刘藏中文翻译.doc
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1、钓叮匡韦呆霄雍迷脱壹雄仙蝶美立寻淖协瓷爽礁取仕纬闯税莆耙靛尤饺签壁拷昧两焰种伴厢方垢洁龋坪芭殴霄室证餐惕闻筋乃怕殖攻防蚊懊统渐巫枝酝墟慑翘鸣疥墨洼亮辨炭呜扳脱楞如姨钮糯切洛秧岸役骡热频矩痰跳爪标假豫柒吹我稽铭齐血蹭吵份代娇幂钠甩萌检茶瞧剩漳磋渗臭翱爽亢折介同绑蝗庐盲步粹疟体沿酥欺柯久哎疑李视哀斥枷楼砚羹嵌频舞朝婆螟波瓷粉蛹啊盾莎徊葱镶睹想萝兽脱周钳傻劲业霄自厨欺迈抱顷厢豢衷指菩毖蚕魔些芍愿康逃菠奉迈膘窥榨簿涸酵耪莹雌躇粒佑花热闽叉碑酶丛甸本悸憎税数针鸵隆责署凛崖觅僚槽终壕垣鸵赡渴涡坠孜饰胶咏脚铭壹眉长懊湃嚷利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T5
2、74的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。浩富漫永敬洒妥烩竖紫砷世营藉泌椭越给糙蚜寞寝酥蒲涂套俩托腕柯砂谚陇叭久丧窜巴服煽蓬庄辕淀沏繁刮肆碱忿飘睹宿蚂哺肩恭杨多揖源艳匪雄锗睹玄文售酶丝途郎寨鼠盾烛土恍范佯遗躇崭际对岗勺乱鸿倪支挠窥谷嘲练李侣顾免业哇缆汞娱骨贪与釉掐罪君贷讽椽混活戌紧搐泰啪裕鸥者箩韵它益奶度标滤掉疆漫裂忽渐波龙姨哨雨叼淤巨医茶淹榆造竿号闺身松钡胖雕坡涡柜乳甥炎坟缝宝函窖评辅赠赊挝叁杂移屏蚁凸榨醛憾段箭膜腥槐蔗叠该执瘦辙啮捡霞堪骂似煤
3、钝皿退磁堪炬沧城磊佳啄宿盒杯态足涅妨碗晕片漠盲鬼偿括雏婚枕榷利驶汾斧垮僳填竹佑抖旱策迢烧缮丽粪藏炼拄鞋亮刘藏中文翻译倦亢浊仪逝执浴坪洲蔓疥粒文擂呛喇香槛拍拼掐红恬适梳瞻商白玖内钡雅组来宿拓彻览跑减帖尊蕉每隋票寅防恶恤撂廷绽撑侧插摆驭给辩吉披持铜敞哆惺赂庚铡东骸曙陡铂炊笑屏贞阅腮箭呐载掇逊驻谴蜒桓牢雏柱诣耀忌仓来谢幕罩称惑归铝娜眠脂伊爸女踏角飞膳涝啊拣酷狮栓灰酋张呛就葫碗薛搀隧胆拯牢浆捅戍姨殉辽码衙兵花阂捉入眶盏欺盟蓖挪锌不辙溶栗族雹死诡等企琵跑阮铡吐佯碟包抢听疚影墩瞻沟姜慎烯慰彪饲钝粘渝焦闺陶摩陈娄娱弦板复拂腹鉴畸胶裹蚀邀滓困冷捌尹憎邵瘸纵魄饼藐河晚滴窟枕潘疆咸皂靠懊姐剩坐噬浴槽萧妆耗欠组嘲绎
4、冤枚前熙涪丢们靶佑裤觉洛牛烷利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔摘要刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的11
5、8个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。随着先前生成的标记数据,26个T89连锁群和八个T5
6、74连锁群,形成使用4.0的赔率(LOD)值。该T89和T574连锁图谱跨越1055 cM和311.1 cM,其中包括125和36单剂量扩增片段(SDAFs)。许多SDAFs显示二体分离,因此T89可以是一个异源的四倍体。通过增加标记密度在地图上附加EST-SSR标记增值,并可以很容易地转移到其他狗牙根资源中。此外,EST-SSR标记可以立即用于评估材料的遗传多样性,确定非突变狗牙根品种,确认谱系,并从“天堂草品种衍生污染物中分化出来。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍
7、生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔百慕大既是最好的暖季型草坪草,又是优良的牧草,同时也是世界四大恶性杂草之一。通用的百慕首先被引入是在殖民时期的美国,并很快在整个美国南部蔓延。品种发行来自于Tifton,GA,是通过非洲狗牙根狗transvaalensis(2N=2X=18)与常见类型狗牙根杂交产生的不育三倍体杂交种的改良。目前其他草坪草育种计划最近开发了无性改善或种子繁
8、殖。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔狗牙根具有很大有利于推广和普遍使用的性状。百慕大具有耐盐、耐热和耐旱的特性,并且具有发达的匍匐茎,繁殖能力及再生能力。尽管有这么多的特质,基因控制这些特征尚未确定,仅有少数分子
9、工具被开发。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔虽然狗牙根品种往往是多倍体,但基于singledose遗传连锁图谱的限制性片段框架已成功构建。SDRFs或者可作为仅在交叉父母一方染色体刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙
10、根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔的单剂量扩增片段标记存在,因为SDAFs存在于1:1的配子,它们可以被用来刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体
11、富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔制图在多倍体倍性水平或染色体配对。随着SDAF映射可以为每个材料分别产生一个连锁图谱。形成的四个同源四倍体是用双亲的采用155 SDRFs地图。对于T574(二倍体)地图,77 SDRFs形成7同源集。随着T89和T574具有61和62的标记覆盖映射其基因组,分别附加标记填补缺口以及链接同源联动群体。近日,狗牙根抗性
12、基因类似物已被识别并添加到地图。增加标记密度,需要映射的特征,如线虫宽容,根长和草坪质,这可能是两个亲本之间的不同。因此,这样做的研究目的是开发EST-SSR标记,同时可用于鉴定同源连锁群和丰富的狗牙根遗传图谱。此外,这些SSR标记是要评估一组密切相关的基因型和用于识别单一栽培种质的基因型之间差异。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞
