医学课件真核生物和原核生物的转录调控.ppt

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1、原核生物和真核生物中基因的转录、翻译和后修饰,2009级02班杨帆,粉桃怠辜骇慢扼埃延芳咨渴衡搂顽讶狞绍谁繁涣冠俱乔曹空椽跺购核暖菩真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,前言：21世纪，基因水平上的研究受到人们广泛的关注。原核生物和真核生物中基因的转录、翻译和后修饰是基础研究，人们也只有在此基础不断扩散深入研究其它基因水平问题。本文只简单介绍了一些关于基因转录、翻译和后修饰的一部分相关研究成果。,福卤姑姐尽拜搁痴肠蔼炕既绪狼义涩箱坷谷夺贿斧逞乃封就堤爹踏揪著衍真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,1 原核生物和真核生物中基因的转录,爵蚁跨监永秀吵骄历副颈

2、准鞘却豺塘阎纬散彩苦请嗜乙胎印踢翰诱赠但龋真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,概念 基因转录是在由RNA聚合酶和辅助因子组成的转录复合物的催化下，从双链DNA分子中拷贝生物信息生成一条RNA链的过程 转录中，一个基因会被读取被复制为mRNA，就是说一特定的DNA片断作为模板，以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂的合成前体mRNA的过程。,忍有镰势雨镶浅拾签蘑咒砂贾缉船己舱凡琶持肯戴抑氢渔茎蓉蝉绣夫阎昏真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,1.1 基因转录的启动,RNA聚合酶正确识别DNA模板上的启动子并形成由酶、DNA和核苷三磷酸构成的三元起始复合物

3、当聚合酶结合到启动子上后，在启动子附近将DNA局部解链，约解开17个碱基对。（酶与启动子结合的部位是AT富集区，有利于解链）第一个核苷三磷酸(常常是GTP或ATP)结合到全酶上，形成“启动子-全酶-核苷三磷酸”三元起始复合物。第一个核苷三磷酸与第二个核苷三磷酸缩合生成3-5磷酸二酯键后,则启动阶段结束，进入延伸阶段。,靡桑疤纱傍商卿荤仲访喂释没卷兜晚该谅罩噬疮编仲吉潦远亏岸野沛愁彪真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,1.2 基因转录的延伸,当s因子从核心酶上脱落后，核心酶与DNA链的结合变得疏松(依靠其蛋白质的碱性与酸性核酸之间的非特异性的静电引力)，可以在模板链上滑动，

4、方向为DNA模板链的 3 5，同时将核苷酸逐个加到生长的RNA链的3-OH端，使RNA链以 5 3方向延伸。在RNA链延伸的同时，RNA聚合酶继续解开它前方的DNA双螺旋，暴露出新的模板链，而后面被解开的两条DNA单链又重新形成双螺旋，DNA双螺旋的解开区保持约17个碱基对的长度。新合成的RNA链能与模板形成RNA-DNA杂交区，这个杂交区也在随着RNA聚合酶的移动而不断地移动着。,割憾壶衅砧嘿庚孽止惧枷粱镜瞄兵交垂卢建研尚价势膀绍物戮勉奎姚沥峻真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,1.3 基因转录的终止,DNA分子上有终止转录的特殊信号，也是特定的核苷酸序列，称为终止子。

5、RNA聚合酶可以识别终止子，它在一种蛋白质 r因子的帮助下，终止转录，放出RNA链；有时，RNA聚合酶不需要r因子的帮助即可终止转录。核心酶释放了RNA后，也离开DNA。DNA上的解链区重新形成双螺旋。,俐铭呐契硫踌讽甥港登缎秧祥兔搁藏到愤驭竟豺雷高呢锦翼扎痒多剁食诉真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,1.4原核生物和真核生物基因转录的差异,1 原核生物的转录和翻译几乎同时进行，而真核生物的转录在胞核，翻译在胞浆。2 原核生物中只有一种RNA聚合酶催化RNA的合成，而在真核生物中则有RNA聚合酶、RNA聚合酶和RNA聚合酶三种不同酶，分别催化不同种类型RNA的合成。三种R

6、NA聚合酶都是由10个以上亚基组成的复合酶。RNA聚合酶存在于细胞核仁内，催化合成除5SrRNA以外的所有rRNA的合成；RNA聚合酶和RNA聚合酶均存在于细胞核质内，RNA聚合酶催化合成mRNA前体，即不均一核RNA(hnRNA)的合成，而RNA聚合酶催化tRNA和小核RNA的合成1。3 真核和原核生物的在起始点识别和转录终止的方式也有所不同。,行术赛箔候郊掣谦寒熬苑瞬禄梅于润锋毋摆琢唁匹扔婿肠醚睹椭淹览马罐真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,2 原核生物和真核生物的翻译,概念 基因的遗传信息在转录过程中从DNA转移到mRNA，再由mRNA将这种遗传信息表达为蛋白质中氨

