161性病实验室检测方法文档资料.ppt
《161性病实验室检测方法文档资料.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《161性病实验室检测方法文档资料.ppt(67页珍藏版)》请在三一办公上搜索。
1、主要内容,梅毒淋病生殖道沙眼衣原体感染生殖器疱疹,一、梅 毒,全国梅毒检测技术规范(送审稿),3,梅毒及其病原体样品的采集和处理病原学检测血清学检测核酸检测实验室生物安全梅毒血清学检测实验室质量管理,常用梅毒检测方法,病原学检测血清学检测,病原学检查,原理:一期、二期梅毒时,取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液,在暗视野显微镜下,光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光,从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。方法:病原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、镀银染色法和直接荧光法,病原学检查的临床意义,病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体,在临床可确诊梅毒,且
2、具有快速、方便、易操作的特点。螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法,对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。如未见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的可能性,,梅毒血清学检测分类,(1)非梅毒螺旋体抗体检测试验(非特异性梅毒抗体)(2)梅毒螺旋体抗体检测试验(特异性梅毒抗体)两类方法。问题1:为什么梅毒实验室诊断需要两类血清学检测方法?,非梅毒螺旋体抗体检测试验,非梅毒螺旋体抗体试验原理,梅毒螺旋体一旦感染人体,宿主迅速对螺旋体表面的脂质作出免应答,在3周-4周产生抗类脂抗原的抗体(反应素)。抗体主要是IgM和IgG混合抗体。未经治疗的病人,其血清内的反应素可长期存
3、在。经正规治疗后,反应素可以逐渐减少至转为阴性。问题2:临床上非梅毒螺旋体抗体试验为什么有定性和定量两种检测方法,非梅毒螺旋体抗体试验原理,所有非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都是一样方法包括:(1)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)(2)甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)(3)性病研究实验室试验(VDRL)等。基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇抗原抗体结合形成复合物,凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见上述方法的敏感性和特异性都基本相似,非梅毒螺旋体抗体试验原理,VDRL试验USRRPR/TRUST,VDRL试验抗原组成:0.03%心磷脂 0.21%卵磷脂 0.90%胆固醇抗原需新鲜配制 不能保
4、存待检血清需灭活目前主要用于脑脊液检查显微镜观测结果,USR试验是VDRL试验的改良抗原组成:同VDRL,另含(1)乙二胺四醋酸(EDTA)使抗原可长期保存,能维持一年;(2)含有氯化胆碱 对血清能起到化学灭活的作用 不必加热灭活(3)制成试剂盒 使用方便,RPR试验在USR试剂成分的基础上 加入黑色碳颗粒 作为沉淀的指示物 用白色的硬纸片替代玻片血清不需要灭活不需要显微镜观测结果可作定量试验有现成的试剂盒 携带方便操作简单价格便宜,非梅毒螺旋体抗体试验原理,TRUST其原理和成分与RPR试验相同用红色的甲苯胺红替代了碳颗粒 其余的特点均与RPR相同,非梅毒螺旋体抗体试验操作要点,1、仪器:水
5、平旋转仪。,2、定性试验加样:吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中,并均匀地涂布在整个圈内加抗原:将抗原轻轻摇匀,用9号针头加1滴抗原反应:将卡片置水平旋转仪旋转8分钟,立即在亮光下观察结果,3、定量试验稀释夜准备:在圈内加入50uL生理盐水(根据需要确定稀释度),勿将盐水涂开。加样:吸取50uL血清(浆)与各圈中盐水作系列稀释,并涂布整个圈内。下同定性试验。,非梅毒螺旋体抗体试验临床意义,早期梅毒(一期、二期)经足量规则抗梅毒治疗后3个月,VDRL试验抗体滴度下降2个稀释度,6个月下降4个稀释度。一期梅毒1年后转为阴性 二期梅毒2年后转为阴性。晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢,2年后约50
6、%病人血清反应仍为阳性。,非梅毒螺旋体抗体试验临床意义,非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。早期梅毒硬下疳出现1周-2周后,血清可呈阳性。经治疗后血清滴度可下降并阴性,故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。注意:前带现象、血清固定,梅毒螺旋体抗体检测试验,梅毒螺旋体抗体试验原理,用梅毒螺旋体特异蛋为抗原,检测梅毒患者血中特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体。感染梅毒螺旋体后,一旦梅毒螺旋体抗体试验呈阳性,则患者终身阳性。问题3:梅毒螺旋体抗体的定量试验在梅毒诊疗中有意义吗?,梅毒螺旋体抗体试验方法,梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)梅毒螺旋体血球凝集
