最新:临床常用免疫学检查(新修)文档资料.ppt
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1、2023/5/1,临床常用免疫学检查,1,临床常用免疫学检查,免疫功能检查*血清免疫球蛋白检测*血清补体检测*细胞免疫检测病毒肝炎血清标志物检查感染免疫检查 细菌感染免疫检测 病毒感染免疫检测 其它(寄生虫 感染、性病等)肿瘤标志物检查 蛋白质类肿瘤标志物 糖脂类肿瘤标志物 酶类肿瘤 标志物,2023/5/1,临床常用免疫学检查,2,临床常用免疫学检查,自身抗体检查*抗核抗体检测*类风湿因子测定*抗心磷脂抗体测定*抗中性粒细胞胞浆抗体测定 抗某种组织/细胞的抗体检测 移植免疫检查 细胞因子检查*I L-2、6、8、10*TNF IFN,2023/5/1,临床常用免疫学检查,3,免疫功能检查,*
2、血清免疫球蛋白检测*血清补体检测*细胞免疫检测,2023/5/1,临床常用免疫学检查,4,体液免疫检查,(一)免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)免疫球蛋白指具有活性的抗体活性和抗体样结构的球蛋白,由浆细胞产生,存在于体液,血液,外分泌液和一些细胞膜上。,2023/5/1,临床常用免疫学检查,5,2023/5/1,临床常用免疫学检查,6,2023/5/1,临床常用免疫学检查,6,免疫球蛋白 用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类:IgG、IgA、IgM、IgE、IgD,2023/5/1,临床常用免疫学检查,7,2023/5/1,临床常用免疫学检查,7,免疫球蛋白特点,IgG
3、 机体含量最多、占70%-80%的抗体活性,是唯一能够通过胎盘的Ig,是使新生儿获得被动免疫的抗体 IgA 分血清型和分泌型两种,分泌型主要与呼吸道、消化道、泌尿生殖道的感染、肿瘤等病变密切相关 IgM 五聚体,是分子量最大的Ig,是有效凝聚和溶解细胞的因子。在个体发育和抗原刺激后出现最早的抗体,在机体的早期免疫防御中起主要作用。,2023/5/1,临床常用免疫学检查,8,2023/5/1,临床常用免疫学检查,8,IgE 血清含量最少的Ig,与变态反应、寄生虫感染、皮肤过敏等有关IgD 功能尚不完全清楚,2023/5/1,临床常用免疫学检查,9,2023/5/1,临床常用免疫学检查,9,IgG
4、最多、主力军 IgA血清型和分泌型 IgM最早出现 IgD功能尚不完全清楚 IgE与变态反应有关,2023/5/1,临床常用免疫学检查,10,正常值:单向免疫扩散法 IgG 7.016.6 g/L IgA 0.73.5g/L IgM 0.52.6 g/L ELISA法 IgE 0.10.9mg/L,2023/5/1,临床常用免疫学检查,11,多克隆增高:IgG IgA IgM均增高 单克隆增高:仅某一种Ig增高而其他种不增高,2023/5/1,临床常用免疫学检查,12,2023/5/1,临床常用免疫学检查,12,免疫球蛋白增高的临床意义:多克隆性增高慢性感染(包括细菌、病毒、结核感染等)、慢性
5、肝病、自身免疫性疾病、肿瘤(淋巴瘤)等 单克隆性增高免疫增殖性疾病,如分泌型多发性骨髓瘤;IgE的增高主要与各种过敏性疾病相关,2023/5/1,临床常用免疫学检查,13,2023/5/1,临床常用免疫学检查,13,关于M蛋白,M蛋白(Monocolonal protein):又称单克隆免疫球蛋白,是由单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白及其分子片段。血清中若能检测到M蛋白,提示单克隆免疫球蛋白增殖病,最常见的是:多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM),可有IgG型、IgA型、IgM型等 巨球蛋白血症(Waldenstrom症)重链病、轻链病 半分子病,2
6、023/5/1,临床常用免疫学检查,14,例:,多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是浆细胞异常增殖的恶性肿瘤,也称浆细胞瘤(plasmocytoma)。1873年由Butzky首先并命名。,2023/5/1,临床常用免疫学检查,15,MM的主要临床特征:,进行性的骨质破坏,如骨质疏松和溶骨性病变,常有骨痛、易骨折,为MM最典型特征;大量的M蛋白导致血液粘度增高,呈高粘血症或沉积于肾小管中,肾小管上皮细胞淀粉样变性,发生肾病综合征。损害中枢神经系统,可出现神经功能障碍;骨髓损伤可引起贫血、粒细胞和血小板减少;浆细胞浸润其他组织,如脊髓和神经根受压时引起运动功能障碍等;男性多发
