《常用实验动物》课件.ppt
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1、1.11月1、2日和11月28、29日是动物实验操作技能培训课,已初步进行了分班,每班不超过45人。分班的情况已张贴在墙上。个别同学因课程安排需要调整,请在姓名旁边注明要求。2.如果3,4班同学愿意调到1、2班,也请在姓名旁注明。3.因学生人数太多,教学资源有限,凡研究生课题不做动物实验者,可申请不参加,并在姓名旁边注明。,动物实验操作技能培训课,第六章 常用实验动物,第一节 小鼠第二节 大鼠第三节 豚鼠第四节 兔第五节 猫第六节 犬第七节 猕猴,实验动物各论的讲课要点,一、生物学特性(一)习性和行为(二)主要解剖学特点(三)主要生理学特点二、在生物医学研究中的应用三、常用品种、品系四、饲养管
2、理要点,第一节 实验小鼠,概况在一亿两千五百万年到七千五百万年前(白垩纪时代)小鼠和人类有共同的祖先。约六百万年前形成了小家鼠种(Mus Musculus)在动物分类学上,小鼠(Mouse)属于哺乳纲(Classis Mammalia)、啮齿目(Order Rodentia)、鼠科(Familia Murinae)、小鼠属(Genus Mus musculus)、小家鼠种(Species musculus)动物,染色体数2n=40。19世纪小鼠作为观赏动物饲养。20世纪初开始应用于实验研究。,1900年Castle首先将小鼠用于遗传学研究。1909年Litter等培育出世界上第一个近交系小鼠D
3、BA。1948年Snell培育出与H-2基因相关的同类系,获得诺贝尔奖金。1962年Issacson发现裸小鼠。1982年Ricard Palmiter制备成功转基因小鼠。1987年Martin Evans等制备出第一只基因敲除小鼠。2005年以C57BL/6J为代表的小鼠 基因组测序的完成 是品系最多、使用量最大、使用 最广泛、研究得最透彻的一种实 验动物。,生物医学研究离不开小鼠!,2007年10月10日,Martin Evans,Mario Capecchi,Oliver Smithies共享诺贝尔医学奖,以表彰他们在生命科学领域里做出的卓越贡献。,小鼠造就诺贝尔奖!,1.最小的哺乳动物
4、之一(25-40g),具有繁殖力强、生殖周期短、个体小等特点。2.生物进化上与人类接近,胎盘形成和早期胚胎发育、组织器官结构和细胞功能与人类相似3.小鼠的基因组与人类基因组有很高的同源性,小鼠基因总数与目前已知的人类基因数量相近,约为3万个左右;人类99%的基因存在于小鼠,基因同源性高达78.5%。基因组93%的区域基因排列顺序与人类相同,90%以上的小鼠和人类基因组分布在相应的保守区域里。一些基因的功能可类推到人类,因而基因的突变导致表型的改变和病理变化可作为极好的人类疾病动物模型,用来阐明人类基因的功能。,小鼠广泛使用的理由,4.小鼠近交品系(426个)、自发性突变和遗传工程小鼠模型多等特
5、点,因而被广泛应用于生命科学的各个领域。5.迄今为止除了人以外,小鼠是唯一建立胚胎干细胞(ES细胞)在体外培养的哺乳动物,而ES细胞是进行基因修饰和遗传操作的最重要的手段之一。6.小鼠基因组测序计划已完成7.基因组改造的技术手段成熟,一、生物学特性(一)习性和行为胆小怕惊昼伏夜动喜群居适应性差喜啃咬,(二)主要解剖学特点1.外观和体型:体型最小,出生时体重仅1.5g,体长2cm左右,6周龄达18-30g,成年小鼠最大时可达30-40g,体长11cm左右。2.尾长约与体长相等。3.盲肠不发达。4.骨髓为红骨髓而无黄骨髓,终生造血。5.雌性小鼠为双子宫型,呈“Y”形;卵巢有系膜包绕,不与腹腔相通,
