实验一抗原抗体反应凝集反应.ppt

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1、抗原抗体反应,免疫学,抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应(antigen-antibody reaction)。,抗原抗体反应,抗原抗体反应原理,抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力。这些弱结合力只能在极短距离内才能发生效应。,抗原抗体结合力,抗原和抗体的结合虽然是互补性，非共价键，特异性结合，抗原与抗体这种弱的结合力涉及下列几种分子间的作用力。,l.静电引力,2.范德华引力,3.氢键结合力,4.疏水作用力,亲水胶体转化为疏水胶体示意图,亲水胶体,疏水胶体,转化,NaCl,可见反应,抗原抗体反特点,比例性,可逆性,敏感性,

2、特异性,特异性示意图,比例性示意图,抗体过量,比例合适,抗原的量,抗原过量,抗体沉淀的量,前带,等价带,后带,抗原抗体反应比例性的机制，可用网格学说加以说明。因为天然抗原大多是多价的，抗体至少为两价，当抗原与抗体在等价带结合时，相互交叉连接成具有立体结构的网格状复合体，形成肉眼可见的沉淀物。当抗原或抗体过剩时，由于过剩方的结合价得不到饱和，只能形成小网格复合物。但是，当抗原或抗体为单价，不管抗原与抗体的量比关系是否合适，均不能出现可见反应现象。,抗体,混有SPAg,抗体-SPAg,抗体-SPAg,分离剂,一、抗原抗体结合,二、分离抗体,可逆性示意图,抗体,抗原抗体反应影响因素,1.抗原、抗体的

3、自身因素的影响;2.电解质、酸碱度、温度及时间等实验环境因素的影响。,第四节 抗原抗体类型,1.可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应2.颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的凝集反应 3.抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应 4.细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应 5.免疫标记的抗原抗体反应。,凝集反应,类型：直接凝集反应,间接凝集反应,间接凝集抑制试验,协同凝集试验,1.凝集反应,直接凝集试验：颗粒性抗原在有电解质的参与下，直接与相应抗体结合出现的凝集现象。,间接凝集试验：用人工方法将可溶性抗原(或 抗体）吸附或偶联于载体上，使之成为致敏 载体颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用，在

4、适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。,载体,可溶性抗原,致敏,致敏颗粒,NS,凝集颗粒,（正向）间接凝集试验,用特异性抗原致敏载体，检测标本中的相应抗体的方法。,待测抗体,反向间接凝集试验,用特异性抗体致敏载体，检测标本中的相应抗原的方法。,载体,已知抗体,致敏,致敏颗粒,NS,凝集颗粒,待测抗原,间接凝集抑制试验,待测抗原,已知抗体,特异结合,抗原抗体复合物,NS,致敏颗粒,用抗原致敏载体及相应抗体作为诊断试剂，用于检测标本中是否存在与致敏载体相同的抗原。,无凝集颗粒为阳性,间接凝集抑制试验,待测抗原,已知抗体,无结合,抗原抗体分散,NS,致敏颗粒,有凝集颗粒为阴性,原理,抗球蛋白试验(Coombs试验),机体受某些抗原刺激后产生“不完全抗体”，其与相应抗原结合后不出现可见的凝集现象，但能封闭抗原决定簇，使其不能再与完全抗体结合。,类型,原理,协同凝集试验,SPA能与血清中的IgG类抗体的Fc段非特异性结合，而两个Fab段暴露在葡萄球菌菌体表面，仍然保持正常的抗体活性，与特异性抗原相遇时，能出现特异的凝集现象。,原理图,IgG,SPA,SPA-IgG,待测抗原,SPA-IgG-待测抗原凝集颗粒,混合,加入,实验材料,1.待测血清样品2.CRP乳胶试剂3.反应玻片4.50ul加样枪,实验方法,1.反应玻片上滴加稀释血清样品50ul2.滴加CRP乳胶试剂一滴，轻轻摇动5分钟,