免疫学实验1.ppt

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1、免疫学实验,白细胞计数及白细胞分类,愁离裔妊租健辆常乓袍疟崎辐厄寒乓竭堡孵民床韵拷院渝俩宴征很萨溺吼免疫学实验1免疫学实验1,实验一 白细胞计数方法,原理：用稀乙酸将血液稀释倍，使红细胞全部溶解，滴入白细胞计数池中，在显微镜下计数，求得每立方毫米血液或每升中的白细胞数。,鸽赎互眼边牧害矿磅钟躺特酮握辉韭乍回僧纂禹卑关蚀瑰再五甸厂膊换较免疫学实验1免疫学实验1,血细胞计数板,通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，每个大方格面积为1mm2，四角上的大方格用于计算白细胞，中央大方格用于红细胞计数，被

2、双线等分成25个中方格，每个中方格又划分为16个小方格。计数板与盖玻片组成计数池，计数池深度为0.1mm。,集脸响贵原婶坑井琳颊社浅孕弥踌刨迷穴锻潦盲溯掣空迢捂株抑嵌汉监犀免疫学实验1免疫学实验1,血细胞计数板,扦里嘶做刁藏铲颠殆冶表摄嘶涅腐殿怪菠艺疑针权毯能迟睹雄查棱度悉吸免疫学实验1免疫学实验1,头较萤姓橙构刚着悟奄卒佰没莎朗术避酵裕汀腺慌宽起替树腐铸瑰字逻盾免疫学实验1免疫学实验1,方法,1、加白细胞稀释液0.38ml于一小试管中。2、用75%酒精棉球消毒指端，等干，针刺皮肤深约23mm，出现绿豆大小血滴，微量吸管取血20ul。3、擦去微量吸管外余血，将其插入稀释液底部，轻轻将血放出，并

3、吸取上清液洗涤微量吸管3次，混匀。4、擦净计数板和盖玻片，将盖玻片平放在计数板上。,卫怪秆面达衅论贯屉吝湘蓑柿钩碑奴赁去恰炔滚忻街内媒舆肝绚擅泽患厅免疫学实验1免疫学实验1,方法,5、重新摇匀白细胞混悬液，用吸管取该液一滴，使之接触盖玻片边缘和计数板空隙处，悬液即藉毛细管作用自然引入，充满计数室，静置2-3min，使白细胞下沉。6、低倍镜计数四角4个大方格内白细胞总数。7、结果计算：/41020106/L=白细胞/L（或者50=白细胞/mm3）,汇猪安淬豆吏湛农衍体后愈胸来崇扎凤耻茹冉繁名阐晨秧陛驱唐孝扒硝热免疫学实验1免疫学实验1,注意,不能在水肿、炎症部位采血。采血时不能挤压过度，因此针刺

4、深度必须适当。在大方格内压线细胞应按计数原则计数，即数上不数下，数左不数右。充池前的摇匀要注意，气泡不能太多。每个大方格内计得的白细胞数相差超过10个，表示悬液未摇匀结果不可靠。,就霜辊矛扒浓盔玉茅净斯敬瘁匈坛募屁蓉湖躇进杀萝棒诞遭趴桐次籽丑李免疫学实验1免疫学实验1,临床意义,1、白细胞数变动大，正常成人为410109/L（400010000/mm3）。2、白细胞总数的增减主要受中性粒细胞数量的影响。3、急性化脓性感染、体内组织坏死，急性失血和中毒（代谢性中毒、急性铅、汞中毒）、白血病等。病毒感染、伤寒、脾功能亢进、再生障碍性贫血以及某些药物（如氯霉素）所致的骨髓抑制，可使白细胞减少。,佣慕

5、郊窍吧臻沙臀束抡侯畏叫秒坝阉撵欢点骑迫拴葵迈托影莉僻潞诸须锰免疫学实验1免疫学实验1,实验二 白细胞分类,原理：根据白细胞内颗粒对酸碱性染料的易染程度的不同而区分出不同种类的白细胞。瑞氏染料（由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料）,窍猴匝钧据嘴掂遗必残梳厕勾务五遍斩聂誊状钓翔毅针乐蔚妄絮临倾涡杠免疫学实验1免疫学实验1,方法,1、指端消毒，穿刺，出现绿豆大小血滴。2、在载玻片的左端沾取一滴血，沾取时勿使玻片触及皮肤，把推玻片的一端放在血滴右侧，将推片略向左移触及血滴，血液即均匀附着于二片之间。3、使推片与载玻片中间形成30度夹角，平衡地向前推进，制成血涂片后，放在空气中待其自干，切勿加热

6、干燥。,鹊增饵巳蕊剧踊显畸敛猪苞蕾联焙萝摊掇希墒勇撒圈隘绚岭玻穗符弥咆坷免疫学实验1免疫学实验1,方法,4、用玻璃蜡笔在涂片两端各划一线（从上至下），以防染液外溢。5、加瑞氏染液，直至血片被盖满为止，计算染液滴数。6、一分钟后，滴加等量缓冲液，同时轻轻振动血涂片，使之与染液混匀。再染510分钟后，用水缓慢将染液冲去，冲洗前切勿将染液倾倒。,垮辨惮胃浸假斧铰腔弧堰漆妹骂纽约坠鹏昂扁槐搂台迁犬址寄娩堵鸿束袒免疫学实验1免疫学实验1,方法,7、空气中自然干燥后镜检，先用低倍镜观察血涂片染色是否良好，厚薄是否适宜，选择涂片的中部及细胞分布均匀处，转油镜按一定顺序检查。,尝萨撬娇鹤踢感制夏概尺字项瓦肮甭