6、故无宫外孕。6.小鼠皮肤无汗腺,散热靠尾巴。,(三)主要生理学特点生长发育指标生长期短、成熟早、繁殖力强0日龄:出生时1.5g,体长20mm,赤裸无毛,身体成半透明,眼紧闭,两耳贴皮肤,嗅觉、味觉敏感。3日龄:皮肤出现毛色4-6日龄:双耳张开耸立,7-8日龄:开始爬动9-11日龄:听觉发育,被毛长齐12-14:睁眼,开始采食饮水,四处活动 21日龄:离乳 性成熟:45-60日龄,35-45日龄 体成熟:70-80日龄,65-75日龄 发情周期:4-5天 妊娠期:19-21天 哺乳期:20-22天 生育期:1年 寿命:2-3年,小鼠性周期阴道分泌物涂片变化,阴拴:雌雄小鼠交配后,在雌鼠阴道口形成
7、白色的阴道拴,有防止精液流出,提高受孕率的作用。阴拴是确认小鼠受孕的标志,有阴拴的小鼠记为妊 娠0.5天。,动情前期:大量有核上皮细胞,动情期:满视野角化上皮细胞,动情后期:角化上皮细胞及白细胞,动情间期:大量白细胞及少量粘液,ICR小鼠的生长曲线,Balb/c小鼠的生长曲线,生长曲线:以小鼠出生后不同周龄(一般为3-15周)为横轴线,相应体重为纵轴线,得到不同品系小鼠的生长曲线。,不同日龄小鼠体重情况(单位:g),在体成熟前,我们可以用体重表示动物的年龄,或用年龄估算动物的体重。,主要生理指标体温:3739 呼吸:140-210次/min心率:310-840次/min血压:收缩压17.73-
8、21.33 kPa 舒张压13.60-14.66 kPa白细胞计数 总数:8.4(5.1-11.6)109/L 中性白细胞:17.9(6.7-37.2)%淋巴细胞:69(63-75)%单核细胞:1.2(0.7-2.6)%嗜酸性细胞:2.1(0.9-3.8)%嗜碱性细胞:0.5(0-1.5)%红细胞计数 8.7-10.5 1012/L 血小板 600(100-1000)109/L 胃容量:,一般灌胃量为0.4ml/10克体重日摄食量:日饮水量4-7ml,二、在生物医学中的应用(一)药物研究药物安全性评价:用于急性毒性、亚急性毒性试验,半数致死量测定,最大耐药量测定,致癌、致突变、生殖毒性试验等。
9、药物筛选药效学评价试验生物制品的检定,二、在生物医学中的应用(二)肿瘤学研究 进行肿瘤病因、发病机理、防治及抗癌药物筛选的研究自发肿瘤诱发性肿瘤人癌细胞移植,二、在生物医学中的应用(三)遗传学研究遗传学分析基因研究:利用重组近交系、同源突变近交系和遗传工程小鼠(转基因小鼠、基因敲除/敲入小鼠、基因突变小鼠、染色体工程小鼠等)进行基因功能、表达和调节的研究突变系疾病动物模型,二、在生物医学中的应用(四)感染性疾病的研究1.病毒性疾病2.细菌性疾病3.寄生虫疾病(五)免疫学研究制备单克隆抗体用免疫缺陷小鼠研究淋巴细胞的功能利用小鼠对病原体的敏感性进行病原体与宿主免疫系统相互作用等方面的研究。,二、
10、在生物医学中的应用(六)老年病研究 在老年病实验研究中的使用仅次于大鼠。用于老年病的发病机理、表现以及防治研究。日本京都大学培育成功快速老化模型小鼠(senescence accelerated mouse,SAM);SAM系列中的一个品系在4-6月龄以前与普通小鼠的生长一样,4-6月龄以后则迅速出现老化诸特征。该小鼠是研究老年病的理想动物模型。(七)其他疾病研究1.神经系统疾病如亚急性坏死性脑脊髓病、癫痫可用小鼠进行。2.呼吸系统疾病小鼠是研究镇咳药的首选动物。3.消化系统疾病4.计划生育,目前绝大多数实验小鼠品系是国外培育的,并得到国际小鼠遗传命名委员会的承认。我国自己培育的小鼠品系昆明种
