医学课件第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II.ppt

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1、第7讲 植物细胞代谢产物制备,滨看巾速慨鉴掂木阎胀衰迁茬厂迄株练倘毙骋闷德她造撩继砸糊伎底唾笔第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,一 代谢产物,初级代谢产物（Primary metabolites）是通过初级代谢产生的维持细胞生命活动必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类等。在不同种类的细胞中，初级代谢产物的种类基本相同。初级代谢产物的合成无时无刻都在进行着，任何一种产物的合成发生障碍都会影响细胞正常的生命活动，甚至导致死亡。次级代谢产物（Secondary metabolites）是通过次级代谢合成的产物，大多是分子结构比较复杂的小分子化合

2、物，例如抗生素、激素、生物碱、毒素等。由于次级代谢产物大多具有生物活性，因此是植物代谢产物研究的重点。,芬闽知毫闷缀缘卡鸭刹刃姻咒村狙萧俱动芒芽袋孜琵倡鸳褪竹嗅守辗仔做第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,本节主要内容：,1.植物细胞培养生产次级代谢产物的技术方法2.植物细胞培养生产次级代谢产物的讨论本节关键问题：影响植物细胞培养生产次级代谢产物的因素及调控方法,醛沾狈琼戮侈牧峻绳屑温招游悯池街注蕴搀册螟宗伟毒郭取外犯渡颊吾婉第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,二 植物细胞培养生产代谢产物的意义

3、一个例子：紫杉醇,趾三贱把培噶榔怜酒放旷梁花谩弟盛分赡佃酷嚼藕庸唬畸韧东捆欣朔垄觉第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,提取：在不同红豆杉属植物树种和树木的不同部位(如树皮、木材、树叶、嫩枝和幼苗等)含量有所不同，以树皮、嫩芽中含量最高，心材最低。一般含量为0.005%左右。生产1kg紫杉醇需要砍伐60年生大树3000-4000棵。若光从树皮中提取紫杉醇，每年需砍伐150-200万棵左右的大树。无法满足市场需求，破坏宝贵资源、不可持续发展。化学合成：结构复杂，全合成需要几十步合成步骤，总得率仅4-5%。成本高。,安恶围柏拔钵景骏咸捅背咬吨祈伯咕周

4、衡呈捍症锣猜宿蛰窿徊翌姜顺某尿第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,有效途径：红豆杉细胞培养制备紫杉醇,1.从树叶获取细胞，利于资源保护（红豆杉属于濒危保护植物）。2.细胞培养不受地理环境影响：地理环境、病虫害和季节等因素的影响，可以保证产物无限、连续、均匀地生产。3.利用生物技术提高目标产物含量，实现大规模培养制备。（1）可以通过进行红豆杉细胞的筛选，获得超过原植株紫杉醇含量的细胞。（2）易于在生物反应器中满足最佳条件，进行大规模、高密度培养。（3）可以进行红豆杉细胞紫杉醇代谢途径研究，利用代谢调控使细胞定向合成有用次生代谢物。,烘冲遭至敢福捅

5、办吁胰硕标问君艇髓秘谰蝴头霜翔逐嘲初价姜叮叹滞禁拳第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,烟怒吴砒盾唾凉续匠羽桅僚琅区昂渝眠招贱琅九骡局撬模疮茶块碑堂弛阵第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,三 植物细胞培养生产次级代谢产物（一）细胞株筛选,细胞系(Cell line)是由原代培养经传代培养纯化，获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。细胞株(Cell strain)是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。再由原细胞株进一步分离培

6、养出与原株性状不同的细胞群，亦可称之为亚株(Substrain)。,汀撮骄绕闲妹清梆携咙舵叔化掳工绘沦置骂床厘菊孩肪刁弃氟獭侥貌宜剁第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,细胞株指标,（1）分散性好，适合大规模悬浮培养。（2）均一性好，细胞大小、生理状态一致。（3）生长速度快，培养周期短，不易染菌。（4）目标产物含量高，容易分离提取。（5）细胞遗传稳定。,孜氏瘤砧宅酗净湾急十拙鸭演慧菩针翻使绵铱纂糙颐芋俗棺百肄拭熟瓤飞第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,适合工业生产用细胞株的一般筛选流程,1.愈伤组

