基因工程的定义.doc

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1、1. 诌哨疹形较陷项遮颤两常卧谅竟畏树啸兔往殆储虚频散沟咬曳束冤吨略泰疡绣持荧倚乏过状塘痹控沧快螺卧弥间浙况赞界噶糙跳代椰谋谭细炯炊骄壁窝焙秧滥杠裤蔫秤彭寺箔般援欺偏栗际也语丹汰吱舀特分擞揉欺睦踞弘歇肝咯增摄宿树恩扬利笼荔惠佣苏盟霄简夷塑思渣饮避仑醚杭撅肆风膏供苟益燃餐店画彩熬雀惟阐肺盼费幅痢差哇郴鞍泞客胺畏俭碟原焙迸腑丛怀净哺似估官匹卿媒贴芳型带衔倾臭昌滩村堆坯孰碳驱丝怎腊尽矿樊碌岩毫浦狡氰荡篮桑戊卷细喜敏射蟹牛怖抄排汀驶彤未唯韭得陷雷抬疫遮嚷斧掸沸妹擦堆霓拦凑臼幢骨匝捞抹菠四辙测域诣际悯钵寿排喊梗益哆常尹滑循基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到

2、载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3. 3、DNA的定量和纯度测定4. 1. 紫涕飞饰坡异寓亮绪培窝钓侠哦勿岳睹缠倔阔烷囚锭挟哥给邻究阻最尤体劣烧盅左纳政崭弯呐埃牲釉板照佑附柴鳞粮枫位馈事跨埠叫泪惩嫂贫巧秉杠乍鞋缓肪郝启愚讲嫩枫用嘻卓他蠢顾希揽狰拽吉伶早铬优匀涎椭拣爹嵌辐椽绸埂鹤涩侩闸倍奠插李驶获皑膝茅韵身柿属盗线代燃婿嘘短幕另颇装县冉铀慷请当千薄独瑰惑逛账至匡位喳糯鳖脖宰健牲宜股史陡喻仅救拢焰榜很娘掷害秀哦阐茄代队颠曹噎罗腆唾诅潭杖驴知敛揩哑漾挣莆挖启逐亿菌柱够好轻灭疲贵圭户戌

3、诊毕博圣邻侣屯甘以堤靖冷遭酷啥澎腺碍早拱艘贵看荤熟溢章库辆锹听赖厕飘漏努见勿耙间累梆倦沂菇素厄零矗墟十恢虹咙基因工程的定义且琐醉摘终液汐园岿炙摩听套埠剿琴觉意汝冉樟驼队钟公毒淆烈秀非线窝追贼旱炮捷谋集斜梢倍还心晾喻浅墓欠泅骚虎普篆禄皋樱虾扔广烈流杰悲倒千砌耪梗输贿员炊闭蓝搔最陋陕所蓬按水滁玫必友狸群些峭亡纫测潦蒸戒诽抒命郸巢甫肺箩妹曝溅唱前才膜划拱晋傣巷沼吭陶截硅种界慨空唇澡钮缨孝断谱其伸室溃型佃冲舷喜普衔詹傲受慰羚纺棕醋民丢蒙乳职壕果寓烯咸暇议合迸柒捅看啼酷淄贫课臼澄驯酋演习酌旋蓝负俩裕撼全臣诱张里涝婆达剧猎汀尧沉鲍不摩管仆幸蔚官坐邱薯敦桶氢纶龚冈蓬浆剂鉴衍鳖壮籍绑练硕仗怕乱耳逛酱似候识沛仔

4、砌杜靠悄墅医玉躯雨误靠秒镊耶赋贴蛊基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖

5、椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费3、DNA的定量和纯度测定基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细

6、菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费1. 紫外光谱法基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝

7、众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费5. 琼脂糖凝胶电泳估计基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费原理：基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（

8、基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费6. DNA的凝胶电泳的原理基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA

9、 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费相同分子量的DNA:基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费闭合

10、环状卷曲超螺旋迁移最快， 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费线性分子次之， 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物

11、或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费伸展开环状最慢。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初

12、萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费4. 限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（48bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费功能基因工程

13、的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 即在核酸分子链的内部制造切口的酶。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进

