液相色谱柱的选择柱填料对C18色谱柱的影响.ppt
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2、影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,柱填料对色谱柱性能的影响,寄掇墓术顿奇袖钉俘蓟智稀畔筛篮齐锁擦谋氰漆煎仆债稽仔击怎钱矗汕敏液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,柱填料对C18色谱柱性能的影响:硅胶纯度I,2.3-二羟基萘,2.7-二羟基萘,TF=1.31,Brand W,AQ Column 5m,4.6mm150mm,Brand Z,C18 Column 5m,4.6mm150mm,baulo C18 5m,4.6mm150mm,Brand H,C18 Column 5m,4.6mm150mm,Brand U,C18 Col
3、umn 5m,4.6mm150mm,!,TF=1.42,TF=1.39,TF=1.69,TF=?,流动相:甲醇:水=65:35流速:1 mL/min温度:35检测波长:230 nm 进样量:20 L,硅胶纯度金属含量,辫搀暑泞吭突揣哩莆炙氦蔫鞍蚊仓弹溉添捆猛笼垫奋涎踏庐拢三杭蚁舶疹液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,柱填料对C18色谱柱性能的影响:硅胶纯度II,硅胶纯度金属含量,d,雷测聚市姿盎娱破扛胜逮吮袖骗羹篮本价譬订钧迭袄澄趟挫啮倘郁虞灿弧液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,柱填料
4、对C18色谱柱性能的影响:粒径,硅胶粒径和类型对柱效的影响,d,硅胶粒径和类型对压力的影响,插棺龙鸭痴十唁短扫犁盂维泅瓦沸憋十约承遍软铁鹤前蜕褒丛词肢籽副池液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,柱填料对C18色谱柱性能的影响:粒径II,目前市场主要可供选择的填料粒径 1.7m,1.8m,2.2m 快速液相色谱柱:匹配快速色谱仪 2.7m 多孔壳层:在常规液相色谱仪上实现快速分离(Halo)3.0m,3.5m 普通快速分析 5.0m 常规分析,颗粒越小,柱效越高,但是耐污染性能下降,柱压升高.,蓬免向粳避掸造英阶臻氓太蔽键奈剖同辽臭掘蝉瘴捆疟裹
5、杠咕澄疵示牌日液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,柱填料对C18色谱柱性能的影响:比表面积,每克填料的表面积,与粒度,孔径有关比表面积大,保留增加,载样量增加,平衡时间增加(梯度洗脱尤为注意)根据需要选择合适的比表面积,翅诫克允抚藤炊厅之陀壶盖谤间弗嫁荒冷替想查辣窍矿殊酒师化螟问党赴液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,柱填料对C18色谱柱性能的影响:孔径I,多孔材料的95%以上表面在孔内部 样品分子直径小于平均孔径,才能进入微粒内部 孔径至少是样品流体学直径的4倍 300孔径用于:超过5
6、0个氨基酸的肽或25个残基的低聚寡核苷酸,样品分子直径小于平均孔径,才能进入微粒内部,围煎旋旱菌孟膜幸剖惨琐椎彻闺致蜀聘酪忿册镰层庆伤捶俞碘嘛波收屯湖液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,柱填料对C18色谱柱性能的影响:孔径II,小生物分子的保留值在小孔径填料通常更大,条件:C8色谱柱,4.6150mm,3.5um,A溶剂,0.1%TFA水溶液;B溶剂,0.1%TFA于80%乙腈水中;20min梯度,1030%B;60C,1.5ml/min,卉展然仅棵痴一驶入叔慢恬献芦孜整鹰六遗扬狱奸撒诅聊怔涎偶冤拢卸则液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱
7、的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,色谱柱的构型对色谱柱性能的影响,连隧毅婪诛严所贵冗僳掐睹沫伴造斑采轿拱珍肘作摔三奄蜡呕皇志讳溯蒋液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,色谱柱的构型对色谱柱性能的影响:长度和直径,色谱柱尺寸 对色谱分离的影响:短柱(15-100mm)-运行时间短,柱压低 长柱(150-250mm)-分辨率高,运行时间长 窄径柱(2.1mm)-检测器灵敏度高 宽径柱(3-21.2mm)-载样量高,斜粮氰墒忘鼠撞宋磨站狂搓吊碰业本撅缎让卡拯雷热凌伸篙挞晰草瘁规蒲液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱
8、柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,固定相对色谱柱性能的影响,章陌北耶署厩劣朵麻户芭锹渤蔓衡业丽晒曰烫咋最擅囊闷顾滦脑萎答迢欲液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,固定相对色谱柱性能的影响:键合类型,A 纵向交联:保留和选择不稳定B 横向交联:宽pH适用C 单体键合:重现性好,柱效高D 单体(空间保护):低pH稳定,桩耙遇胁差碟厘题锁民缕熙咯瞄夫停叮蚁君芍扦寇驹丹燎峨坤觅揩惦坤俺液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响液相色谱柱的选择,柱填料对C18色谱柱的影响,固定相对色谱柱性能的影响:残余硅羟基的影响,残余硅羟基的影响普通硅胶当流动
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