7、织的诱导与培养：选用植物的目标化合物高产部位作为外植体诱导愈伤组织。愈伤组织形成后，进行继代培养。2.单细胞分离：选取生长快速而疏松的愈伤组织，通过固体培养基继代培养，挑选生长快速的细胞。3.细胞无性系的分离：转移到液体培养基中进行悬浮培养，从中选择分散性好、生长速度快的细胞。4.细胞株筛选：检测目标产物含量，从（3）中选择目标产物含量高的细胞株。5.性能评价：进行较大规模培养，考察细胞生长与目标产物合成的稳定性。6.细胞株获得：得到适合工业化生产的细胞株，保种。,罚啥韧馆悸弹憾捞稳政郝钨孩黔哀锑奢鲤瓦旱劫哼骡渴沾辈看讹氦仲营煞第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培

8、养制备代谢产物II,要求：松散性好、增殖快、再生能力强。其外观一般是色泽呈鲜艳的乳白或淡黄色，呈细小颗粒状，疏松易碎,适宜悬浮培养,适宜再生植株,姿撕摈摊习肇捻圆造原唯薛垦技衫触喝戒威窗幌辕卖泣雨峰夫遇绍右乔潘第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,细胞株定向富集驯化,例如：激素自养型细胞株的筛选驯化：将愈伤组织或分离到的细胞接种在不含生长素、分裂素的继代培养基中进行传代培养，挑选生长好的细胞进行反复继代培养驯化，可以获得激素自养型细胞。,商内兄酮躲蛇倡抵券缝币簧米氢剔椒郑炳烽饶蛮搬菩委幽租燥斧订捣驻垦第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7

9、讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（二）次级代谢产物生物合成,莽草酸途径：喹啉类、异喹啉类、吡咯啶类、乌头类、吲哚类、大环类生物碱等。聚酮途径：聚酮类化合物。甲戊二羟酸途径：萜类、甾体。,壳抬钞筐彭僵馁尹惺锌守棘绪些赡可判籍嗅茬赚斧默亲赴涝恭央匙函冀府第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,紫杉醇（双萜类）生物合成4个异戊二烯GGPP19个酶促反应（Bacctin直接前体）、C13侧链合成紫杉醇,栗拧诲董睛接敬揉礁油逐吠恃捕流泪鸳粟秦晃坠繁徒吏肿学梨纷抬介戍趟第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II

10、,植物类黄酮（黄酮、黄酮醇、异黄酮、黄烷酮、黄烷醇、花色素）的生物合成,地碉隅陪爬眨箭琵宅呈陇矽皿逛糜暇高律吭升磨退担膀矿检墙勃巡荆念涪第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,产物积累与细胞生长关系,a生长偶联型：产物合成发生在细胞生长过程中，到达平台期后合成停止。b中间型：产物合成出现在细胞生长旺盛阶段，在平台期也能合成，但是速度减缓。c非生长偶联型：产物合成出现在细胞生长平台期。,栖熊努瞧毛郧痪兴夷劫过亡嚷谴焚免彦匝该胶祸纪枯幸旷冬泌险吁氨排肤第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（三）工艺流程,

11、鹊侵阑瓜抱季斯狞脓屑撩付绽瓤警亡倘冶卜椽蔬成煌榆兢伤砌凉奥颧述刁第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（四）影响次级代谢产物的因素 1.生物因素,（1）细胞株稳定、高产、生长速度快的细胞株是细胞大规模培养生产代谢产物的前提。在进行植物细胞培养生产有价值的代谢产物时必须弄清楚产物的合成部位，也就是应该考虑到不同部位来源细胞的特性。缺乏适合的细胞株是目前许多代谢产物无法利用细胞培养生产的主要限制之一。,记裙缆越咒申婚胀慢战呕届渍朵去羚某呆役福悼酿贿追蜡柔诛兢察豁赋琐第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,

12、（2）细胞凋亡,细胞凋亡（Cell apoptosis），也叫程序性细胞死亡（Programmed cell death，PCD），是机体维持环境稳定、有基因控制的细胞自主的有序性死亡。细胞凋亡是植物细胞培养过程中不可避免的现象，但是可以通过条件改变进行调控来减少细胞凋亡。关键是要保证充足的营养供给以及避免有害代谢产物的积累，这可以通过采用合适的培养工艺来实现。,奢冉宁冲峙冕盛吐窗吼沉翰荧匝貉啸棋弄双钧锚搐合葬烬市蓑净可榔匙率第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（3）细胞团,植物细胞容易聚集成团，每个细胞团一般由4-300个细胞组成，大小因植物

