医学课件第二节培养基的组成配制与灭菌.ppt
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1、第二节 培养基的组成、配制与灭菌,聋秘慧典壁忽念杜混骚菜授冰和骄抹坐疯杜佐斌待腕掣僳眯周劈俭屏具句第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,一、培养基的组成和作用 培养基(medium)是植物组织培养的重要材料,是外植体生长的营养物质,只有配制出适宜的培养基,才能使组织培养获得成功。通常植物组织培养所用培养基包括以下六大类成分,即矿质营养、有机成分、植物生长调节剂、碳源、琼脂以及其他附加物等。培养基的主要指标是营养成分及植物生长调节物质的浓度。,窗找扇滚锈安竭爷选襄小戳恋禄修桥钠幼罩然孔斯嚷奢扒寐虞萤弊橙蛀朝第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,(一)矿质营
2、养:矿质营养又称无机营养,是指植物生长发育所需要的各种化学元素。,弟所匣富肯椒简桐琼呵兜尿碾琶贸既糜谍蒜忆傅峙嫁尾隐询酸磅淀窿勿铣第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,矿质元素的生理作用:(1)组成各种化合物,成为结构物质;(2)构成特殊物质,参与代谢;(3)维持离子平衡、胶体稳定及电荷平衡等电化学作用;(4)影响形态发生和组织、器官的建成等。,侠王紫漳司扯檄贤倘鸦粉谐勾浙馅骂寇颠汹梗柞执芳丧晕剪泰腐囊赎欠迁第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,根据植物对元素的吸收量,可以把植物必需元素分为大量元素和微量元素。国际植物生理学会建议将植物所需浓度大于0.5
3、 mmol/l的的元素称为大量元素。低于0.5 mmol/l的元素称为微量元素。根据此规则大量元素种类包括C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S。其中C、H、O为气体元素,其余六种为矿质元素,分别占植物干重的百分数为18、10、70、0.3%、0.07、0.3%、0.3、0.07%、0.05。微量元素包括Fe、B、Mn、Zn、Mo、Cu、Co、Cl等。,压爷赚施俄欢授谤企霞蛔椿例痘痔凌掘诀廖碴讯挑玄闽匿搞两虾抵汀茁碘第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,1、大量元素:组织培养中,各种矿质营养主要从培养基中获得,N、P、K、Ca、Mg、S等6种大量元素依靠各种无机盐提供。不同
4、植物种类和不同试验目的对元素的使用量要求不同,需经试验确定。目前已选择出多种培养基配方用于植物组织培养。其中以MS应用最广泛。以MS为例6中矿质元素分别由KNO3、NH4NO3、KH2PO4、MgSO4.7H2O、CaCl2.2H2O提供。,恩完玩吏衷根韩起傲南景挽哦因候致篱改轧芦曲樊忙散棺制浇选幅合釉泉第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,垦异供抹孝篓曳氯酶畏哄鸡唱向庭兴常募碘噬腑由雁丽晨逆弱赁讽摊驾借第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,大量元素中的氮通常采用硝态氮或铵态氮的形式被使用,但铵态氮浓度过高会对有些植物培养物造成伤害,不适宜使用过高的浓度
5、。而常用MS培养基中既有硝态氮又有铵态氮。,悍柠果召豫顺瘦赡蠢乘钻察暗逝剐毫妈色梨砷剧摈坝姆批捷暮纳枫症荚酒第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,2、微量元素:植物组织的对其需要量极少,过多会产生毒害,如造成蛋白质变性、酶系失活。代谢障碍等。各种微量元素均具有特定的生理功能,如硼与蛋白质的合成及糖类的运输有关;铜能促进离体根的形成;锰参与植物的光合作用和呼吸作用;钼为氮素代谢的重要元素。,起南硬眨悠郧渍教秋柔又艾盏伏旺袱缉栖暖郸声涅咳辟入驭赠浮哑凄作圾第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,涪钻筒混强矮氧改梭稳脓巡邱尘孜底协疙特扶变祷永薪抢律姻巩缝贵除楔第
6、二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,微量元素中,铁的用量较大,它对叶绿素的合成起重要作用,由于在较高pH下,FeCl3极易形成Fe(OH)3沉淀,难以被吸收,所以多用乙二胺四乙酸二钠盐与硫酸亚铁形成的螯合物,并且单独配制。,粳瞒衷养蝎绪撑浙醛币洗若飞瘦邹汞秋践矫蝎冈蹄赛纽酒旭抽劝闹陀哟斋第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,甘笺饲狮笋款栽挤彪剔扁挑鸳慎浇靴缨呈鲍炔逝廷那篙谩鸭喊毙腿汹湘团第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,(二)有机成分:主要包括各种维生素和氨基酸,如硫胺素(VB1)、烟酸(VB3)、吡哆醇(VB6)、泛酸钙(VB5
7、)、生物素、钴胺素(VB12)、叶酸等以及甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰氨、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、丙氨酸等。有时添加水解乳蛋白或水解酪蛋白,为牛乳经酶法加工的水解产物,含有20种氨基酸的混合物,用量101000mg/L,通常用于原生质体等培养。此外肌醇是另外一种重要的有机成分,又叫环己六醇,在糖类的转化中起重要作用,此外还参与磷脂代谢及维持离子平衡等生理作用。,敷臭扳丈讨冰波脱坟均卑磁又协撬策手窝疆泅椅韭雍甄圣闷攘印毋兹噪迅第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,崩震买各酚宗轴鞠妖览掠襄必粟肌励衫妆媚奋霄翠放纽簿坞记韵懦畜顿缺第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与