7、,平均发病年龄46岁左右;恶性程度高,预后不良;易感染。,2023/5/1,临床常用免疫学检查,16,MM的主要免疫学特征:,血清中出现大量的M蛋白或尿中有本周蛋白(1.0g/24h尿)骨髓中有无限扩增的异常浆细胞(15%)为主要病理特征,组织证实有浆细胞瘤;有溶骨性损害。,2023/5/1,临床常用免疫学检查,17,本周蛋白(bence-jones protein):1847年由Bence-Jones在病人的尿液中检出而命名。已知M蛋白不具有免疫活性,无正常免疫球蛋白的功能,其轻链分子小可通过肾小球滤过从尿排除。(本周蛋白是从尿中检出的M蛋白轻链),2023/5/1,临床常用免疫学检查,18
8、,免疫功能检查,*血清免疫球蛋白检测*血清补体检测*细胞免疫检测,2023/5/1,临床常用免疫学检查,19,2023/5/1,临床常用免疫学检查,19,第二节 血清补体(complement,C)*是一组具有酶原活性的糖蛋白,由C1-C9及B、D等因子及补体调节蛋白组成*参与灭活病原体的免疫反应,也可破坏自身组织或自身细胞造成免疫损伤*通过传统途径和旁路途径激活,传统途径需免疫复合物(CIC)激活,旁路途径不需要CIC激活而首先发挥作用*血清中含量稳定,属天然免疫,不耐热,2023/5/1,临床常用免疫学检查,20,一、参与宿主早期抗感染免疫,补体系统活化后可通过溶解细胞、细菌和病毒,发挥抗
9、感染作用补体活化过程中可产生多种具有炎症介质效应的活性片段,如C3a、C4a、C5a等,参与炎症反应,补体的生物学作用,2023/5/1,临床常用免疫学检查,21,2023/5/1,临床常用免疫学检查,22,二、维持机体内环境稳定,促进免疫复合物清除清除凋亡细胞,2023/5/1,临床常用免疫学检查,23,3、清除免疫复合物,2023/5/1,临床常用免疫学检查,24,清除凋亡细胞的机制,C1q、MBL、C3b等可与凋亡细胞的分子结合,2023/5/1,临床常用免疫学检查,25,2023/5/1,临床常用免疫学检查,25,总补体溶血活性检测(total hemolytic complement
10、 activity,CH50)正常值:50-100 ku/L 临床意义:反映传统途径的活化程度 减低补体消耗相关疾病:肾小球肾炎、自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮 Systemic lupus erythematosis,SLE)、感染性心内膜炎(subacute infecitive endocarditis,SBE)补体合成降低:肝病等 先天性缺陷 增高急性炎症、组织损伤、肿瘤等,2023/5/1,临床常用免疫学检查,26,补体C3检测:C3在补体系统各成分中含量最多,是传统途径和旁路途径被激活的关键物质 正常值:0.81.5 g/L 补体C4检测:C4代表补体传统活化途径,在补体活化、促
11、进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用 正常值:0.20.6 g/L,2023/5/1,临床常用免疫学检查,27,2023/5/1,临床常用免疫学检查,27,临床意义:参见CH50减低和增高的临床意义 C3增高在急性炎性反应更敏感(炎症性疾病)C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低 更有意义(自身免疫性疾病),2023/5/1,临床常用免疫学检查,28,免疫功能检查,*血清免疫球蛋白检测*血清补体检测*细胞免疫检测,2023/5/1,临床常用免疫学检查,29,2023/5/1,临床常用免疫学检查,29,第三节 免疫细胞检测针对细胞的数量(amount)、活性(功能 functio
12、n)、表面标志物(membrane molecules)表达(express)程度 T细胞免疫检测 B细胞免疫检测 自然杀伤细胞检测 细胞因子检测 中性粒细胞吞噬杀菌功能检测,2023/5/1,临床常用免疫学检查,30,T细胞分化抗原测定(免疫荧光法)CD3总T细胞 正常值:61%85%CD4T辅助细胞(TH)正常值:28%58%CD8T抑制细胞(TS)正常值:19%48%CD4/CD8 1.660.33(1),2023/5/1,临床常用免疫学检查,31,流式细胞术(flowcytometry,FCM),2023/5/1,临床常用免疫学检查,32,临床意义:CD3 降低系统性红斑狼疮、免疫缺陷
13、病、放化疗后 CD4/CD8增高自身免疫性疾病(如SLE、类风湿关节炎、多发性硬化症等)及器官移植后排异反应 CD4/CD8减低见于艾滋病、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染等。CD3 CD4 CD8均增高T细胞型淋巴细胞恶性疾病,2023/5/1,临床常用免疫学检查,33,2023/5/1,临床常用免疫学检查,33,B细胞分化抗原测定:应用CD19、CD20、CD22等单克隆抗体标记单个核细胞B细胞,通过免疫荧光或流式细胞术进行检测,CD19是所有B细胞共有的表面标志,活化后不消失 参考值:CD19 11.743.73%临床意义:升高B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血