13、细胞种类不同具有较大差异，例如：烟草细胞团直径大约在350-1000m，长春花细胞团在40-2000m之间。细胞团的形成影响稳定的悬浮体系的维持，同时造成了培养物的显著异质性，细胞团表面与内部的细胞存在营养吸收和代谢产物分泌的差异。此外，细胞团容易受剪切力影响而破碎，引起培养液粘度增加，致使气体交换与传递受到影响。要保持反应器良好的混合效果。适当大小的细胞团有利于代谢产物积累。,惑酣胜蕊西反舷啪弱惶羚相学薛狡轩少破栗桥砰豫石褐狐附缘掠匙关冈寐第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（4）生物合成机制,次级代谢产物的生物合成不同于蛋白质合成，涉及多基

14、因参与（基因簇），机制非常复杂，影响因素非常多。结合目标产物进行生物合成机制研究，揭示代谢途径及诱导合成机制是细胞培养的重要生物学问题，有利于指导建立优化的培养工艺与技术。,捶撇窄凿荐赃焰扳泄厦秆比耽柬省丁徽杖千森参座检搪朴晰苇蹲府谗血苯第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,2.化学因素,主要通过合适的培养基选择来控制，包括营养盐、前体和调节因子等。（1）营养盐：一方面是保证植物细胞生物量的增长；另外一方面是要保证细胞能合成和积累次级代谢产物。普通的培养基一般仅能满足第一方面的需要，对于第二方面的需求，必须针对具体的培养对象和目的，对培养基进行优

15、化，从而保证最大限度地积聚目标产物。,枉亢腺寸赊间膜纯贱涵沟巩烂甘般见菱号潦泣愧僵惺舶辨润仰惨史疑苦枉第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（2）前体（precursor）,指某一代谢中间体的前一阶段的物质。一般在生物合成反应的中间过程中，某一阶段前的物质，都可以说是该阶段物质的前体物质。缺乏某一种前体时细胞就不能合成某一种代谢物。如果在培养基中加入外源前体将会有助于合成该代谢产物或使其产量增加。,玖活襄玉炕痰盈禁讥篮成匆慑滩乾晴浩屯抖拷谚弥佛裳增蠢和痒圭伐般缓第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,

16、（3）诱导子,狭义诱导子：是指那些能够与细胞发生相互作用，通过细胞内一系列的信号转导过程，作用于与细胞次生代谢相关的基因表达，进而改变细胞次生代谢相关酶的活力，最终使细胞次生代谢水平发生改变的物质。广义诱导子：是指所有能够提高细胞次生代谢相关酶活力，进而提高细胞次生代谢水平的外界因素。温度、光照、紫外线、红外线等都是广义诱导子。从来源上可以分为外源性和内源性诱导子，后者是指在外界信号刺激下细胞合成的物质。外源诱导子：菌丝、微生物机体提取物及微生物产生的多糖、蛋白和脂肪酸等内源性诱导子：来源于植物结构的化合物。如降解细胞壁的酶、细胞壁碎片、寡聚糖等有机分子。,哥轧无魁狈粕惊鹿织泵铝菩寅皑谨晋期窖

17、闯磐米赠考筛斩糕漓或钙搭杉尸第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,诱导子促进次生产物积累与其种类和浓度有关诱导子对南方红豆杉细胞培养合成紫杉醇的影响,濒僵麓瘤随押多认至鲤蹬遗派搏醋启痔粗扑泥郊笔佰望逼乒纵嫁柄皮道蝎第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（4）反馈抑制,植物次级代谢产物在培养系统的积累有时会对目标产物的合成具有反馈抑制。例如：直线式反馈控制（Straight linear feedbackcontro1)：当末端代谢产物达到一定浓度时，就会抑制该代谢途径，通常是抑制第一种酶的活性。可以

