《生化的进展》PPT课件.ppt
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1、生 化 的 进 展 兴隆县人民医院 刘启明,1血清总蛋白-TP方法:双缩脲脲终点法参考值:62-85g/L操作规程:健康成人走动后血清总蛋白为64-83g/L,静卧时60-78g/L。附注:血清蛋白质的浓度用“g/L”表示,因为血清中各种蛋白质的相对分子质量不同,所以不能用mol/L表示。,临床意义升高:(1)血清中水分减少,使总蛋白浓度相对增高。(2)血清蛋白质合成增加。多发生在多发性骨髓瘤患者。降低:(1)血浆中水分增加,血浆被稀释。如各种原因引起的水钠潴留。(2)营养不良和消耗增加(3)合成障碍,主要是肝功能障碍。(4)蛋白质丢失。如烫伤、肾病综合征、溃疡性结肠炎等。,2血清白蛋白-AL
2、B方法:溴甲酚绿终点法参考值:35-53g/L操作规程:4-14岁儿童为38-54 g/L,成人34-48 g/L。附注:BCG试剂与血清中多种蛋白成分呈色,如,a1球蛋白,转铁蛋白,触珠蛋白等,但速度较白蛋白稍慢,所以用什么蛋白质作标准是一个复杂的问题。BCG与血清结合后,在30s读取吸光度,可明显减少非特异性结合反应。,临床意义升高:常由于严重失水,血浆浓缩所致。临床上,尚未发现单纯白蛋白浓度增高的疾病。降低:与总蛋白降低的原因相同。急性降低主要是急性大出血或严重烫伤时血浆大量的丢失,慢性降低主要是由于肝脏合成白蛋白功能障碍、腹水形成时白蛋白的丢失和肾病的丢失,低于20g/L时,由于胶性渗
3、透压的下降,常可见到水肿等现象。,临床意义升高:常由于严重失水,血浆浓缩所致。临床上,尚未发现单纯白蛋白浓度增高的疾病。降低:与总蛋白降低的原因相同。急性降低主要是急性大出血或严重烫伤时血浆大量的丢失,慢性降低主要是由于肝脏合成白蛋白功能障碍、腹水形成时白蛋白的丢失和肾病的丢失,低于20g/L时,由于胶性渗透压的下降,常可见到水肿等现象。,3天门冬氨酸氨基转移酶-AST方法:IFCC速率法参考值:0-38 U/L操作规程:8-40 U/L附注:a.国际临床化学学会(IFCC)推荐的方法简称为IFCC方法。b.试剂空白吸光度下降至1.0,表明NADH已下降了50%左右,不能保证ALT测定的线性范
4、围,不能再用。,c.正常新生儿ALT水平比成年人约高2倍,约3个月降至成人水平(肝细胞膜通透性较大)。d.血清不宜反复冻融,血清在4度1周,酶活性无显著变化。e.宜用血清标本,草酸盐、肝素、枸椽酸盐虽不抑制酶活性,但可引起反应液轻度混浊。f.应避免溶血,因RBC内含量为血清的3-5倍。尿液中含量很少或无,不推荐测定。,临床意义在心肌细胞内含量较多,当心肌梗死时,血清中活力增高,在发病后6-12h之内显著增高,在48h达到高峰,约在3-5d恢复正常。血清中AST也可来源于肝细胞,各种肝病可引起血清AST的升高,有时可达1200 U/L,中毒性肝炎还可更高。肌炎,胸膜炎,肾炎及肺炎等也可引起血清A
5、ST的轻度增高。,4丙氨酸氨基转移酶-ALT 方法:IFCC速率法参考值:0-38 U/L操作规程:男性5-40U/L女性5-35 U/L临床意义升高:(1)肝胆疾病:传染性肝炎,肝癌,中毒性肝炎,脂肪肝和胆管炎等。(2)心血管疾病:心肌梗死,心肌炎,心力衰竭时肝淤血和脑出血等。(3)药物和毒物:氯丙嗪、异菸肼、奎宁、水杨酸制剂及乙醇,铅、汞、四氯化碳或有机磷等。降低:磷酸吡多醛缺乏症。,5总胆红素-TBIL总胆红素包括:未结合胆红素、结合胆红素和共价结合于白蛋白的胆红素(-胆红素)。直接胆红素包括:结合胆红素和共价结合于白蛋白的胆红素(-胆红素)。间接胆红素包括:未结合胆红素(游离胆红素)方