11、小鼠(封闭群):原型为Swiss小鼠,1946年从印度引进到昆明,1952年运送到北京生物制品所,1954年由北京分送到上海生物制品所,并分送到各地。615品系(近交系):1961年中国医科院血液病研究所培育TA1、TA2(近交系):1962年天津医科大学肿瘤所培育,三、常用的品种、品系,三、常用的品种、品系(一)近交系Balb/c:白化小鼠 主要生物学特征:乳腺癌发病率低对放射线敏感有自发性心血管病变 主要用于免疫学研究和单克隆抗体的制备。,三、常用的品种、品系(一)近交系2.C57BL/6j:黑色 主要生物学特性:乳腺癌自然发病率低对放射线中度抵抗对结核杆菌敏感雌性经超排后,排卵数多遗传背
12、景清楚,基因组测序完成 常用于转基因小鼠的制备和肿瘤学、遗传学的研究。,三、常用的品种、品系(一)近交系3.C3H:野鼠色(agouti)特性:9-10 月龄雌鼠中乳腺癌自发率97-100%雌性鼠对氯仿、松节油敏感补体活性高,干扰素产量低老年鼠常见膀胱扩张、肝癌和自发形成骨肉瘤 主要用于肿瘤学、生理学、核医学和免疫学的研究。,三、常用的品种、品系(一)近交系4.DBA/2:淡棕色主要生物学特性:雌性鼠乳腺癌发病率为31-66%白血病发病率6-8%35日龄听源性癫痫发作达100,对鼠伤寒沙门氏菌C5有抵抗力对酒精过敏雄性鼠接触氯仿和乙二醇的氧化产物时以及维生素K缺乏时死亡率高。常用于肿瘤学、遗传
13、学和免疫学的研究。,三、常用的品种、品系(二)封闭群1.昆明种:白化小鼠 主要生物学特征:繁殖率和存活率高抗病率和适应性强雌性小鼠乳腺肿瘤发病率25%广泛用于药理、毒理、病毒和细菌学研究,以及药品、生物制品的检定。,三、常用的品种、品系(二)封闭群1.ICR:白化小鼠 主要生物学特征:繁殖力强,母性好体型较昆明种小鼠大广泛用于药理、毒理、病毒和细菌学研究,以及药品、生物制品的检定,转基因小鼠的胚胎移植。,四、饲养管理要点保持饲养室内温湿度稳定。给料给水:提供足够的饲料和饮水,自由摄取。定期更换垫料和清洁卫生。观察记录:小鼠外观健康标准:1)食欲旺盛2)眼睛有神,反应敏捷3)被毛光滑,肌肉丰满,
14、活动有力4)眼、耳、鼻、肛门等处无分泌物5)粪便呈颗粒状,大鼠(Rat)属于哺乳纲、啮齿目、鼠科、大家鼠属(Genus rattus)、大家鼠种(Species rattus norvegicus)的动物,学名褐家鼠(大家鼠)(Rattus Norvegicus),染色体数2n=42。大鼠是野生褐家鼠(Rattus Norvegicus)的变种,起源于北亚洲,于17世纪初期传到欧洲。18世纪后期开始人工饲养,19世纪,美国费城维斯塔尔(Wistar)研究所在开发大鼠作为实验动物方面作出了突出贡献,目前世界上使用的许多大鼠品系均起源于此。广泛应用于药理学、毒理学、营养学、内分泌学、肿瘤学、生物化
15、学、医药、农药毒性等诸方面的研究之中。,第二节 大鼠,一、主要生物学特性(一)习性和行为昼伏夜动喜群居胆小怕惊喜啃咬抗病力强对环境噪声敏感寿命2.5-3年,(二)主要解剖学特点1.外观与体型:体型较大,体重约是小鼠的10倍。新生仔鼠体重约5.5-10g,1.5-2月龄达到180-220g,其体长不小于18-20cm。雄性大鼠最大体重达300-800g,雌性大鼠250-400g。2.大鼠汗腺不发达,仅在爪垫上有汗腺。尾巴是散热器官。在高温下靠流出大量唾液调节体温。3.大鼠无胆囊,胆管直接与十二指肠相连。4.大鼠食管与胃交界处有皱褶,能阻止胃内容物反流到食管,因此大鼠不会呕吐。,(三)主要生理学特