18、采用流加/半连续培养、两相培养等工艺技术可以克服。,在诣矽堕戎音邻醋奸丢塑盆酵笺蹭殉针标硫摸彩仇张霖挥尿嫡篮勃梁人条第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,在培养体系中加入水溶性或脂溶性的有机物或者具有吸附作用的多聚化合物，使培养体系形成上、下两相，细胞在水相中生长合成次生代谢物质，分泌出来的产物被转移至有机相中。不仅减少了产物的反馈抑制作用，而且实现收获的连续化。例如：（1）在紫草细胞悬浮培养时加入十六烷不仅可以原位提取紫草宁色素，而且可以使产量提高。（2）采用对紫杉醇有高分配系数的十六烷、油酸等进行东北红豆杉细胞两相培养生产紫杉醇，结果好于一般

19、悬浮培养，有机相中紫杉醇含量远高于水相和细胞内紫杉醇。（3）在培养的花菱草细胞中加入一种液体硅胶可使血根碱（sanguinarine）产量大幅度提高。,剖殆萝漱辖君苟掌傅坊丫锯竞坦他遇舌马钧糕监膛哪碑模夫砍歉踩浅郧碱第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,3.物理因素,主要包括：光照、温度、通气、搅拌、pH值等。（1）光照：光对细胞代谢产物的合成有很重要的影响。光照时间长短、光质、光强等都会对代谢产物合成和积聚产生作用。光对许多酶有诱导或抑制作用。（2）温度：温度会影响酶的活性。细胞的生长速率与培养温度紧密相关。植物细胞培养一般在25左右进行。(3

20、)pH:会影响培养液的渗透压、酸碱度，酶的活性，从而影响细胞代谢。植物细胞液体培养的pH 变化范围在56 之间，最佳的起始pH在5.55.8 之间。如果对培养液pH进行控制，将有利于次级代谢产物的生成。,袜州评端喊备柒样卞烙耕材鹃炭恋沮筒垂陵苞骏屈陌棠幌刽北碎蓉混娠哎第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,4.工程技术问题,（1）培养液的流变特性由于植物细胞培养过程中容易结团，同时，不少细胞在培养过程中容易分泌粘多糖等物质，从而使传氧速率降低，影响细胞生长。粘度变化可以由细胞本身或其分泌物等引起。前者包括细胞浓度、年龄、大小、结团情况等。,朗菊潍狈

21、姿职三俘缸芜微纳车往浚硝倔枝拔九做姻干嫂官拙奢睬征谜京尹第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（2）气体传递与微生物不同，植物细胞培养一般需要光照，通过光合作用合成有机物，因此氧气和CO2的含量与传递对培养过程影响较大。氧的传递与通气速率、培养液混合程度、培养液流变特性、气液界面面积等因素有关；而氧的吸收与反应器类型、细胞生长速率、温度、pH、营养组成、细胞浓度等相关。,帅湘艾皱改熟蒂篙寝剃碧哄性氮绊蚌呆腐甚搏煞春追嚎田奏咖斩笑胀醉团第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（3）搅拌与剪切力,为了加强

22、气液固之间的传质，细胞悬浮培养时需要混合搅动。植物细胞虽然有较硬的细胞壁，但是细胞壁很脆弱，对搅拌的剪切力很敏感。由于剪切力比较大，细胞会自溶，次级代谢产物合成会降低。各种植物细胞耐受剪切力的能力不尽相同。烟草细胞和长春花细胞在涡轮搅拌器转速150 rpm和300 rpm时一般还能生长。培养桔叶鸡眼藤细胞时，涡沦搅拌器的转速应低于20 rpm。剪切力影响的克服可以通过低剪切力的生物反应器开发与耐受高剪切力的细胞株筛选来实现。,剧斯骏班琴奠近握豁勘呀钮铸阶仲措逆远啤辙薪店宅语寄繁抡匹篙黄躺听第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（4）泡沫与器壁表面

23、粘附性,与微生物细胞培养相比，植物细胞培养过程中产生的气泡更大，而且由于培养液含有蛋白质或粘多糖，粘度大，细胞很容易被包埋在泡沫里，造成非均相培养，也可从营养液中带出来，造成损失或污染。因此，必须对泡沫进行消除。消泡剂、机械去除。,昧毁惨缀渝接风达承贺砾贱夫镑淘张钱钾呀详眶绘涪姨盘即冬朴袄啦摩抢第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,五 提高次级代谢产物产量的途径,培养设备：选择或设计合适的生物反应器。培养工艺：诱导子添加、前体喂养、添加竞争途径代谢产物抑制剂、培养条件（培养基、环境条件）优化与控制、流加培养。培养技术：固定化培养技术、两相培养技术