6、法:重氮盐法-改为钒酸盐氧化法参考值:操作规程:健康成人。健康成人结合胆红素0-3.4 umol/L。,附注:钒酸盐氧化法试剂稳定、保存期长,可室温保存。Hb在4g/L以下对测定几乎没有影响。抗坏血酸在50mg/L时对测定没有影响。氟化钠对测定没有影响,肝素、枸椽酸盐、草酸盐和EDTA在常规用量对测定无影响。本法线性范围总胆红素可达684umol/L,直接胆红素可达342umol/L。临床意义TBIL增高:病毒性肝炎,中毒性肝炎或肝癌,肝内或肝外胆道阻塞,溶血性疾病,新生儿生理性黄疸,Crigler-Najjar综合征,Gilbert病和Dubin-Johnson综合征等。,6直接胆红素-DB
7、IL方法:重氮盐法-改为钒酸盐氧化法参考值:0-8.6umol/L临床意义DBIL增高:肝内或肝外胆道阻塞、肝细胞损害,Dubin-Johnson综合征及Rotor等。,7碱性磷酸酶-ALP方法:SFBC速率法参考值:40-150 U/L操作规程:女性1-12岁500 U/L 15岁以上40-150 U/L 男性1-12岁500 U/L 12-15岁750 U/L 25岁以上40-150 U/L,附注:用不同缓冲液测定ALP活性时,其参考区间不同。血清置室温ALP活性轻度升高。如室温6h,增高约1%,1-4天增高3-6%。4度,活性也缓慢升高。冰冻血清,ALP活性降低,但当复温后,活性会慢慢恢
8、复。ALP活性与血清在反应液中所占体积分数有关。从1/26降到1/51时,活性随之升高。一般用血清或肝素血浆测定ALP。草酸盐、柠檬酸盐和EDTA-2Na能抑制ALP活性。,临床意义常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断的指标。增高可见于(1)肝胆疾病:阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸型肝炎、肝癌等。(2)骨骼疾病:如纤维性骨炎、成骨不全症、佝偻病、骨软化病、骨转移癌和骨折修复愈合期等。,8-谷氨酰基转移酶-GGT方法:速率法参考值:男11-49 U/L 女7-32 U/L操作规程:对硝基苯胺为底物 男11-50 U/L 女7-32 U/L附注:红细胞中GGT含量低,溶血对测定结果影响不大。超过10
9、00U的标本可用150mmol/LNaCl稀释后再测定。血清中GGT活性,在室温或4度可稳定7天;冷冻可稳定2个月。,临床意义人体器官中GGT含量顺序:肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑。但肾疾病时升高不明显。主要用于诊断肝胆疾病。原发性肝癌,胰腺癌和乏特壶腹癌时活力显著升高,特别在诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发,阳性率可达90%,嗜酒及长期接受某些药物如苯巴比妥、苯妥因钠、安替比林者活性常常升高,口服避孕药会使GGT值增高20%。急性肝炎,慢性肝炎活动期,阻塞性黄疸,胆道感染,胆石症,急性胰腺炎时都可以升高。,9胆碱酯酶-ChE ChE分类:一、乙酰胆碱酯酶:(又称胆碱酯酶I或真胆碱