16、点生长发育指标生长期短、成熟早、繁殖力强0日龄:出生时5-7g,赤裸无毛,眼紧闭,两耳贴皮肤,嗅觉、味觉敏感。3日龄:皮肤出现毛色4-6日龄:双耳张开耸立,7-8日龄:开始爬动9-11日龄:听觉发育,被毛长齐12-14:睁眼,开始采食饮水,四处活动 21日龄:离乳 性成熟:45-60日龄,35-45日龄 体成熟:80-90日龄,75-85日龄 发情周期:4-5天 妊娠期:19-21天 哺乳期:20-22天 生育期:1年 寿命:2.5-3年,SD大鼠生长曲线,Wistar大鼠生长曲线,大鼠体重增长表(单位:g),注:划横线者表示达到180-220g体重,通过表格可了解相应日龄。,(三)主要生理学
17、特点大鼠嗅觉灵敏,对空气中的尘埃、氨气、硫化氢极为敏感,易患肺炎或进行性肺坏死而死亡。大鼠对噪声敏感,噪声易引起内分泌紊乱,吃仔或死亡。大鼠对营养缺乏非常敏感。大鼠对湿度要求严格,如空气过于干燥,易发生环尾病。,(四)主要生理指标体温:38.539.5 呼吸:140-210次/min心率:310-840次/min血压:收缩压 舒张压白细胞计数 总数:5.0-15.0 109/L 中性白细胞:22(9-34)%淋巴细胞:69(63-75)%单核细胞:2.3(0-5)%嗜酸性细胞:2.2(0-6.0)%嗜碱性细胞:0.5(0-5.0)%红细胞计数 7.2-9.6 1012/L 血小板 120(11
18、0-138)109/L胃容量:,一般灌胃量为1.0ml/100克体重日摄食量:75-100g/kg日饮水量:20-45ml日排尿量:10-15ml,二、在生物医学中的应用(一)内分泌研究(二)营养代谢性疾病研究(三)药物研究药物安全性评价:长期毒性试验、生殖毒性试验等药效学研究(四)行为学研究(五)老年病学研究(六)肿瘤研究(七)感染性疾病研究(八)心血管疾病研究(九)中医药研究,三、常用品系(一)封闭群SD(Sprague Dawley):白化大鼠 主要生物学特性:对疾病抵抗力较强,尤其对呼吸道疾病抵抗力很强自发性肿瘤的发病率较低对性激素敏感性高2.Wistar:白化大鼠 主要生物学特性:性
19、情温顺对传染病的抵抗力较强自发性肿瘤发生率低,三、常用品系(二)近交系Wistar:白色 对各种营养物质敏感,适用于各种营养、代谢性疾病研究。垂体肾上腺系统发达,应激反应灵敏,适用于神经内分泌实验研究。还用于药物、肿瘤、传染病、关节炎、肝外科等医学研究领域。是生物医学研究中使用历史最长的大鼠品系。易于饲养繁殖。,三、常用品系(二)近交系Fischer 344(F344):白色 生物学特性:自发性肿瘤发生率高,乳腺癌41%,23%;睾丸间质细胞瘤 85%;脑垂体腺瘤36%,24%常用于长期毒理试验和老年医学研究。,四、饲养管理要点 与小鼠基本相同,室内湿度低于30%易引起环尾病。哺乳期母鼠对噪声
20、敏感。大鼠体型大,排泄物多,应勤换垫料;饲料、饮水消耗量大,应及时补充。应选用粉尘少的垫料,麻醉后的大鼠易吸入粉尘,引起吸入性肺炎。,豚鼠(Guinea pig)在分类学上属于哺乳纲、啮齿目、豪猪亚目、豚鼠科(Familia Caviidae)、豚鼠属(Genus Cavia)、豚鼠种(Species cavia porcellus)的动物,学名豚鼠,又名海猪、天竺鼠、荷兰猪。染色体数2n=64。,第三节 豚鼠,一、生物学特性(一)习性和行为草食性喜群居性情温顺胆小怕惊用叫声表达要求不善于攀登和跳跃,长毛豚鼠,短毛三色豚鼠,(二)主要解剖学特点1.外形:身形短粗,头大,身圆,耳廓大,四肢短小,
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