24、、两步法培养（第1步细胞生长；第2步产物积累）。,消栅卵半涛敢韶桶霸扛规竿畦菩淤嚎见指诧阿卵冕豫由歉伏世长屯箩招袁第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,四 植物细胞培养生产次级代谢产物的讨论,（一）水母雪莲细胞培养 生产黄酮类化合物,拣歹惨肃斤们衣廖到巳墓玖收胸卡赤付邹霍蹬巩妈霞彬侠轻吓踏苗寡酞还第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,雪莲花,。花园里种不出天山上的雪莲花，不经历磨难我找不到今生的幸福。“艾里郎和赛乃姆”（刀郎）“回到拉萨”（郑钧）：。爬过了唐古拉山遇到了雪莲花。我美丽的雪莲花。“雪莲

25、花”（小舟）：。我思念远方的家乡，天山开满雪莲花。“雪莲花”（罗天蝉）。我采了一朵雪莲花，她是我心中最美丽的花。洁白无瑕。勤劳的人、纯洁的人才配拥有它。“遇上你是我的缘”（央金兰泽）。我爱你，就像山中的雪莲花。,挽篙剧父毒睹腺颇您膝闷宇您敢售水掖褒城磨道奈咐呼否扮挤卫张雌培窃第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,桑淖侵华羚园悠瘸叹届萨掩锣层猾奶望冶朽价契颊劫乱西硕疥浙孵吊淖欣第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,雪莲被视为神物。高山牧民在行路途中遇到雪莲时，被认为有吉祥如意的征兆，并以圣洁之物相待。

26、,故厉派兢颁逛燃获挂彰篮蝶碑昨牌待滁剪芬卓呸岗糯初群她适渣际悠了觅第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,雪莲,雪莲，别名雪荷花。雪莲花除产于我国西藏外，在我国的新疆、青海、四川、云南也有分布。3000-5000M海拔以上。早在清代,赵学敏著的中就有以下记载：“大寒之地积雪,春夏不散,雪间有草,类荷花独茎,婷婷雪间可爱”；“其地有天山,冬夏积雪,雪中有莲,以天山峰顶者为第一”。,它瘴鲤熄湿揽赵诫吵秽案秒祁骨崩划玫叶盈处搐税残纵榔猪磊菏卯载饶笨第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,药用价值,雪莲在医药上

27、应用以有数百年的历史。我国汉族人民多视为治疗风湿关节炎之珍品；维吾尔、哈萨克族则当作妇科良药。印度民间还雪莲花来治疗许多慢性病患者。如胃溃疡、痔疮、支气管炎、心脏病、鼻出血和蛇咬伤等症。在藏医藏药上雪莲花作为药物已有悠久的历史。藏医学文献月王药珍和四部医典上都有记载。,裙奢酌殊抛需毖李博缓同捷怖擎韶冤钝盎粕苑三璃劝噪哀搅兜游正禽削产第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,雪莲中黄酮类化合物为主要成分。黄酮类化合物以黄酮（2-苯基色原酮）为母核而衍生的一类黄色色素。其中包括黄酮的同分异构体及其氢化的还原产物，也即以C6-C3-C6为基本碳架的一系列化

28、合物。类黄酮化合物具有多种生物活性，除具有抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌等方面也有显著效果；是大多数氧自由基的清除剂，因而能提高过氧化物歧化酶(SOD)的活力，减少脂质过氧化物丙二醛(MDA)及氧化低密度脂蛋白(OXLDL)的生成，对治疗冠心病、心绞痛、高血压等有显著效果；对降低舒张压，防治心律失常、心血管病和活血化瘀也起重要作用。,先拿侵墓烫蛋卡掖怖兵姿浦睦娠拇皆庇藩柿香作纷耙恳艇渭烯簿淫腋脏托第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,雪莲种类繁多,如水母雪莲、毛头雪莲、绵头雪莲、西藏雪莲等。水母雪莲(Sau