7、试验(TPHA)梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)化学发光试验 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(TP-RT)FTA-ABS 梅毒IgM抗体检测(TP-IgM)梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TP-WB)等,TPPA/TPHA原理,TPPA试验原理与TPHA试验基本相同。TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代TPHA试验中致敏羊红细胞,此致敏颗粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合,产生可见的凝集反应,具有较高的敏感性。明胶粒子为洋红色,在操作部步上也较为方便,出结果较快。,FTA-ABS试验原理,FTA-ABS试验是检测梅毒的“金标准”试验。其原理是将有完整形态的梅毒螺旋体作为抗原,加上经吸收剂(用
8、Reiter螺旋体制备而成)吸收过的梅毒患者血清形成抗原抗体复合物,再加入荧光素(FTIC)标记的抗人免疫球蛋白,与抗梅毒螺旋体抗体结合,形成荧光的抗原抗体复合物。在荧光显微镜下,螺旋体显出苹果绿色的荧光,即为阳性反应。,TPELIS试验原理,TPELIS试验是用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条,加上梅毒血清和单克隆抗体酶标记物,形成抗原抗体复合物与酶标记物结合,用酶联检测仪判定试验阳性反应。本法可用于大规模血清检测。,梅毒免疫层析快速检测方法,梅毒螺旋体抗体试验临床意义,作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验。梅毒患者经过抗梅治疗后,TPPA等梅毒螺旋体抗体试验试验仍
9、可阳性,故TPPA等试验阳性不能作为疗效观察的指标。TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染,应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。,非梅毒螺旋体抗体试验结果解释示意图,早期,晚期,一期,二期,早期潜伏,晚期潜伏,三期,治疗前 治疗后,阳性,阴性,梅毒螺旋体抗体试验结果解释示意图,早期,一期,二期,早期潜伏,晚期,晚期潜伏,三期,治疗前 治疗后,阳性,阴性,梅毒血清学试验结果的临床意义总汇,USR TPPA RPR TP-ELISA 临床意义 VDRL TP-RT _ _ 排除梅毒(一期梅毒的早期)+现症梅毒(梅毒孕妇所生的婴儿除外)+-生物学假阳性-+早期梅毒经治疗后(早早期梅毒),梅
10、毒血清学检测目的,临床诊断、血液筛查、流行病学监测以临床诊断为目的的检测是为了确定梅毒感染的状况。以血液筛查为目的的检测是为了防止梅毒的经血传播。以流行病学监测为目的的检测是为了调查梅毒血清学感染率和发病率。,梅毒血清学检测检测策略及要求,检测策略以临床诊断为目的两种策略 以血液筛查为目的的检测策略 以流行病学监测为目的的三种检测策略检测要点根据目的选择检测方法及检测策略。可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。检测试剂要求所有应用于临床的检测试剂均必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂,有批批检合格证的试剂。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。,以临床诊断为目
11、的的检测策略一,以临床诊断为目的的检测策略二,以血液筛查为目的的检测策略,附1:2009年度梅毒血清学检测试剂评估结果,2009年参评试剂厂家(非梅毒螺旋体抗原血清学试验),试剂名称 生产厂家(试剂简称)批号 有效期梅毒快速血浆反应素环状卡片 上海科华生物技术有限 20090901 20100906试验诊断试剂盒(RPR)公司(科华RPR)梅毒甲苯胺红不加热血清试验 上海荣盛生物技术有限 20090901 20100903诊断试剂盒(TRUST)公司(荣盛TRUST)梅毒甲苯胺红不加热血清试验 北京金豪制药有限公司 200909098 20100704 诊断试剂盒(TRUST)(金豪TRUST
12、)梅毒甲苯胺红不加热血清试验 北京万泰生物药业有限 M20090803 20100806诊断试剂盒(TRUST)公司(万泰TRUST)梅毒甲苯胺红不加热血清试验 英科新创(厦门)科技有限 2009057602 20100521诊断试剂盒(TRUST)公司(英科TRUST)梅毒甲苯胺红不加热血清试验 郑州安图绿科生物工程 20090818 20100817 诊断试剂盒(TRUST)有限公司(安图TRUST),参评试剂厂家(梅毒螺旋体抗原血清学试验),试剂名称 生产厂家(试剂简称)批号 有效期 梅毒螺旋体抗体诊断试剂(双抗 上海科华生物技术有限公司 20090517 20100515夹心法)(EL
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 161 性病 实验室 检测 方法 文档 资料
链接地址:https://www.31ppt.com/p-4618174.html