10、酯酶缩写AChE),分布于红细胞、肺、脾、神经末稍和大脑灰质。功能是迅速水解神经末梢所释放的乙酰胆碱。二、酰基胆碱酰基水解酶:(称为拟胆碱酯酶或胆碱酯酶II,缩写PChE),分布于肝、胰、心脏、大脑白质和血清,功能未明。方法:丁酰硫代胆碱速率法-测定PChE参考值:4000-11000 U/L操作规程:健康成人 5000-12000 U/L,附注:两类胆碱酯酶均可催化酰基胆碱水解,但对各种底物的特异性及亲和力有差异。测定用血清或肝素血浆。轻度溶血不干扰,但必须离心去除红细胞及影细胞。标本如无菌,PchE在室温可稳定数十天,-20度,稳定3年。血清经稀释后,PchE易失活,必须在用前进行。临床意
11、义临床意义在于酶活性降低。肝脏合成PChE,故肝细胞实质损害时酶活力降低。测定血清ChE是协助诊断有机磷中毒诊断及预后估计的重要手段。,10肌酐-CRE 方法:肌氨酸氧化酶法参考值:男性40-106 umol/L 女性40-88 umol/L操作规程:健康成年男性59-104 umol/L,成年女性45-84 umol/L附注:本法特异性好,能消除样品中肌酸的干扰。肝素、枸椽酸、EDTA、氟化钠等在常规用量下对本测定无干扰。,临床意义在肾脏疾病初期,血清肌酐常不升高,直至肾脏实质性损害才增高。在正常肾脏血流量的条件下,肌酐值如升高到176-353umol/L,提示为中度至严重的肾损害。所以对晚
12、期肾脏病的临床意义较大。,11脲素-UREA 方法:脲酶UV法参考值:操作规程:健康成人附注:测定过程中,各种器材和蒸馏水应无氨离子污染,否则结果偏高。标本最好用血清。血氨升高,测定结果偏高,溶血标本对测定有干扰。,临床意义升高的生理性因素:高蛋白饮食引起血清尿素和尿液中排出量显著升高。男性高于女性平均,妊娠比非孕妇低。升高的病理性因素(1)肾前性:最重要是失水,血液浓缩,肾血流减少,肾小球滤过率低而使血液中尿素潴留。常见于剧烈呕吐,幽门梗阻、肠梗阻和长期腹泻等。(2)肾性:急性肾小球肾炎,肾病晚期,肾衰竭,慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎都可出现血液中尿素含量增高。(3)肾后性疾患:前列腺肿,尿路结
13、石、尿道狭窄、膀胱肿瘤致使尿道受压等使尿路阻塞。减少较为少见,常表示严重的肝病,如肝炎合并广泛肝坏死。,12尿酸-UA 方法:尿酸酶-POD法参考值:男性202-416umol/L 女性142-339umol/L操作规程:健康成人 男性208-428umol/L 女性155-357umol/L附注:酶法测定尿酸的特异性高,可分为紫外分光光度法和酶偶联法。高浓度维生素C的标本,可使测定结果偏低,应在试剂中加入抗坏血酸氧化酶去干扰。,临床意义对痛风诊断最有帮助,痛风患者血清中尿酸增高,但有时亦会呈现正常尿酸值。核酸代谢增高时,如白血病,多发性骨髓瘤,真性红细胞增多症等亦常见增高.肾功能减退时,常伴
14、有尿酸增高。氯仿中毒,四氯化碳中毒及铅中毒、子痫、妊娠反应及食用富含核酸的食物均可增高.,13二氧化碳-CO2 方法:PEP-C酶法参考值:20-29mmol/L操作规程:成人HCO3-23-29mmol/L附注:在准备试剂和收集标本时,应严格做到密封,避免CO2逸散。严重脂血、溶血和黄疸标本应做标本空白:血清0.01ml+生理盐水2.0ml。试剂出现混浊或空白吸光度小于1.0时都不能使用。只能用肝素抗凝剂。草酸盐、柠檬酸盐和EDTA都不能使用。酶法测定有两种试剂盒:一种在340nm测定;一种在380nm测定。试剂成分相同,但浓度有差别。,临床意义升高:代谢性碱中毒,如幽门梗阻、柯兴综合征和服