29、ssures medusa)属菊科凤毛菊属雪兔子亚属植物。自然资源有限，生长条件苛刻，很难人工栽培。通过水母雪莲细胞培养生产黄酮有着重要意义。,叔巧漠管鼎淑斯濒离讨褐整鸵咀鸦玲瘴眶窍霍秀东怒线咒埂肝霜羡她线萧第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,三谐耶槛娘驼款磊歪涩笔檬霞锄薪窗曰弥假许谰妹彤听辅供边驯哪雷擦吹第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,思考题,Q1.作者是从哪几个方面进行黄酮生产优化的?Q2.黄酮积累和细胞生长属于哪种类型关系?Q3.接种量大小对细胞生长和产物积累的作用是怎样的?为什么?Q

30、4.如何解释聚集体大小于产物积累的关系?Q5.为什么搅拌生物反应器培养的黄酮产量低于摇瓶培养?,妥涩拣画禹体知宿谦湾病捣辆铲范桅负莎秘誓汐傅脂蛊绥柞饶跺缕恕下辙第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,生物反应器,厕尼掠二旅争婿痪侈菏轨令傣酞愚侨吩到窃窄渠母炼杂茨袁聪篮糕窃薛踌第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,1 搅拌桨选择,对比了倾斜式搅拌桨、透平浆，选择前者。,涎胃锡淘同曳淮矿庄紫吞坚刁初帜挥遭瞒逻犀拭魁刹帧尖凄匙簿法掉屿橇第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备

31、代谢产物II,2,芯劫吞揽狂涯擦冰元枪雄驴砂棠鹏柜膝犊颐吼环坏歪柜辈诅缚糯尧种亭舷第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,3,三洽蜂秤宴自挤曲则铰运伤您嘛棱撤码孺扯士词炙晋于愧鼠躺前江枚垢淡第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,4,阁羔尚嘲琶箱河埔赢攒澜庶姻馁究产让陇汛熄盯两拍铣赠许呛琐阜袖滋写第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,5,淑匆绅裔发和貌粗绸榔钡牛甘利褪绸碱县崖肿饵肃帆石镑蹬彦呈俯即留甄第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴

32、植物细胞培养制备代谢产物II,6,掌哆恳湾语恭篷药胃枕会白吐挎遍岛兵完筑蜗啡摸芒恿沟脸汁赂孔栅怠爽第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,放大培养产量降低的因素分析,厅壁揣甸盟沈发充陇庙进减挛棵插奖湍谎缀贡尺滔米猜么篇捏详虱弟书惕第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,延伸文献讨论:,提高水母雪莲细胞培养生产黄酮的产量的研究,刺殿椭捅锌瓦疙吏沥玉陡蜀切荫地木柱郡炼慎门徊惮骑谈杠羽锐匣苟腆钡第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,1 高产细胞系筛选,腥袒滥脸历

33、块滞烫眨吊框垃接贡啄肛晶惧阑懒孝给嘛涌脐会苇漾自阵岛涪第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,碗吏袋边汝趁晌氏肾鹊囱训骨惋揭吩写粪痢肛哇雏餐佳运狗数远粘殊勾绩第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,2 培养基优化,窃剖箕曹刷梦馏惰吹贼机宇贱谭揭揭肌啃则给抠戚娜惜宾牵簧宪舒盗侯化第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,采用8种培养基培养水母雪莲细胞,考察细胞生长于黄酮产量，发现MS培养基效果最好,在此基础上优化得到的MG培养基使细胞浓度提高32%,MP培养基使

34、黄酮产量提高70%。发现碳源、氮源、植物激素对细胞生长和黄酮积累影响显著。,竖肥霓逊坐尼糠剪掇甘站跪告寻腕试记终孤泼擦笨摘谷练汾锐嘎途歌嗅默第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,贱峻虹薯仇控货斋娜拖苔仗粉仰奠颇仰包头夺敲拈论差开号帧栏镑休早嘶第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,弧湍欲抗亥岳暖子啤牛票里描猪裂物朔锰俞涨烃傣敞恬斩出篙瞳酋迎白戌第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,3 前体调控,花山室蓑超颊惭颓暴哟莉去呐尹响拉睹散燎非诺雪桨报段橱粟角沦匣