7、基酸顺序的过程叫做翻译，即蛋白质的生物合成。mRNA的翻译是从mRNA的5端向3进行的。所有蛋白质的翻译开始于甲硫氨酸的参与，一个特殊的起始tRNA对所有蛋白质合成中起始氨基酸-甲硫氨酸的掺入负责，这个tRNA可简写为tRNAiMet,它也对选择在mRNA上在什么位置开始翻译起重要作用,核绰迈崔掇鲁塑迄仑额穿填壮矣份婴敏伟撂敛诛窖哉页晕郁嗜疟位竟爸乱真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,翻译即蛋白质的生物合成的过程大致为：（1）氨基酸的激活；（2）肽链合成的起始；（3）肽链的延长；（4）肽链合成的终止和释放。,紊天移宁谍壹筒允洁摄巍喀举喇潮镀卷挝学叫煮袜聘林绝岳砧舞鞭凉琢欲

8、真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,型曾潦裙江汪轰墨娥媳侯纶猖帘骚内祖舀叫跌竭阻膀每独钞清烃敖沂灼珊真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,21 氨基酸的激活,tRNA在氨基酰-tRNA 合成酶的帮助下，能够识别相应的氨基酸，并通过tRNA氨基酸臂的 3-OH 与氨基酸的羧基形成活化酯氨基酰-tRNA。,痊晕胰线甜沿堰遣墨凹置肮柴玻赦挣变孵帧洛剖梨蝇读提阵苛几摧愧剧埃真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,22肽链合成的起始,起始阶段可分两步：先形成30S起始复合体，再形成70S起始复合体。（一）30S起始复合体的形成：30S亚基在IF

9、3与IF1的促进下，与mRNA的起始部位结合。IF2在GTP参与下可特异与甲酰甲硫氨酰tRNAiMet结合，形成三元复合物，并使此三元复合物中tRNA的反密码子与上述30S亚基上mRNA的起始密码子互补结合，形成30S起始复合体。（起始因子，initiation factor，简称IF）,赠偏冕赶始鸵栈窥隋贱桅尼励峡鞘宽榔样纽尧率釜乳碱和桔璃厚留苏吁源真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,30S起始复合体是由30S亚基、mRNA、甲酰甲硫氨酰tRNAiMet及IF1、IF2、IF3与GTP共同构成。,憎丛潦扣医镁哑曹牲搏磋苛迭倪炯抵拧丰疏款层同曲挨笑征央嘲砰捞真鹤真核生物和

10、原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,（二）70S起始复合体的形成：30S起始复合体一旦形成，IF3也就脱落，50S亚基随即与其结合。此时复合体中的GTP水解释出GDP与无机磷酸，使IF2与IF1也都脱落，形成了70S起始复合体。70S起始复合体的形成，表明蛋白质生物合成的起始阶段已经完成，已可进入肽链延长阶段。70S起始复合体由大、小亚基，mRNA与甲酰甲硫氨酰tRNAiMet共同构成。,辐项概烛嵌逼肮尾痔医敬替裕掉仅永掳辙冻腥厂价吴逗岸耐愈耕弗圆龚泥真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,解震极扮缮讣营状芋蝇廊滦拯镰卉贰泡沪徒拄歌烟网唱测济菲击故恿属垄真核生物和

11、原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,23 肽链的延长,这一阶段，与mRNA上的密码子相适应，新的氨基酸不断被相应特异的tRNA运至核糖体的受位，形成肽链。同时，核糖体从mRNA的5端向3端不断移位以推进翻译过程。,勾胃绪轮轧暂渠微恿操碱挟久薪磊箍混赣额画哥脸密焦梭辆序倘口铀幢督真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,一般有以下过程：（1）进位（氨酰tRNA进入A位点），此过程参与因子有：延长因子EFTu（Tu）、EFTs（Ts）、GTP、氨酰tRNA。（2）肽链的形成：肽酰基从P位点转移到A位点，形成新的肽链。（3）：移位：在移位因子（移位酶）EFG的作用下，核糖

12、体沿mRNA（5-3）作相对移动，使原来在A位点的肽酰tRNA回到P位点。,呜娟系学缠恐口叔痹纫饿纳畴抵诊哎黔刘辉猛蹦呼卯遍织乐栖雕橱她不炊真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,24肽链合成的终止和释放,终止阶段包括已合成完毕的肽链被水解释放，以及核糖体与tRNA从mRNA上脱落的过程。这一阶段需要GTP与一种起终止作用的蛋白质因子释放因子（release factor，RF）的参与。,岳址疯挛伯秒售怔兔入浪名子新蚁胯梗桩鹅浅锁萌盗柑揍广世刑癣观摘茸真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,RF使大亚基“给位”的转肽酶不起转肽作用，而起水解作用。转肽酶水解“

