临床微生物检测仪器.ppt

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1、第十章 临床微生物检测仪器,教学基本要求,重点,难点,熟悉,了解,概 述,传统的微生物学鉴定方法,微生物学技术方法快速、准确、简易和自动化?,渗透,交叉,自动化检测系统,概 述,概 述,化检测系统微生物自动,主要功能 检测标本中是否有微生物存在，计算机自动扫描进行连续监测，当微生物生长代谢导致某些生长指数超标时，仪器自动报警提示有细菌生长。,概 述,主要功能 将培养基上分离的可疑致病菌配制成纯菌液，放入自动微生物鉴定及药敏分析系统中，通过计算机自动扫描、读数、分析、最后报告鉴定及药敏结果。,概 述,主要内容,第一节 自动血培养系统,工作原理及分类,基本结构与功能,性能特点,常见故障及维护,血培

2、养仪的进展,通过自动监测培养基（液）中的混浊度、pH值、代谢终产物CO2的浓度、荧光标记底物或代谢产物等的变化，定性地检测微生物的存在。,自动血培养仪的工作原理,第一节 自动血培养系统,根据检测原理分类,第一节 自动血培养系统,血培养基中因含有不同电解质而具有一定导电性。微生物在生长代谢的过程中可产生质子、电子和各种带电荷的原子团（例如在液体培养基内CO2转变成CO3），通过电极检测培养基的导电性或电压可判断有无微生物生长。,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,co2,co2,co2,培

3、养基,光电感应器,荧光感应物质,光源,中央处理器,报告,Bactec9000系列工作原理,自动血培养仪的基本结构与功能,培养瓶,培养仪,数据管理系统,点击图片进入,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,临床常见的血培养瓶 1,为一次性无菌培养瓶，瓶内为负压，便于标本采集时依靠负压作用将血液直接引人培养瓶。每个培养瓶底部都包含一个检测CO2的传感器，通过检测作为微生物生长状况的指示器。,第一节 自动血培养系统,临床常见的血培养瓶 2,针对微生物对营养和气体环境的要求悬殊，患者的年龄和体质差异大以及培养前是否服用抗菌素等要素，BACTEC9000系统提供多种专用封闭式培养瓶，不仅提供不同

4、细菌繁殖所必需的增菌液体培养基，还包含适宜的气体成分，最大限度检出所有阳性标本，防止假阴性。,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,功能 培养瓶放入仪器后进行恒振荡温培养及自动连续监测。不同类型自动血培养系统的单机检测样本数有所不同，一般为数十至数百个。监测数据传送至数据管理系统，一旦系统分析显示某一培养瓶达到阳性判断标准时，培养仪将会给予提示信息。,第一节 自动血培养系统,临床常见的血培养仪,第一节 自动血培养系统,数据管理系统,第一节 自动血培养系统,功能 收集并分析来自培养仪的数据，以及将患者和培养瓶的资料存入数据库。在不使用数据管理系统时，系统处于监视状态并出现监视屏幕。当需

5、要患者及培养资料时，进入系统主菜单。数据管理系统可根据各实验室的要求追踪大量的信息，可保存基本或详尽的资料（如患者检验号，培养瓶号，标本类型以及实验室自己设置的一些特殊项目资料），也可根据病区、微生物类型及时间追踪分析结果。一般还可给出工作量报告。,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,第一节 自动血培养系统,自动血培养仪常见故障及维护,温度异常（过高或过低）,瓶孔被污染,数据管理系统与培养仪失去信息联系或不工作,仪器对测试中的培养瓶出现异常反应,第一节 自动血培养系统,温度异常（过高或过低）多数情况下是由于仪器门打开的次数太多引起，需注意尽量减少仪器门开关次数，并确保培养过程中仪器

6、门是紧闭的。通常培养仪的门要关闭30min后才能保持温度平衡。,第一节 自动血培养系统,瓶孔被污染 如果培养仪瓶孔内的培养瓶破裂或泄漏，需按各仪器要求及时进行清洁和消毒处理。,第一节 自动血培养系统,数据管理系统与培养仪失去信息联系或不工作 此类故障只可能在微机与培养仪仪器相对独立的系统中出现。此时培养仪仍可监测标本，但它只能保留最后72小时的数据，检测时也只能打印阳性或阴性标本的位置。因此必须注意放置培养瓶时，需先扫描条形码，再将它放入启用的瓶孔内，患者、检验号、培养瓶的信息要等到微机系统工作之后才能输入。,第一节 自动血培养系统,仪器对测试中的培养瓶出现异常反应 在BACTEC9050培养

