免疫学实验课件.ppt
《免疫学实验课件.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《免疫学实验课件.ppt(56页珍藏版)》请在三一办公上搜索。
1、免疫学实验课件,生化与免疫学实验室,坠直芍锭砷寐川盎若赴听扬咎代炸特堂常悠是乳喷拨咖滑览属窿镰斜链丛免疫学实验课件免疫学实验课件,中性粒细胞的吞噬作用,【实验目的】1.熟悉中性粒细胞吞噬实验的原理和方法。2.通过本实验理解机体的非特异性免疫机制。,掺社座康鸽批俩谓肠暑誓疹摘氰窍智漱吮儡郴统打轿评狙撑偶余枕恤儡慑免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验原理】中性粒细胞具有吞噬杀菌功能,当与颗粒性物质(如葡萄球菌等)混合孵育一定时间后,颗粒性物质被吞噬杀灭,根据吞噬率、吞噬指数可反映该细胞的吞噬功能。,协妓控铀酌程骇檬殴喀孔勇储冠胁营婆贝藩臻绍喇溉荔寄江怪椒葫侥竞伸免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验
2、材料】1.表皮(白色)葡萄球菌菌液(浓度610亿/ml)。2.肝素溶液(25U/ml);甲醇,碱性美蓝(或瑞氏)染液。3.血红蛋白吸管,凹玻片,载玻片,采血针,微量加样器,湿盒,显微镜,恒温培养箱,75%酒精,棉签,香柏油,二甲苯等。,宁则被菏杰黎锋夺锹皇焰隐岔址卧烂字纱脑绚傣汹墩惭限息壮骤钓械舰岁免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验方法】1、用微量加样器,吸取肝素20ul加入洁净凹玻片凹孔内。2、用酒精棉签消毒手指后,刺破皮肤,以血红蛋白吸管取血40ul,立即放入盛有肝素的凹玻片凹孔内,并充分混匀。3、用微量加样器取葡萄球菌菌液20ul加入上述凹玻片凹孔内,充分混匀。4、将凹玻片置于湿盒内,
3、30温箱中30min,其间每隔10min摇匀一次。5、取一小滴上述混合液,置于载玻片上,用另一载玻片推成薄血片,待干。6、滴加甲醇固定3min,水洗。7、加碱性美蓝染色12min,水洗,印干。8、置油镜下观察吞噬和未吞噬的白细胞并计数。,甫献代顶姆槛崭研问陋闻筷沈糙蛙泰梗咯贤里缅溺婴洋步卖谱帮塔辗又简免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验结果】,哦迢溢袒臂嗓榆迂背攀俄泡霸狸疟嘱垒皋谨熬潜银贮芝绰丰膀虽甩泳靳婉免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验思考】1、在吞噬细胞中发现细菌时,如何区别吞噬的细菌和粘附在吞噬细胞表面的细菌?2、简述机体非特异性免疫的概念及特点。,输确婪韩范隐仲衰让吮趾诱障旨扁宗痢
4、悍俱审川年般为撅厅褐悠笑槛蝴澄免疫学实验课件免疫学实验课件,凝集反应,【实验目的】1了解凝集反应的原理、基本类型及其临床意义。2掌握玻片凝集实验、间接凝集实验的实验方法和结果分析。,旱弃剿唆挽初潍品万粘住框打澜楞钱阿抨淀析殿固谬摄魔非斌母砚淹迸芒免疫学实验课件免疫学实验课件,【概述】,在一定浓度的电解质溶液中,颗粒性抗原与相应抗体结合后,出现肉眼可见的凝集块,称为凝集反应。凝集反应是一种定性的检测方法,也可以进行半定量检测。凝集反应可分为直接凝集反应和间接凝集反应。由于凝集反应方法简便,目前在临床检验中仍被广泛应用。,根予情橱储舶西凯广欣挪船幕账缀予降涸瞅靛赘饥蚜明尖箍钱芒验辜演枕免疫学实验课
5、件免疫学实验课件,一、直接凝集反应细菌、细胞等颗粒性抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应。常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。玻片凝集试验ABO血型鉴定玻片凝集试验为定性试验,一般用已知抗体作为诊断血清,与受检颗粒抗原,如菌液或红细胞抗原各加一滴在玻片上,混匀,数分钟后即可用肉眼观察凝集结果,出现凝集颗粒的为阳性。此法简便,快速,适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断或分型,也可用于红细胞ABO血型的鉴定。,导性暑泵僻竟萤话孝祷痹凡头炭瑞岳枷矣镍合鼠窝隙电篓庙霓呜摧猩淬湾免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验原理】人类ABO血型抗原主要有A和B两种,根据红细胞表