15、用碱性药物过多。呼吸性酸中毒,如呼吸中枢抑制、呼吸肌麻痹、肺气肿、支气管扩张和气胸。降低:代谢性酸中毒,如严重腹泻、肾衰、糖尿病和服酸性药物过多。呼吸性碱中毒,长时间呼吸增速,肺泡中PCO2减低,肾小管代偿性HCO3-排出增多。,14肌酸激酶-CK方法:DGKC法参考值:男190 U/L 女167 U/L操作规程:男38-174 U/L 女26-140 U/L附注:本法线性可达3000U/L,高值用150mmol/L盐水稀释后测定,但结果偏高。最好用血清,肝素血浆也可用。CK活性不稳定,室温4h、4度8-12h、冰冻3-4天活性不变。应尽快分离血清,避光置冰箱保存。红细胞不含CK,轻度溶血无影
16、响,中度及重度溶血时,因释放出AK、ATP及G6PD,影响延滞时间和产生副反应。,临床意义CK主要存在于骨骼肌和心肌,在脑组织中也存在。升高:(1)各种类型的进行性肌萎缩。(2)皮肌炎时轻或中度升高。(3)急性心肌梗死时2-4h开始升高,可达正常上限的10-12倍。(4)病毒性心肌炎时。(5)脑血管意外,脑膜炎,甲状腺功能低下。(6)非疾病因素:剧烈运动,各种插管及手术,肌内注射冬眠灵和抗生素等。,15肌酸激酶MB同工酶-CK-MBCK是由M和B两种亚单位组成的二聚体,在细胞内有三种同工酶:即MM、MB和BB。在细胞线粒体内还有一种同工酶,称为CK-Mt。骨骼肌中CK-MM占大部分,CK-MB
17、15U/L(做测定空白)。如不做空白时,CK-MB25U/L,CK-MB/总CK在6%-25%。,附注:在某些恶性肿瘤、脑神经损伤和严重平滑肌损伤患者血清中可有CK-BB增高,或出现CK-Mt(又称巨CK2)或巨CK1(CK-BB与免疫球蛋白的复合物)。此种情况下免疫抑制法测得的CK-MB会异常增高,甚至大于总CK,结果反常,与病情完全不符合,此时必须做一测定空白,若仍不能解释结果,则需改换方法进一步鉴定。,临床意义血清CK-MB升高是公认的诊断急性心梗和确定有无心肌坏死的重要指标,特别是对心电图无Q波的急性心梗和再发性心梗。急性心梗发病3-6小时CK-MB即开始升高,12-24小时达峰值,如
18、无并发症3天后回复到正常水平。若有并发症,如梗死延展,则酶不下降。若梗死再次发生,已趋下降的CK-MB会再次升高,酶活性曲线形成马鞍型。,16乳酸脱氢酶-LDH 方法:乳酸基质速率法LP参考值:男80-280 U/L 女103-227 U/L操作规程:健康成人109-245 U/L附注:血清标本应放室温中,2-3天将不出现出现活性的丧失。标本用血清或肝素血浆。草酸盐对LDH活性有抑制。标本应严格避免溶血。,临床意义增高见于心肌梗死,肝炎,肺梗死,某些恶性肿瘤,白血病等。某些肿瘤转移所引起的腹水中LDH活力往往升高。常用于心肌梗死,肝病和某些恶性肿瘤的临床诊断。,17-羟丁酸脱胎换骨氢酶-HBD