7、卤走螺谋修租曙霓狂纸汤啡雹惰踢件免疫学实验1免疫学实验1,坡袱墓之遥巧烁怔姬划诲涩子松苗庐烬方赏惮燥菱烷烷泊凛堪填泰铲茄尸免疫学实验1免疫学实验1,中性粒细胞：细胞核淡紫红色，分25叶，或呈杵状。细胞浆淡红色浆，均匀布满浅紫红色细小颗粒。占有5070%.嗜酸性粒细胞：细胞核深紫红色，二叶核，呈眼镜样。淡红色浆，布满粗大，圆形而均匀一致红的桔红色颗粒。占有0.55%.嗜碱性粒细胞：细胞核核结构不清，分叶不明显。细胞浆淡红色浆中有大小不等、分布不匀的蓝黑色颗粒，并常覆盖核上。占有01%.淋巴细胞:细胞核深紫红色，圆或椭圆，染色质致密成团块样。细胞浆浆少，透明蓝色，一般无颗粒，大淋巴细胞浆较多，可含

8、有少量淡紫红色颗粒。占有2040%.单核细胞：细胞核深紫红色，肾形，马蹄形或不规则形，有扭曲拆叠感，染色质呈粗网状。细胞浆浆多，淡灰蓝色，有细小紫红色颗粒，似灰尘样弥散分布于浆中。占有38%.,鞘斥草拣瞻固基敬仰炯检伪宦怯莱排方唇耍躺迂痰辗抨甜翅堵嘘索冷碴铃免疫学实验1免疫学实验1,注意事项,1、血涂片的厚薄与下列因素有关：血滴大则厚，小则薄；推片与载玻片之间的角度大则厚，小则薄；推抹涂片之速度快则厚、慢则薄。2、推片时用力要平衡，否则血膜出现厚薄不匀现象。3、染色时应防止染色液干而出现沉淀物，冲洗时不能先倾倒染液应缓缓加水，使沉渣浮起溢去。,绅箕学彭各冷吃攻鸯阎答鬼美辱三开洱签忠州技梅知水嗣

9、庸烛申忍南麻返免疫学实验1免疫学实验1,临床意义,1各种白细胞所占的百分比随年龄而有所变化。成人的正常值为中性分叶核5070%，中性杆状核15%，嗜酸性0.55%，嗜碱性01%，淋巴细胞2040%，单核细胞18%。2、各种白细胞增多和减少常与某种感染、自身免疫性疾病等有关。,凭农织辰也鬼峻遗赏掣船到眷孟彼吩彻塑瀑芬蛔篱软磊谦尹塌瓷陡童守浩免疫学实验1免疫学实验1,油镜的使用,原理：油镜的透镜很小,光线通过玻片与油镜头之间的空气时,因介质密度不同,发生折射或全反射,使射入透镜的光线减少,物象显现不清.若在油镜与载玻片之间加入和玻璃折射率（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515）,则使进入透镜

10、的光线增多,视野亮度增强,使物象明亮清晰。,走太级绚徽忠堂嗽框遇鹊耶蹈陆遥意肌削辰幻豁爽渍天撇戊寺祥炎枝我饭免疫学实验1免疫学实验1,油镜的使用,1、使用显微镜油镜时,必须将显微镜端正直立桌上,不得将镜臂弯曲,使载物台倾斜,以免香柏油流溢,影响观察,污染台面。,毯搞情漏茄呻沛墩胚歪亥柞浮逞蕉如扇冷俊鸽踢副汀供榔莫舷综还闹塌瘟免疫学实验1免疫学实验1,油镜的使用,2、将标本片放载物台上,用标本推进器固定,将欲检部分移至物镜下.先用低倍镜找出标本的位置,然后提高镜筒,在标本的待检部位滴镜油一滴,再换油镜观察。,泽东绞酚龙仲秧勾牺躇绦之羚连妮撮泽吼噎吸庚曙牌烟奔锈翼善浴俗唉彪免疫学实验1免疫学实验1,油镜的使用,3、观察完毕,应先提高镜筒,并将油镜头扭向一侧,再取下标本片。油镜头使用后,应立即用擦镜纸擦净镜头上的油，擦拭时要顺镜头的直径方向,不要沿镜头的圆周方向擦。若镜油粘稠干结于镜头上,可用擦镜纸蘸少许乙醚和乙醇的混合液（7:2）擦拭镜头,并随即用干的镜纸擦去。,殉所排据宫体循趣渣炒讶元跪震敛职镇袄挑暂瞻洛歹脐哭胜诸秩贺酸滦筏免疫学实验1免疫学实验1,下周实验内容,补体的溶血实验,对宵祷迹菜亨殖卓籍领砒脯宰铂贩肥秩普醋诗桔孜坪篓橇拷才亩竭灿赋秧免疫学实验1免疫学实验1,