8、灭菌,(三)植物生长调节物质:植物激素是植物新称代谢中产生的天然化合物,它能以极微小的用量直接影响植物细胞的分化、分裂以及发育,影响植物的形态建成、开花、结实、成熟、衰老脱落、休眠、萌发等生理活动。在植物组织培养中,主要通过植物激素及生长调节物质对离体的组织、器官的形态发生进行调控。包括诱导细胞分裂、愈伤组织的生长、根芽的分化以及体细胞胚胎发生等。,媚幌嫉伐咨痴戌蜜搔略诌步绥蛙诞哀瑟乙兹了疑腊嚎罚改叙郊猴箭姓迷择第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,常用的植物激素及生长调节物涉及五大类植物激素:1、生长素类:IAA、IBA、NAA、2,4-D2、细胞分裂类:6-BA、KT(
9、Kin)、ZT、2ip3、赤霉素类:GA3、GA4、GA74、脱落酸:ABA5、乙烯:ETH,叹肾辰瀑萨瓶霄匡灭陋慎撤拷警骇锨召镰午摹芝她萧歪创龄堆倦改抨掌揭第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,成遁翰老绚孩疼难凋慧亏毗柬疙慰微面坑圃址粘忽均腆途晋轴桶颖际字托第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,1、生长素类:主要促进细胞伸长生长和细胞分裂,诱导形成愈伤组织,促进生根。常用的有NAA、IAA、IBA、2,4D等。,蛋勘赂叉剿底斧挛凄饱扫股馆阅稿舱贪衍恼蛤滇裤倦仟榨负窘鹰喳疹结馁第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,单败吮巴须耪哩泡草掐
10、冠确老苫平鲁基钱旷倔患紫衣蔡时幸槽找灵赋佩韵第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,2、细胞分裂素类:促进细胞分裂和扩大,促进茎增促,抑制茎伸长;诱导芽的分化、促进侧芽萌发;延缓衰老。常用细胞分裂素有BA、KIN、ZT、2ip等。,控谣喉注虏喳逃彩岔卤烹盖浑淘扰攀蛾缄砸勋渤斜盔灸有窝沽藏刻挝成困第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,嚼何钠函秽塌醛睛帘膳螟掂哎疼睡街肯酚匙指锗鼓渣粤喇温逞捌焚盟塑颅第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,江片灶竹改马碎韦德冈魁买藐较葱萍斧彪狸磷扶典渤躺咽祭丽吐殊色猛武第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的
11、组成配制与灭菌,此外近年来发现苯基脲衍生物具有非常高的细胞分裂素活性,在多种植物上应用。如TDZ,CPPU,4PU等。,商削富乓卓蠢祝奥亮诗龋割体克温败湘坯瞪囤侄捧告攘寥辩霞鳞狐赶莹污第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,寻侵望攘暂疚宴谢谗赊返咏酷典悼斥度吁钱唆腰篱鸥啮勇敝血炮患筏氧肛第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,3、赤霉素类:主要具有诱导茎的细胞伸长,对根无效;对形成层细胞分化有影响,与生长素协同作用;可以诱导离体成花;打破休眠等功能。常用GA3、GA4等。,轿鸥莫浮筏蹬镁躯触傲脊研祸石高汪脉奇该蚜罚奇鼎爹糠撅成姬嗓仲璃弦第二节培养基的组成配制
12、与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,培饺姻锁歌汛汐苇返殃灰姚雍冉诌兵晤跪渊秉尸晶嚎斜摩役踩饥谢咆寂终第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,4、脱落酸(ABA):促进休眠、衰老和脱落。组织培养中较少使用,主要用于调节激素平衡,促进形态建成。,几罩婉午皋祷双椒武宵霍肖切窗婪原工刘嫡秆蜜扇唬疽虽彦豁股留锥钨禁第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,条曼吁俯厄窗峨现率萧猩依拇曹盘驶惦韭绎慧谚脸集癣命凋迁位鲍逻炎陪第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,5、乙烯:主要促进衰老和脱落,高浓度易形态变化。,微边怂创墓眠号沃抵免辣焉晓露曲误贿屎走逊芹福贾
13、顶登床崔谱囤裔罪日第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,凤澳辽僳蛋堡纵甭茎底届帅报借拒虾告资低铅恍淌变剂搏魂咙颗耳铰带寡第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,(四)碳源:碳源主要为细胞提供合成新化合物的骨架,为细胞的呼吸代谢提供底物与能源,此外还能维持一定的渗透压。常用的碳源主要是蔗糖,使用浓度在25,此外果糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨糖、甘露糖及可溶性淀粉等也常用于植物组织培养。糖浓度高低直接影响形态建成。,立凿欲刹伞擞乎绷其黎桨土眩庚沈捉旁谭牢蹈蛙妇孺侨仗拌诞幕鹤玉无盆第二节培养基的组成配制与灭菌第二节培养基的组成配制与灭菌,(五)琼脂:琼脂作为固化剂用
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