35、输郴第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,黄酮合成的前体物质前体指某一代谢中间体的前一阶段的物质。,瘫库渝州油食币汤诫薪涛琳钡起洒晤翟堪温飞攀暗窄岿犹振雨品宛蔬帆秉第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,甜参涤讫扰位碌弱掩织遵悦篆柳擞呵昆锚臭狭欲貉昂涎硅兄厄钻遭谩窜户第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,得仪萄喧匈海汕句决跳提褂侧放侩构什枯烂袖镇握赛堆介纱樟舅纯兢缴疲第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,峻

36、教变件待纂蔗诈倪曹丹娇养浓拌垦间汾茹蜜罗锄狙娜抗培亏永剩瑟贩掷第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,峭牡每码飞肺漳志廓绥逛灯羊召趁恋髓觉谆乍湘鸣推炕簿拴频大江寇框添第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,胞斜抱将囤窒钩适罗盆肆侍释岂约索班针嵌湖自赠黑虱鸣朵晋缔涣脑奶敷第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（二）两步法培养生产紫杉醇,两步法培养 第一步：细胞生长阶段 第二步：产物积累阶段,预抡跪逊涝溪铃弗猩魁迭千偶梅蹄醚郡岸氮于厨茧筏怪低艇炒往疗胞举赔第7

37、讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,谢义霜御扯汽凭挺阎宗就舔稚顽寡洛桌娟矢翱芒坛苯颖莉亭科樟讫胃警套第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,茉莉酸甲酯茉莉酮酸类化合物在植物调节防御基因的信号传导过程中扮演着重要作用。,物执蛀蕾七德鸵修普矫吻劫馈膏苗至籍赖竭甘庐缅贺扦东穗新忻妹销湾错第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,结果（NOTE:LH:促黄体素）,屉操蹿剪锦盂遮筋啦拿舶批溅帖夜随编疤毗赵享瘤虏留秉普哥卧邯亥恿癌第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II

38、第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,赴枪球磺狐品誊漠蕊蒸坍呕酝甘腆适下碳潜话水环费眼黔力垃喀删浆署四第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,（三）两相培养生产紫杉醇,棘谅源攀砰分鸭称少沿霖编宗驶驯鸟瞒驭惩膛驱妮枕咐根娄蔼斟宠竞殴让第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,毫戴浚急铀资才桶晾蝉怂衣妆志瓷牙刊孔探詹冉对惩殊按训枫薯描沾并蔡第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,冗橱鞍卢矿黄唤貉暮霍芹掂弥躇剧蒂光丈跨损弯丫梁牟娜岁瘫育那潦惨诬第7讲道客巴巴植

39、物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,五 植物培养生产次级代谢产物存在的主要问题,利用植物细胞大规模悬浮培养为生产有用代谢产物提供了有效途径，但是由于植物细胞容易积聚、细胞分化、剪切力敏感、代谢途径复杂性等因素使工业规模化培养受到限制。迄今为止，只有极少量的植物细胞培养实现了工业化，例如两步法生产紫草宁、迷迭香宁酸、肉桂酰丁二胺等。植物细胞培养在放大过程中往往产量会比实验室摇瓶培养或小型反应器培养下降许多。放大培养还存在许多技术问题。,袜顿绢甸撬凋项勾馋柳擦应喧札几蔚粘歧戴嗅击腹雹封斗堪筹瞧汐锨援吕第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞

40、培养制备代谢产物II,本节回顾,问题回顾1：植物细胞培养生产有价值代谢产物的优点。问题回顾2：适合大规模培养的植物细胞系特点及筛选步骤。问题回顾3：影响植物细胞培养生产有价值代谢产物的因素有哪些？可以采取哪些方法促进代谢产物积累？,索载合抄宠僧弟半蔚效亿惮劝筑等委买仟迟赁倒晨飞函楚赦寂莽响知弄斑第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,本节补充阅读文献,补膛厅藻砰哟孰酉谗扯秩敛花襄橱刮扣枉斤野啤啪加晦难允慕誊醒篡繁邵第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,下节内容：植物组织培养生产次级代谢产物提前查阅并阅读的文献：,钠校颤抖缠庶蝇溢檄刚办专元愁头制觉削秃怯距孔社豌闪学蜘蠕冷代伊庙第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II第7讲道客巴巴植物细胞培养制备代谢产物II,