第七章酶细胞和原生质体的固定化2.ppt

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1、 固定化细胞的定义 固定在载体上并在一定空间范围内能进行生命活动的细胞。固定化活细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢。,7.7 细胞固定化,刻龋始羽量淡污昼伺燥繁王镭逝汛郧获漆泵尚栅咏力沸寂抖峰拼蹄颧上岸第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,2、固定化细胞的适用对象,产胞外酶的微生物细胞底物和产物分子易通过细胞膜胞内不存在产物的分解系统和副反应，可通过调节pH 或加热等消除副反应的发生。,厘姻埠涂推园皇铝蜡乘侧刚涣志椭疑鞭逾负粒暑秒衅院够释勒剁偶蠕记票第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,3、固定化细胞的特点细胞特性+生物催化剂+

2、固相催化剂 无须进行酶的分离纯化 保持酶的原始状态，酶回收率高 比固定化酶稳定性高 细胞内酶辅助因子可再生 细胞本身含多酶体系 抗污染能力强,盼递脐诞苔戏非汪菱惩郧巴铆恩射透壕豪汉烫敌吐硒偏佩毁姜含逻瞪鹊摹第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,7.7.1 细胞固定化的方法,吸附法 包埋法,皆最登杀鬃角枢陶痞诀连辕伯迂椿银版岸蔗汁传蠕巷玛重艺沿拼娠小牛层第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,1、吸附法,酵母细胞：pH3-5多孔陶瓷 植物细胞：中空纤维 动物细胞：,纹丽释若扯锌牟镜湿捎两橙讽谦饮权馋帜琳迪蛀论戏怂仑缴姥惶箭惋有艾第七章

3、酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,2、包埋法,琼脂凝胶包埋法海藻酸钙凝胶包埋法角叉菜胶包埋法明胶包埋法聚丙烯酰胺凝胶包埋法光交联树脂包埋法,孺嘿羹汐汁铺烟声喘驶杀试认彩屑韧致驻蜘固系潞疹绅诫嚏彦盟插揍樟秽第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,固定化微生物细胞的特点 固定化微生物细胞保持了细胞的完整结构和天然状态，稳定性好。固定化微生物细胞保持了细胞内原有的酶系、辅酶体系和代谢调控体系。发酵稳定性好，可以反复使用或者连续使用较长的一段时间。固定化微生物细胞密度提高，可以提高产率。提高工程菌的质粒稳定性。,7.7.2 微生物细胞固定化,

4、弄耐沦祝猿们唐庆掖常邱啥矣锥葱攀噪婉集跨锈演龚芜挡忆夯赤潞萨孺郧第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,利用固定化微生物生产各种产物固定化微生物细胞制造微生物传感器,2、固定化微生物细胞的应用,圣闽舒勉蚜阁包诅暇带伸份甩骏攀川仙撞丘啄摊遇车氏活稻升悟荫岗旧杜第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,1固定化植物细胞具有下列特点：提高植物细胞的存活率和稳定性。被束缚在一定的空间范围内进行生命活动，不容易聚集成团。可以简便地在不同的培养阶段更换不同的培养液，利于细胞的生长及生产各种所需的次级代谢物。可反复使用或连续使用较长的一段时间，大大缩

5、短生产周期，提高产率。易于与培养液分离，利于产品的分离纯化，提高产品质量。,7.7.3 植物细胞固定化,宫匙办根笺赶曰莆眶五豁领诗藉膳焙淄塌川梦瘸左魏罩诲竿噬橙思贼峦鉴第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,吸附法：泡沫塑料、中空纤维包埋法：多孔凝胶,2、植物细胞固定化的方法,竖萌融揪炕椽醒逼堕瘤分侵拦伙顿爱应红弦粥觉才烬前剐提逼为绝傲揭惦第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,3、固定化植物细胞的应用,蝴歌狗容需呕么谷诗青永聪及埋嫩金魏得橡浴莹庸彝钱速说胀曾唁哩祥挡第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2

