《动物细胞工程》PPT课件.ppt
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1、2.2 动物细胞工程,动物细胞培养,动物细胞融合,生产单克隆抗体,核移植技术,动物细胞工程技术,其他动物细胞工程技术的基础,2.2.1 动物细胞培养和核移植技术,动物细胞培养技术,(一)、概念 是指从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。,(二)、过程,转入培养液中进行原代培养,相关的概念:1 细胞贴壁:悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上生长的特点 2 接触抑制:贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖的现象 3 原代培养:人们通常将动物组织消化后的初次培养。,归纳:,取 的组织、器官,细胞悬浮液,酶,贴满瓶壁的细胞,单个细胞,动物
2、胚胎或幼龄动物,胰蛋白,加入培养液培养,传代培养,原代培养,思考题:,1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?,2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?,因为这些组织或器官,分裂能力旺盛,易于培养。,成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖,且细胞不能与培养液充分接触,不利于培养。,3、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?,催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。,4、细胞膜的主要成份是什么?,蛋白质和磷脂,5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?,能,6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢?,7、
3、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?,注意时间的控制,不能,因为两者的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近,1、无菌、无毒的环境,保证细胞顺利的生长增殖,(添加一定量的抗生素,定期更换培养液),(葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、动物血清等。),(四)、动物细胞培养的条件,2、营养,3、温度和PH,哺乳动物:36.5 0.5,多数细胞PH:7.27.4,培养箱中提供O2和CO2(95%空气和5%CO2),4、气体环境:,细胞的全能性,大量的细胞,植物体或组织,培养结果,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培
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