7、仪中，出现此类故障的原因大多是由于培养瓶未经扫描条形码就放入仪器内，或虽已扫描，但未放入规定的瓶孔中，系统将这些培养瓶归为“匿名瓶”，在显示屏上会出现提示信息。此时应将“匿名瓶”取出，重新扫描后放入。,第一节 自动血培养系统,BacT/Alert 培养仪运行中，有时仪器测定系统认为某一瓶孔目前是空的，但是实际上孔内还有一被测的培养瓶（无论是阳性或阴性的），此时应通过打印或“Problem Log”命令读出存在问题的瓶孔号。若整个区块中的所有瓶号都被显示出来，那可能是区块有问题；若只列出一个瓶孔号，那就只是这个瓶孔有问题。故障排除方法：如果这一孔内的培养瓶已经被非法卸出，则可以不管这一信息；如果

8、孔内还有培养瓶，则卸出此瓶，装入到另一孔内，然后对前孔作质控。,第一节 自动血培养系统,血培养仪的进展,第一节 自动血培养系统,微生物自动鉴定及药敏分析系统（目录）,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,工作原理,基本结构与功能,性能特点,维护和保养,进展,常见仪器介绍,采用微生物数码鉴定原理 数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。,第

9、二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,其实质是微型化的肉汤稀释试验 将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育，仪器每隔一定时间自动测定细菌生长的浊度，或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解，观察细菌的生长情况。得出待检菌在各药物浓度的生长斜率，经回归分析得到最低抑菌浓度MIC值，并根据CLSI标准得到相应敏感度：敏感“S”、中度敏感“MS”和耐药“R”。,Clinical and Laboratory Standards Institute：临床与实验室标准委员会。以前称NCCLS,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,第二节 微生物自动鉴定及药敏分

10、析系统,是系统的工作基础，各种不同的测试卡（板）具有不同的功能。最基本的测试卡（板）包括革兰氏阳性菌鉴定卡（板）、革兰氏阴性菌鉴定卡（板）、革兰氏阳性菌药敏试验卡（板）和革兰氏阴性菌药敏试验卡（板）。,测试卡（板）,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,微生物自动鉴定系统的鉴定卡,常规鉴定卡 对各项生化反应结果（阴性或阳性）的判定是根据比色法的原理，系统以各孔的反应值作为判断依据，组成数码并与数据库中已知分类单位相比较，获得相似系统鉴定值。,快速荧光鉴定卡 根据荧光法的鉴定原理，通过检测荧光底物的水解、荧光底物被利用后的pH变化、特殊代谢产物的生成和某些代谢产物的生成率来进行菌种鉴定。,第二节

11、 微生物自动鉴定及药敏分析系统,快速荧光测试卡 检测原理为荧光法，如Sensititre系统，在每一反应孔内参与荧光底物，若细菌生长，表面特异酶系统水解荧光底物，激发荧光，反之无荧光。以最低药物浓度仍无荧光产生的浓度为最低抑菌浓度。,微生物药敏测试卡,常规测试卡 检测原理为比浊法，如Vitek系统，在含有抗生素的培养基中，浊度的增加提示细菌生长，根据判断标准解释敏感或耐药。,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,绝大多数自动微生物鉴定及药敏分析系统都配有自动接种器，大致可分为真空接种器和活塞接种器，以真空接种器较为常用。仪器一般都配有标准麦氏浓度比浊仪，操作时只需稀释好的菌液放入比浊仪中确定浓

12、度即可。,菌液接种器,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,监测系统每隔一定时间对每孔的透光度或荧光物质的变化进行检测。快速荧光测定系统可直接对荧光测试板各孔中产生的荧光进行测定，并将荧光信号转换成电信号常规测试板则直接检测电信号，从干涉滤光片过滤的光通过光导纤维导入测试板上的各个测试孔，光感受二极管测定通过每个测试孔的光量，产生相应的电信号，从而推断出菌种的类型及药敏结果。,培养和监测系统,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,系统的神经中枢，始终保持与孵箱/读数器、打印机的联络，控制孵箱温度，自动定时读数，负责数据的转换及分析处理。,数据管理系统,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,性能

13、特点,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,维护和保养,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,微生物自动鉴定及药敏分析系统的进展,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,基于质谱分析技术的自动化微生物鉴定系统的出现，使微生物鉴定可在数分钟内完成，这将会给临床微生物检测带来革命性的变化。未来的微生物鉴定和药敏分析系统将会检测速度更快；检测的准确率和分辨率更高；自动化和电脑的智能化程度更强；检测成本更低。,临床常见的相关仪器 1,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,临床常见的相关仪器 2,第二节 微生物自动鉴定及药敏分析系统,本章小结,微生物自动化检测系统,自动血培养检测、分析系统,自动微生物鉴定及药敏分析系统,自动血培养检测、分析系统,本章小结,自动微生物鉴定及药敏分析系统,本章小结,1自动化血培养仪的检测系统的工作原理。2自动化血培养检测和分析系统按检测原理可分为哪几类？3BacT/Alert自动血培养系统工作原理。4Bactec自动血培养系统工作原理。5自动血培养仪有哪些功能特点？6微生物自动鉴定的工作原理。7自动化抗菌药物敏感性试验的检测原理。8VITEK自动鉴定及药敏分析系统工作原理。9微生物自动鉴定及药敏分析系统的性能特点。,思考题,