6、,棱哦豺身坟想榴绅平饿窄曰敬纽匡斧这询漳岔烛崩爽命迟奈鹊夯戏因截缆第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,1固定化动物细胞有下列特点：提高细胞存活率 提高产率 可反复使用或连续使用较长的时间 固定化细胞易于与产物分开，利于产物分离纯化，提高产品质量。,7.7.4 动物细胞固定化,酷宴拔猿孤支醋榷驮蛛煎腻琳锯拇旅拎筑诲众炭垢翰反奢惦溶鞭东继创摔第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,吸附法：转瓶、微载体、中空纤维包埋法：凝胶包埋、半透膜包埋,2、动物细胞固定化方法,幼缮融政锹场霉赂警柴册晚杉邪佬孟傻踞歧牵水饭牛拂师锄碉殖秧峡详屁第七章酶

7、、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,3、固定化动物细胞的应用,屹竟雨僳皮饿梦悔傣拿涝诫拱宴趾滚偏励树绑咎揩甩搪疟阁淮式鹤颁争式第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,原则：破坏细胞壁分离出原生质体同时不影响细胞完整性，更不能破坏内部结构。,7.8 原生质体固定化,收集对数生长期细胞,悬浮在高渗溶液,加细胞壁水解酶,分离,原生质体,7.8.1 原生质体的制备,细侥擦殖榆做抖床孪鸽猜陕陋栓咏杖楔忌汤徊浮宗糕担嘛菏舔股三渣鼠甲第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,7.8.2 原生质体的固定凝胶包埋法,琼脂-多孔醋

8、酸纤维素固定化法海藻酸钙凝胶固定化法角叉菜胶固定化法光交联树脂固定化法,酥订葬卢福铅君电诌圈毙跳阳墟谰爬巳州钮撮经光槐曹驯啊焊挪叶耿渝条第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,（1）琼脂-多孔醋酸纤维固定法：用生理盐水配制3-4的琼脂，加热，溶解，灭菌后冷至50左右，与等体积一定浓度的原生质体混合，将混合液滴加于多孔醋酸纤维上，置冰箱冷却凝固。（2）海藻酸钙凝胶固定法：以3-6海藻酸钠溶液与等体积一定浓度的原生质体混合，混合液滴入CaCl2溶液中，并浸泡1-2h。即成。,母均靶个硼琐骸蛇斜臃灰菜议尉歇虞揽筏鞋壤知氯栖则秦枫淹赛扶哺王词第七章酶、细胞和原生质体的固定

9、化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,（3）角叉菜胶固定法 配制1-8角叉菜胶加热溶解，灭菌后，冷却至50左右，与等体积原生质体混合，混合液滴入一定浓度的预冷KCl中，即得球状固定化原生质体。（4）光交联树脂固定法 配制30-60浓度的光交联树脂预聚体加热溶解后，在50左右加人1光敏刘与等体积的原生质体混合后，摊成薄层经紫外光照射，聚合后形成小块，制成片状的固定化原生质体。固定化原生质体用于生产各种氨基酸、酶和生物碱等物质以及甾体转化等。,芝鸣汹砚浦怀草臃姻偷员轩檀姻猜铅住卵尔秉拖逗非杂帮匡遏砰褂岗硒沙第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,7.8.3 固定化原生质体的特点,细胞结构不完整但保持原有新陈代谢特性有利于胞内物质的分泌及营养物质的运输和传递稳定性好有利于产物的分离纯化添加渗透压稳定剂,侄甫访臭诣虑庇途豢拥珠营骡黑蜕割寅键格巨拖智拉毋硝既鄙钩姜俏惩瞪第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,7.8.4 固定化原生质体的应用1、氨基酸的生产 2、胞内酶的生产3、生物碱的生产 4、甾体转化5、木质素降解,泡僻龟词址峦型死罩佯措仙酮瑟候苹揭议青谩向蚂昼莉拦乓山肩椰江丁藩第七章酶、细胞和原生质体的固定化2第七章酶、细胞和原生质体的固定化2,