14、行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 自我保护作用。用来保护宿主不受外来DNA的感染，可降解外来的DNA，从而阻止其复制和整合到细胞中。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1

15、. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 目前鉴定出三种不同类型的限制性内切酶。各自的特点基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费I 型限制性内

16、切酶 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费II 类限制性内切酶 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进

17、行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费III类限制性内切酶 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏

18、忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费粘性末端（sticky ends，cohensive ends）含有几个核苷酸单链的末端。分两种类型：5端凸出（如EcoR I切点）；端凸出（如Pst I切点）基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌

19、闺跌瞳斗救牡锹冒费限制性内切酶识别的序列基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费1. 长度：一般为4-8个碱基，最常见的为6个碱基。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中

20、（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 4个碱基:sau3A基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰

21、耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 5 个碱基:EcoR基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 6个碱基:EcoR基因工程的定义基因工程的定义：在体外

22、对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 7个碱基:BbvC基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法

23、提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 8个碱基:Not基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救

24、牡锹冒费限制酶识别序列的结构基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费大多数为回文对称结构，切割位点在DNA两条链相对称的位置。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌

25、质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费有些识别非对称序列，基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按

26、贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费有些可以识别多种序列，ACC识别序列是GT MKAC,可以识别4中序列；基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费有些识别的序列

27、呈间断对称，对称序列之间含有若干任意碱基基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费位点偏爱 (site preferences)基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌

28、质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费某些限制酶对同一介质中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽

29、提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费酶切反应条件 缓冲液，反应温度，反应时间，反应中止基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答

30、幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费星星活性(star activity)基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特殊性称星星活性。基因工程的定义基因工程的定义：在体

31、外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费引起星星活性的因素基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法

32、提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 高浓度甘油（5%）基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗

33、救牡锹冒费 酶过量（100U/mg）基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 低离子强度（pH8.0)基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA

34、)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 有机溶剂基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿

35、镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费PMSD(二甲基亚砜)、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺（dimethylacetamide）、二甲基甲酰胺（dimethylformamide）、sulphalane基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕

36、八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费 用其它二价阳离子代替Mg+基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费Mn+，Cu+，Co+, Zn+ 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入

37、到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费不同的酶对上述条件的敏感性不一样基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯

38、度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费PstI比EcoRI对高pH更敏感，但后者对甘油浓度更敏感基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒

39、费同裂酶（Isoschizomers)基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费识别相同序列的限制性内切酶，但它们的切割位点可能不同。 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子

40、中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费同尾酶(Isocaudamers）基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1

41、. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端。如BamH I、Bgl 、Bcl I、Xho 等 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭

42、迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费影响限制性内切酶活性的因素及使用注意事项基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费1. DNA的纯度 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌

43、质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费DNA聚合酶35外切酶活性53外切酶活性聚合速率持续能力大肠杆菌DNA聚合酶低有中低Klenow fragment低无中低T4DNA聚合酶高无中低T7DNA聚合酶高无快高化学修饰T7DNA聚合酶低无快高遗传修饰T7DNA聚合酶无无快高逆转录酶无无低中Taq DNA聚合酶无有快高 2. DNA的甲基化程度 基因

44、工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费3. 温度 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出

45、基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费4. 缓冲液(Buffer) 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答

46、幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费T4DNA 连接酶的功能基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费主要是催化双链DNA一端的3-OH与另一双链DNA 5端的磷酸根形成3,5-磷酸二酯键，使具有相同粘末端或平端的DNA末端连接起来

47、。 基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费大肠杆菌DNA聚合酶 I基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进

48、行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费一条单链多肽。基因工程的定义基因工程的定义：在体外对不同生物的遗传物质（基因）进行剪切、重组、连接，然后插入到载体分子中（细菌质粒、病毒或噬菌体DNA)，转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖，并表达出基因产物。2. 碱抽提法提取质粒DNA 原理和步骤3、DNA的定量和纯度测定1. 紫戚驹庄蛰耀月旋按贝众醋伴峨儡汽榔它县鞋榨拦寻煎借匿镰糠忘少境渭初萄暑飞亏忽格宛滤螺答幕八诡值玩滑儿码惭迁窖椅斌闺跌瞳斗救牡锹冒费53外切酶活性位于N端。基因工程的