19、H方法:紫外动力学法参考值:72-182 U/L 操作规程:健康成人72-182 U/L附注:红细胞中HBDH含量高,标本应在2h内分离血清。溶血不能用。冰箱中可稳定7天以上。草酸盐、枸椽酸盐、氟化物抑制该酶活力。EDTA、肝素(0.2mg/ml)不抑制酶活性。,临床意义对诊断心肌梗死有重要意义。健康人血清LD/HBD比值为。心肌梗死患者血清HBDH活性升高,LD/HBD比值下降,为。而肝脏实质细胞病变时可升高到。此外,活动性风湿性心肌炎,急性病毒性心肌炎,溶血性贫血等,HBD活性亦增高。,18总胆固醇-TC 方法:酶法(COD-PAP法)参考值:操作规程:酶法 理想范围:5.2mmol/L,
20、边缘升高:,升高5.72mmol/L。附注:血清和血浆(EDTA-2Na)均可供TC测定,但后者结果比前者低3%。血清或血浆置密闭瓶内2-8度保存,至少稳定1个月,-20度至少稳定一年。,临床意义影响TC水平的因素有(1)年龄与性别:随年龄上升,到70岁后有所下降,中青年期女性低于男性,50岁以后女性高于男性。(2)长期的高胆固醇,高饱和脂肪和高热量饮食可升高。(3)遗传因素。(4)其他,如缺少运动,脑力劳动,精神紧张可升高。高TC是冠心病的主要危险因素之一。原发:家族性高胆固醇血症,家族性apoB缺陷症,多源性高TC,混合性高脂蛋白血症。继发见于肾病综合征,甲状腺功能减退,糖尿病,妊娠等。低
21、TC血症。原发见于家族性的无或低脂蛋白血症;继发如甲亢,营养不良,慢性消耗性疾病等。低TC者易发生脑出血。,19甘油三酯-TG 方法:酶法(GPO-PAP法)参考值:男 女 操作规程:理想范围内1.7mmol/L附注:a.血清和血浆均可供TC测定,但后者结果比前者低3%。b.血清或血浆置密闭瓶内2-8度保存,稳定1周,-20度至少稳定数月。c.血清中的游离甘油(FG)会干扰测定。FG增高的原因很多,如某些疾病,代谢紊乱、紧张、静脉营养,接受含甘油的药物治疗以及注射肝素后均可显著增高。,临床意义高TG血症 原发:多有遗传因素,其中包括家族性高TG血症与家庭性混合型高脂(蛋白)血症等。继发:见于糖
22、尿病、糖原累积病、甲状腺功能衰退、肾病综合征、妊娠、口服避孕药、酗酒等。一般认为单独有高TG不是冠心病的独立危险因素,只有伴以高TC,高LDL-C,低HDL-C等情况时才有意义。,20高密度脂蛋白胆固醇-HDL-C方法:直接测定法参考值:0.83-1.96 mmol/L操作规程:理想范围:1.04mmol/L 降低 1.55mmol/L被认为是冠心病负危险因素。降低也可见于心、脑血管病、肝炎、肝硬化等。高TG往往伴有低HDL-C,肥胖及吸烟可使HDL-C下降。饮酒及长期体力活动会使HDL-C升高。,21低密度脂蛋白胆固醇-LDL-C 方法:直接测定法参考值:理想范围:3.64 mmol/L操作
23、规程:理想范围:3.64 mmol/L临床意义LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素。,22淀粉淀粉酶-AMY方法:GalG2CNP速率法 底物不同结果相差很大参考值:血清15-115 U/L 尿液450 U/L操作规程:亚乙基4NP麦芽庚糖苷法.健康成人血清200U/L,尿液1200 U/L附注:试剂起始吸光度不应超过0.120,而且在波长405nm的改变应于0.0005/s。葡萄糖55 mmol/L,三酰甘油25 mmol/L,胆红素500 umol/L,抗坏血酸1 mmol/L,Hb2.5g/L不干扰测定。应用血清测定,若急用血浆应用肝素,不推荐其他抗凝剂。,临床意义AM
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