14、病、Burkitt淋巴瘤等 减低无丙种球蛋白血症、免疫抑制剂应用,2023/5/1,临床常用免疫学检查,34,自然杀伤细胞免疫检测它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞 自然杀伤细胞(NK)介导天然免疫应答,自然杀伤细胞(NK)活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一,2023/5/1,临床常用免疫学检查,35,参考值:NK细胞活性(自然杀伤)47.6%76.8%临床意义:升高:常见于病毒感染早期,器官移植后,使用免疫增强剂(如干扰素)治疗后。减低:常见于恶性肿瘤,重症联合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制剂使用者等。,2023/5/1,临床常用免疫学检查,36,感染免疫检测,(一)血清抗链球菌溶
15、血素“O”(anti-streptolysin“O”,ASO)A组溶血性链球菌的荚膜抗原代谢产物链球菌溶血素“O”具有溶血活性,能溶解人类和一些动物的红细胞。将受检病人血清倍比稀释后,加入一定量的链球菌溶血素“O”,如病人血清中含有抗体(ASO),即能使链球菌溶血素“O”失去溶血能力,不溶血的管数越多表示ASO的效价越高 参考值:胶乳凝集法为阴性 100IU/L,2023/5/1,临床常用免疫学检查,37,临床意义:当机体受A组溶血性链球菌感染后23周,血清中即出现抗链球菌溶血素“O”的抗体,这种抗体滴度直至病愈后数月到半年才下降至正常水平 ASO升高常见于活动性风湿热、风湿性关节炎、急性肾小
16、球肾炎等,2023/5/1,临床常用免疫学检查,38,(二)人巨细胞病毒抗体和DNA测定(Cytomegalovirus,CMV)CMV侵入人体后可产生CMV-IgM和CMV-IgG抗体 参考值:阴性 临床意义:CMV-IgM阳性提示现症感染或处于病毒活动期 CMV-IgG阳性提示既往感染或潜伏感染(正常人群中 90%可阳性)CMV-DNA阳性提示现症感染,2023/5/1,临床常用免疫学检查,39,(三)嗜异性凝集试验 传染性单核细胞增多症由EB病毒感染所致,病人血清中可出现一种凝集异种动物(如绵羊)红细胞的抗体,称IgM嗜异性抗体 参考值:阴性 凝集效价1:7 临床意义:EB病毒感染后23
17、周抗体效价达高峰(1:56),2023/5/1,临床常用免疫学检查,40,2023/5/1,临床常用免疫学检查,40,第四节 肿瘤标志物(tumor marker)检测,1、是由肿瘤细胞本身合成、释放或机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质2、可反映细胞恶变各阶段的表型及基因特征性3、包括蛋白类(甲胎蛋白、癌胚抗原等)、糖类、酶类肿瘤标志物,2023/5/1,临床常用免疫学检查,41,恶性肿瘤增长的检测,肿瘤标记物(无形的肿瘤),Tumor mass,1g,10,1mg,106,1g,109,10-100g,1010-11,1kg,1012,临床可检测的肿瘤,肿瘤增长,Tumor cells,Le
18、ad time,2023/5/1,临床常用免疫学检查,42,肿瘤标志物免疫分析,理想的肿瘤标志物特异反映特定肿瘤;量的变化反映肿瘤:发生、发展、及对治疗的反映性。容易检测准确可靠,现实的肿瘤标志物灵敏度有限;特异性有限;存在正常异常交错;存在不稳定性与临床表现存在差异,2023/5/1,临床常用免疫学检查,43,2023/5/1,临床常用免疫学检查,43,2023/5/1,临床常用免疫学检查,44,2023/5/1,临床常用免疫学检查,44,2023/5/1,临床常用免疫学检查,45,血清肿瘤标志物的生物学分类注意:按临床肿瘤分类可能导致临床结论草率和医疗矛盾,糖类抗原 胚胎性抗原 细胞角蛋白
19、 肿瘤相关酶激素类标志物 其他蛋白质类,2023/5/1,临床常用免疫学检查,46,糖类抗原的共同特点,结构复杂,抗原决定位点多;抗体类型较多,不同的检测试剂之间存在差异;与多种恶性肿瘤有关;与同类肿瘤不同的生物特性有关;检查的影响因素多!生理性和病理性的意义不清楚。,2023/5/1,临床常用免疫学检查,47,糖类抗原的一般临床应用指征,CA19-9 胰腺癌;胃肠道和肝胆道肿瘤CA15-3 乳腺癌;肺腺癌、卵巢、肝等CA125 卵巢癌,子宫内膜癌、胰腺癌、肝癌、肺癌CA50 胰腺癌、乳腺癌、肺癌、胃肠道和肝胆肿瘤CA242 结直肠癌、胰腺癌、卵巢癌等 CA72-4 胃癌;卵巢、胰腺、乳腺,2
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