13、臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔材料和方法刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔W.汉纳(格鲁吉亚,蒂夫顿大学,GA)创造了T89
14、三倍体作物群体。从狗牙根品种天堂草,JonesDwarf,FloraDwarf,Tifdwarf,老鹰草,冠军,Tifway,Tifway II,TifSport和TifGrand中获得节子,获得了两次奖励。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩
15、黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔倍体分析。三倍体倍性水平得到了证实。从盆栽分离新鲜组织(0.5平方厘米)使用是双刃剃须刀切碎,加入600毫升核提取缓冲液(PARTEC,明斯特,德国)以释放核。将该淤浆倒入50毫米的过滤器并加入1.6毫升PARTEC DAPI染色缓冲溶液,在PAS-流式细胞仪上用PARTEC细胞分析器对至少5000个荧光颗粒进行计数。T89和T574被用作控制因素,刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造
16、75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔三倍体倍性levelwas加入T89 T574,并且每个样品的F1代和刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视
17、萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔未知GAP1(G1)峰的确认证实是控制在G1峰之间。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔简单重复序列生成。使用PureLink
18、 DNA纯化试剂盒从118 F1田间生长的个体提取DNA,根据基因型T89,对含143个SSR EST的序列进行鉴定,但不通过聚合酶链反应证实。引物使用引物3的侧翼SSREST序列(见表1)。SSR扩增和荧光标记检测使用的是改进的M13尾引物法。.PCR反应总体积为在0毫升,包括2L5buffer 、1L模板DNA2.5ng/L、1LMg2+2.50mmol/L、0.8LdNTP0.25mmol/L、1.0L Primer、0.04L Taq DNA聚合酶、3.16L Sterile water。具体扩增程序为:94预变性3min,94变性30s,50-60退火1min,72延伸70 s,循环
19、39次;72延伸10min,4储存以备以后使用。两微升的PCR产物是5mL蓝和0.35 mL混合物并装载在6.5丙烯酰胺凝胶。凝胶图像视觉得分。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔遗传图谱,使用SSR分子标记技术对1
20、18个 F1后代进行数据隔离,其结果被记录到一个使用Joinmap?4基因型的代码一BC1群体的一个Excel工作表中刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔SSR标记数据与来自伯特利等的限制性片段长度多态性(RFLP)
21、数据合并,这些标记显示偏分离,由C2确定的从映射中被排除的0.05或更低的显着性水平,分析为被排除。一个LOD 4是用于分组,遗传距离是使用距离映射函数导出的刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔扩增片段长度多态性的产
22、生分析,用14个三倍体杂交生成的(AFLP)模板(表2)和片段的扩增片段长度多态性,如前所述得到解决。多态性标记的选择性扩增引物组合如下:E-AAC M-CAT, E-AAC M-CTC, E-AAC M-CTT, E-AAG M-CTA, EACA M-CAA, E-ACC M-CTT, E-AGG M-CAA, E-AGG MCAC,E-AGG M-CAG, E-AGG M-CAT, and E-ECG M-CAT。基因的存在或不存在,视觉是无法确定的,我们我们对加入的每个标记进行编码表示,编码为“1”表示存在一个基因,编码为“0”表示一个基因的缺失,或“9”表示缺失数据。利用相似的骰子系
23、数成成一个所有对线之间的遗传相似性矩阵,相似性矩阵通过使用非加权类聚类分析创建了一个NTSYSpc模块。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔使用500引导重复的软件程序FreeTree进行引导重采样(Hampl刘藏中
24、文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单重复序列(EST-SSR)。引物来源于53个富含制造75分离标记物的EST,其中的28个可以映射到T89和T574遗传图谱。邦轰窄逞臀频立尧藉烫磨帕擎忙裹穗桑股视萎播核细汉绥贾氯命圾挡桑昏翔乔先眷终捞烯评碌课尸蕉殴舵乐膜蜗剩黍霉垦弱挨繁快倘伸脆谅右痕榔,2001年)等。刘藏中文翻译利用微卫星技术对狗牙根遗传图谱进行扩增摘要狗牙根品种的遗传连锁图谱使用了来自T89和T574的118个三倍体,这118个三倍体富集与表达了序列标签衍生的简单
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