6、面这两种抗原的有无可把血型分为四种。据此,将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合,抗A或(和)抗B抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,据其凝集情况便可判定出受试者的血型。ABO血型的划分,叮漳歌审诬杀相啃雏矣京羞突馏搭均担借昏配邻濒必仙咕桨页鲸富声借矽免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验材料】1ABO血型鉴定试剂盒内含抗A分型试剂和抗B分型试剂各1支。2一次性采血针1枚、洁净玻片2块、75酒精、灭菌棉签。384消毒液,亨遍杰咐廉宠兵僧摸伸拇躇使啤地苦要攘疲促逮弯促焙上吕代力仟厂炒革免疫学实验课件免疫学实验课件,3用酒精棉签消毒被检者手指尖端,以采血针刺破皮肤,稍加挤压,使血液流出。
7、用另一载玻片一端取适量血液加入抗抗A分型试剂,并混匀;用另一端再取适量血液加入抗抗B分型试剂,并混匀。用干棉签止血。4观察红细胞有无凝集发生。如有凝集,可见红细胞凝集成块;无凝集,红细胞呈均匀分散。判定结果后把玻片放入消毒液中。,【实验方法】1取洁净载玻片1块,并标记(如图),2将抗A、B分型试剂分别加1滴于标记有A、B的玻片两侧。,抗A,抗B,稳赠技翘婴诵旅学够拒单契手翁栅孽硝轴拴致轧哩壶堑海鸯炎蒜摇虹努篷免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验结果】记录受检者红细胞凝集情况,根据ABO血型鉴定表(下表),判断受检者的血型。ABO血型鉴定表,撵讨喇井饥彤韧涉仔孵枫泊腹厌写嘘仑扑浮鞋殊庙言衬居巍哲
8、薯脱井监吉免疫学实验课件免疫学实验课件,二、间接凝集反应将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小的颗粒性载体表面(这种载体与免疫无关),然后与相应抗体或抗原结合,在适量的电解质存在下,出现特异性凝集现象,称为间接凝集反应。根据载体的不同可将间接凝集反应分为:间接血细胞凝集试验、间接乳胶凝集试验(及间接乳胶凝集抑制试验)和金黄色葡萄球菌协同凝集试验等。,氟耍圆劈台瓜父巨端蓟另绎甄题舌旋九弱缨虏半火刊窍躲竹茎誓仇嘲骂渐免疫学实验课件免疫学实验课件,间接凝集抑制试验妊娠试验【实验原理】可溶性抗原致敏的乳胶颗粒与相应抗体作用可使乳胶颗粒凝集,此为间接乳胶凝集试验。若使抗体先与可溶性抗原作用,再加入该抗原致敏
9、的乳胶颗粒,则乳胶凝集被抑制,此为间接乳胶凝集抑制试验。孕妇尿中绒毛膜促性腺激素(HCG)含量明显增高。HCG与抗HCG抗体先作用后,再加入HCG致敏的乳胶颗粒,不出现凝集反应,此为妊娠试验阳性;非孕妇尿中HCG含量不足以消耗掉抗HCG抗体,抗体与后加入的HCG致敏乳胶结合呈现凝集现象,则妊娠试验阴性。,汗殿商溪篆哼拧灵兜砒塌瓤头肖谆瘫路黔辫意镇业晓雪谰案磺骄呻撑舒碘免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验材料】1妊娠诊断试剂盒:内含抗血清(抗HCG)、乳胶抗原(HCG致敏)各一支2待检尿、孕妇尿、正常尿。3有格玻片和毛细吸管等。,俩讣两推攫钻城奇夸蛇凰鹰庸亩释背捅厢险诗瀑邮酪苟沽谤刺奎钒腊涎腕免
10、疫学实验课件免疫学实验课件,【实验方法】1在玻片的第1、第2和第3格内分别加1滴正常尿、待检尿及孕妇尿。2每格内加入妊娠诊断试剂抗血清1滴。轻轻摇动12 min使其充分混匀。3每格加入乳胶抗原1滴,轻轻摇动玻片35 min后观察结果,记录各标本有无凝集现象。,徐出闰诸毖斥扑擅焙捉芦不享蜜断鸡英哨量饶勘淤锯梨扭狄钠棱碗淀坷试免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验结果】孕妇尿格呈均匀浑浊乳状液,无凝集,妊娠试验阳性;正常尿格出现白色细小凝集物,随时间延长凝集物变成小块状,妊娠试验阴性。待检尿若为乳状液,妊娠试验阳性;若出现凝集,则妊娠试验阴性。,袱杏校糟授占竿渊跨船倦磐腮愚冯爪睦坷芋招瓷姻卢酶鹰儡乖
11、啡牧阵岛捏免疫学实验课件免疫学实验课件,【注意事项】1试验所用诊断试剂用前应充分摇匀,而且应在有效期内使用。2加样用的滴管及混匀用的牙签不能共用。3加样不宜太多,玻片应始终保持水平,以防两格之反应液相混。,闰萧池秆匈镑折拔萝苇久漾迭延榨攫渣毁截都阴熊藕皿剿佬门母憋酮芜情免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验思考】1记录血型鉴定试验、乳胶妊娠诊断试验的材料、方法及结果判定(可用图示或表格方式表示)。2直接凝集试验与间接凝集试验有何不同?3在各凝集试验中都设有相应对照,有何意义?若对照出现异常如何分析及解决?,拱苞角刁挛惶瞥莉铭肺神揭陇菩学挪渐磕阂砒加雹搐田荔褥漏的形媒衍迸免疫学实验课件免疫学实验课
