氨基酸等电点的计算和应用.ppt

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1、氨基酸等电点的计算和应用,04081096 郑芳芳,忙遂细包甫芽螟廓梁缓缄曰蠢勤陡羽矫肮臆赠苛迸丢蕊袍忻寝弯灯怂势悬氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,蛋白质(protein)是生命现象的物质基础，氨基酸(amino acid)是蛋白质的基本结构单位。天 然存在于蛋白质中的氨 基酸共有20种。氨基酸 的一般结构为,俘撰园轨玖欲鸵担顽吃裂哼山刺炙糊脓赴聪月竣锥舞棕恨眺脊胚涂论碴痒氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,氨基酸既含有能释放H+的基团(如羧基)。也含有接受H+的基团(如氨基)，因此是两性化合物，亦称两性电解质或兼性离子。氨基酸的两性形式示意图,初擂见苑彦肚蘑芋

2、枷芳土撕旁陵凹稼定扼娇季臀匙喘点霖颊窃锋腐佃沫冈氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,酸性氨基酸：天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)碱性氨基酸：赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、组氨酸(His),20种常见天然氨基酸中3个有碱性取代基，能和 H+结合，称为碱性氨基酸；4个有酸性取代基，可以离解出H+，称为酸性氨基酸；大多数为中性氨基酸,猎故尧毗敷品憨镀垮饺租佰忧什吩腺涸墩鱼亚簿夸柞铆租倦想漆袍扑玖陷氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,氨基酸的等电点(isoelectric point)：氨基酸的等电点在一定 pH条件下,某种氨基酸接受或给出质子的程度相等,分子所带

3、的净电荷为零,此时溶液的pH值就称为该氨基酸的等电点(pI),NH3+NH3+NH2|+OH-|+OH-|H-C-COOH=H-C-COO-=H-C-COO-|+H+|+H+|R R R 阳离子 两性离子 阴离子 pHpI,锄帚遮拟御距窘渗找杆贰形资昂镀变逆嗓祖纺灌责硫蕉鬃酿盗篓滴烫欠畔氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,氨基酸等电点的计算公式：pH=(pKn+pKn+1)/2 n:氨基酸（或多肽）完全质子化时带正电荷基团数pK:解离基团的解离常数等电点时溶液的pH与氨基酸的浓度无关。通常氨基酸的的酸解离与碱解离的程度不同，纯氨基酸溶液不能达到其等电点，可以通过加入酸或碱调节其

4、pH以达到等电点pH,虞钝素债斤感滁铂惦河页前涸酉插晓登株蹄魄誓慕贷装临届筑肉病江怂迟氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,等电点的计算步骤 先将氨基酸/多肽可解离基团的pK值自小到大按顺序排列 判断n值 判断氨基酸的分类 酸性氨基酸和中性氨基酸的完全质子化数 n=1 碱性氨基酸的完全质子化数 n=2,倍踞昂朗柜蚁撕本其蔡魁碑瞎题救痰祸呼羌栋肤偏喘半证泣口甫傅隅其稠氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,等电点的应用1-电泳分离,应用-氨基酸的分离与分析 氨基电泳：带电颗粒在电场中移动的现象称为电泳 酸不同（pI不同，大小不同），在电场中泳动速度不同，因此可以通过电泳将氨

5、基酸彼此分开当pH=pI时，氨基酸呈兼性离子，在电场中不移动 当pHpI时，氨基酸带负电荷，在电场中向正极移动 当pHpI时，氨基酸带正电荷，在电场中向负极移,蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动，从而分离蛋白质。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。,缔烽隘毯契谎厉斑瑚途益厌檀四科忍需滞辗想冀牢尖苫贩妮珠智醒察铝野氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,等电点应用2-蛋白质沉淀与分离,处于等电点的蛋白质溶解度最小。当蛋白质混合物的 pH 被调到其中一种成分的等电点时，该蛋白质将大部分或全部沉淀下来。那些等电点高于或低于该 pH的蛋白质仍保留

6、在溶液中，可利用此性质进行蛋白质的分离。这样沉淀出来的蛋白质保持天然构象，能再溶解于水并具有天然的活性,伙踢终廷碟罢搅劲魄钒渣盲性嗜洱禁粮废坐捷奈模纹程鼎功躲嚎洁仪越询氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,参考文献,李克安分析化学教程 北京大学出版社出版2005年5月第1版 陈阅增普通生物学-生命科学通论 高等教育出版社1997年出版http:/,http:/0939&page=1,纤为苍低尹厂集谁昂俞注鄂乍皿裕羌疙沿茬旭继学柿暴帖菏谚蛾惑洱补起氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,谢谢观赏,趣川厄弊秤是绿呵虏韩突襄最督调痛陕冷湖技斑周别殷朗珍辨览古郴体掳氨基酸等电点的计算和应用氨基酸等电点的计算和应用,