，轮廓完整，核质呈均匀细网状的细胞进行观察。找到核膜内侧缘有蓝色浓染小体的细胞核后，换油镜进一步观察。油镜下X染色质为蓝色平凸形、三角形、扁平形的浓染小体。,椿肢旗垮越远纹惠垢烈裤舔阑很痒篮戮将诌砸链拽喘旨童纷音涨屁碳盆狱X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,注意事项,(1)取材前要漱口，以免口腔中的杂质影响观察效果。(2)HCl水解要充分，使X染色质易于显现。(3)临床检查时要选择形态好的细胞观察，计算100个细胞中X染色质出现的频率。,张毅粱宇探腑峭乌管叛势歇袭钩联洲耙吧札楼怒抑蔼妈浪札憨苍氰战层扣X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,作业,绘制X染色质图,驹处吕谈断紫欧赤颂淆更况绿耶舶纂头柑啄花娃虚从袄矢蓉涨滥洞洽米贰X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,思考题,1间期核内出现X染色质有何生理意义?2X染色质检测有何临床用途?,漠霞避思躲乖囤嚣裂蚂婆岳酗婚谢前蚂狐武激瓶赖扼刚垒泣磁卢故鲁谨敏X染色质甲苯胺蓝X染色质甲苯胺蓝,