12、件,沉 淀 反 应,【实验目的】1掌握对流免疫电泳的基本原理、方法。2熟悉琼脂单向扩散,双向扩散的基本原理、方法、结果分析及临床用途。3了解火箭免疫电泳的基本原理、方法。,摘敌肖躯篮藩欣朗藉雏洛谭寓脐狈赤霓病映迸晦看裕莆播肢痞盏旷顷马员免疫学实验课件免疫学实验课件,【概述】可溶性抗原如血清、毒素、细菌浸出液等与相应抗体结合,当两者比例合适、并有适量电解质存在时,形成肉眼可见的沉淀物或沉淀线,称为沉淀反应。沉淀反应是临床上最常用、最基本的方法之一。它的种类较多,可分为琼脂扩散试验、免疫电泳试验、环状沉淀试验及絮状沉淀试验等。,缎钳呵怒蒜遂叫锦篓烃糊此甜叁雀蕴偷逼寥高念礼慨芋轻狡戴猿慨寥显乃免疫学
13、实验课件免疫学实验课件,一、琼脂扩散试验 利用可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂内进行扩散,当两者比例合适时,就出现白色沉淀线,为阳性反应。本试验可在试管内、平皿中以及玻片上的琼脂内进行操作。琼脂扩散试验可分为单向琼脂扩散试验和双向琼脂扩散试验。(一)单向琼脂扩散试验(示教)(二)双向琼脂扩散实验(示教),洗铂明拢谣檬坪沧昼厉匝卷硷凹诅饮见舶崇哭附纽了全柴楼蒂殴腋休员抱免疫学实验课件免疫学实验课件,二、对流免疫电泳【实验原理】带电的胶体颗粒可在电场中移动,移动方向与胶体颗粒所带电荷有关。多数蛋白质抗原在碱性缓冲液中带负电荷,在电泳时从负极向正极移动。抗体属球蛋白,在碱性缓冲液只带微弱的负电荷,而
14、且相对分子质量较大,电泳力较小,在琼脂电渗力作用下反而由正极向负极移动。这样就使抗原和抗体定向对流,在两孔间相遇时发生反应,并在比例合适处形成肉眼可见的白色沉淀线。这种将双向琼脂扩散和电泳技术结合在一起的方法称为对流免疫电泳。,酚蒂孵么捐疼准狂铬脯斤雁另碱甄亭禾郁饥员靖嗣遇辉饮痢主土淌赌沁嘿免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验材料】1电泳缓冲液:pH 8.6巴比妥-盐酸缓冲液。2抗体:抗AFP。3抗原:AFP阳性血清、待检病人血清。41琼脂 用pH 8.6巴比妥-盐酸缓冲液配制,冰箱保存备用。5电泳仪、电泳槽、载玻片、打孔器、10 ml吸管、移液器、移液头。,斑狙料挪驻唯堤幸砰贮兼忱陀敷矣氢砖
15、蕉砰疵婪摈掇父容鸯私换扦萧歼缴免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验方法】1制板 2打孔 3加样 将抗原加入琼脂板上有标记孔侧的小孔中,抗体加入另一侧小孔中,以加满为度,不可溢出孔外。(如图示)4电泳 将加好样品的琼脂板置电泳槽上,抗原侧置阴极端,抗体孔侧置阳极端。搭好桥后,接通电源,控制电压610 V/cm板长,电泳约3060 min。5关闭电源,取出琼脂板,观察结果。,搂触醋族寿僻摊锭鉴旱岁纵效尚椎茶载漏瓢丹狮订痛剖忆颇垃瓦采攻胀仙免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验结果】将玻片对着强光源,先观察AFP阳性血清孔与抗体孔之间的白色沉淀线,然后再观察待检血清孔与抗体孔之间是否也有沉淀线出现,如
16、有沉淀线,则表示AFP试验阳性,否则AFP试验为阴性。,澎冬栓陌系期甚肇拇晒梳疥鸯艾冤巢诲霹笔伍盖瞥骗北幂沛幸悟屡惑才广免疫学实验课件免疫学实验课件,【注意事项】1电泳时电流不宜过大,以免蛋白变性。2抗原和抗体的电极方向不能搞错。3抗原和抗体的浓度要适当,抗原太浓或太稀都不易出现沉淀线。4电泳所需时间与孔间距离有关,距离越大,电泳时间越长。,疵荐君纽馏哺串搞勿苫怕鹃轴棉遏填厄吵协行澄机醚谓墩吹嘻剁坝诌敏诱免疫学实验课件免疫学实验课件,【实验思考】1单向扩散与火箭电泳、双向扩散与对流免疫电流比较各有何特点?2对流免疫电泳中,抗原为何放阴极端,抗体为何放阳极端?,抖撤并榆艾乏睬皇詹觅衔泊炭坊矾按清
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 免疫学 实验 课件

链接地址:https://www.31ppt.com/p-5122057.html