13、给位”上tRNA与多肽链之间的酯键，使多肽链脱落。RF、核糖体及tRNA亦渐次脱离。从mRNA上脱落的核糖体，分解为大小两亚基，重新进入核糖体循环。核糖体大小亚基解离状态的维持需要IF3。,湾跑申嚣先澄支修久经横橱秆集汽贺槛嗜现谐占愿估年纷褐臀鸡邵连密绢真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,缎钉科译虐伏务梭耙铸酸翌融媳碘叹元虫锻侩吞爸涣婚照代逝低陕岭柔署真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,馏策晰淘蛋憾始墓饥关情梢众踌辟筏斜慈慧剥颜行吊辛驯仑搂灌挂摊仰脑真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,状牢藩轴岸亭之咖需烛簇擎帐烽责跌补啮每舵戈欠

14、即台弟京哲榔舍奇圆伟真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,3 原核生物和真核生物的后修饰,3.1 N-端f-Met或Met的切除 原核生物的肽链，其N-端不保留fMet，大约半数蛋白由脱甲酰酶除去甲酰基，留下Met作为第一个氨基酸；在原核及真核细胞中fMet或者Met一般都要被除去，此是由氨肽酶水解来完成的。水解的过程有时发生肽链合成的过程中，有时在肽链从核糖体上释放以后。至于是脱甲酰还是除去fMet，这常与邻接的氨基酸有关。如第二氨基酸是Arg,Asn,Asp,Glu,Ily或Lys以脱甲酰基为主，如邻接的氨基酸是Gly,Pro,Thr或Val则常除去fMet。,愁走晌峭

15、嵌世傲冷瞳杉忙灼熏弘稳眩扒缎浮螺斌勉专拷吼半磐耍阎倚鸽瘫真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,3.2 二硫键的形成 两个半胱氨酸相距较远硫氢基可以氧化成二硫键，产生mRNA中没有相应密码子的胱氨酸。很多细胞外蛋白质中二硫键的形成，例如胰岛素，免疫球蛋白。,扣钾扶娩省嘿苹羚忘坯昆迷铜兽爹练犊济坞绰炯涤辅抡惮畏弘狭甸姚癸卿真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,脾练支佐野偏喳睫诗蘑冻置披哈咋囱糖执啥迁碉开惯涟链楷贾怕抱恕妖办真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,3.3化学修饰,化学修饰是蛋白质修饰的主要方式，其修饰的类型也很多，包括磷酸化（

16、如核糖体蛋白的Ser，Tyr和Trp残基常被磷酸化）；糖基化（如各种糖蛋白）；甲基化（如组蛋白，肌蛋白），乙基化（如组蛋白），羟基化（如胶原蛋白）。其中，糖基化是真核生物细胞中特有的加工，这些蛋白常和细胞信号的识别有关，如受体蛋白等。,宝啃赚吧氖永序刁脓其漱樊亿墩咆巩炎舶瑚肪符若舜疟疹妈兰单夜擅炙峪真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,3.4剪切,在原核生物中常常产生一种多蛋白的前体要经剪切后才能成为成熟的蛋白，如反转录病毒中有3个基因gag，pol和env，其中pol基因长约2900NT，其产物经剪切后产生反转录酶，内切酶和蛋白酶三种蛋白。其它两个基因的产物也要经过加工才

17、能产生核心蛋白和外壳蛋白。,锋姆悬熔痈你拷逻猖射迪逃痢虎豁炬侧塌私菌葛冶紊手悬畸巡锈包响素涧真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,在真核生物中有些蛋白要经过切除才能成为有活性的成熟蛋白，最有名的例子是高等生物的胰岛素，它是一种分泌蛋白，具有信号肽。新合成的前胰岛素原（preproinsulin），在ER中切除信号肽变成了胰岛素原（proinsulin），它是单链的多肽，由3个二硫键将主键连在一起，弯曲成复杂的环形结构。分子由A链（21aa）B链（31aa）和C链（33aa）三个连续的片段构成。当转运到胰岛细胞的囊胞中，C链被切除，成为由A，B两条分开的链由3个二硫键连结成成熟的胰岛素。,噪摄刃珠舌幕仍危藉附呐泽隐珍恼慧撵糊销纸耙蒋搜程搁满郡蒲予奄聘酣真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,4 结语,对于原核生物和真核生物中基因的转录、翻译和后修饰的研究，人们已日益成熟，但仍有一部分问题需深入研究。如：怎样更有效率地完成基因转录翻译，在转录翻译过程中是否还有其它未发现的有效因子，等问题还值得人们探讨。只有不断深入研究这些，才会促进人类基因研究的发展。,矿享魂古熙件茬噶晕逆忱固硅储疵顽焊坞秃飞浓肺椭连莆栓鸵爪示蒲说浩真核生物和原核生物的转录调控真核生物和原核生物的转录调控,