最新第23章 临床常用免疫学检查PPT文档.ppt

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1、教学要求,1.掌握病毒性肝炎的血清标志物测定的临床意义。2.熟悉免疫球蛋白、补体及细胞免疫检测的参考值和临床意义。3.了解类风湿因子、自身抗体检测的临床意义。,第一节 体液免疫的检查（humoral inmunity）P443,在高等动物体内存在着复杂的免疫系统。此系统发育缺陷或生理功能异常时，可导致免疫缺陷病，变态反应性和自身免疫性疾病及肿瘤等。,一、免疫球蛋白检查 immunoglobulin;Ig 免疫球蛋白是一组具有抗体活性的蛋白质，存在于生物体的血液、体液、外分泌液及某些细胞（淋巴细胞）的膜上。,(一）参考区间1.IgG：7.0-16.6g/L 2.IgA：0.7-3.5g/L3.I

2、gM：0.4-2.2g/L 4.IgD：0.11-578.28ng/L 5.IgE：0.15-0.85mg/L,（二）临床意义1、免疫球蛋白含量减低 见于各种先天性和获得性体液免疫缺陷病，长期应用免疫抑制剂患者。2、免疫球蛋白含量增高（1）多克隆增高：如慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病及淋巴瘤等。（2）单克隆增高：如多发性骨髓瘤、过敏性疾病、寄生虫病可见IgE增高。,二、血清补体的检测（complement）,补体能和任何抗原抗体复合物结合而被激活。激活后的补体系统具有细胞溶解和杀菌作用，病理情况下，可引起组织损伤和破坏。,(一)总补体活性测定临床意义 l、活性减低：由于免疫性疾病消耗补体，

3、常呈低补体血症。2、活性增高：急性炎症、恶性肿瘤时可见补体活性增强。,(二)补体C3测定 C3是补体各成分中含量最高的一种，测定C3含量比测定总补体活性更敏感。临床意义：C3增多与减少基本与总补体相似，但更为敏感。,第二节 细胞免疫检测（cellular immunity）,T淋巴细胞及B淋巴细胞的检查人类淋巴细胞根据其功能、膜表面特征可分为T、B及NK细胞等。由于其特征不同，可用相应的方法进行检查。,T细胞系列：CD3代表总T细胞、CD4代表T辅助细胞 CD8代表T抑制细胞 B细胞系列：CD19、CD20、CD22等抗B细胞的单克隆抗体。NK细胞系列：CD56,临床意义：1.自身免疫性疾病常

4、见总T淋巴细胞减少，CD4CD8比例失衡，B淋巴细胞增多。2.白血病免疫分型(如急、慢性淋巴细胞白血病)，选择治疗方案及判断预后有一定意义。,第四节 自身免疫性疾病的检查（autoimmune diseases）,自身免疫是指机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的现象。机体产生能与自身组织抗原发生反应的抗体即自身抗体。,(二)分类：,类 别 病名 自身抗原器官特异性 慢性甲状腺炎 甲状腺球蛋白微粒体 Graves病 甲状腺细胞表面TSH受体 Addison病 肾上腺皮质细胞 1型糖尿病 胰岛细胞 萎缩性胃炎 胃壁细胞 溃疡型结肠炎 结肠上皮细胞 原发性胆汁性肝硬化 胆小管细胞线粒体 重症肌无力

5、乙酰胆碱受体 多发性硬化症 髓鞘碱性蛋白 自身免疫性溶血性贫血 红细胞 特发性血小板减少性紫癜 血小板,病名 自身抗原 标志性抗体 类风湿性关节炎 变性IgG,核抗原 抗角蛋白抗体（AKA）干燥综合征 细胞核,唾液腺管 抗SSB抗体 SLE 胞核,胞质,RBC,PLT 抗Sm抗体 抗dsDNA抗体 混合性结缔组织病 细胞核（RNP）抗RNP抗体,非器官特异性,一、类风湿因子（rheumatoid factor,RF）,类风湿因子（RF）是抗变性IgG的自身抗体，主要为IgM，也可见IgG及IgA。RF主要出现在类风湿性关节炎患者，约7090的血清中和约60的滑漠液中可检出IgG类RF。,临床意

6、义：1.RA和风湿热间的鉴别。2.活动期与非活动期RA的诊断。3.为非特异性抗体。在SLE病人均有50RF阳性，在其他结缔组织病如SS、硬皮病、慢性活动性肝炎及老年人中均可有不同程度的阳性率。,(二)抗核抗体(antinuclear antibody ANA)是抗自身细胞核成分的抗体的总称,无器官和种属特异性,主要为IgG,但也可为IgA、IgD、IgM。由于核抗原不同,产生的抗核抗体也各异,主要有抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体和抗核仁抗体。,ANA荧光图形及临床应用,核型 抗原 ANA 主要相关疾病 均质型H DNA和组蛋白 抗DNA、组蛋白、DNP SLE 斑点型S RNP，S

7、m抗原 抗Sm、RNP、SSB、PCNAMCTD 核膜型M 天然或变性DNA 抗dsDNA 活动期SLE 核仁型N 低分子量RNA 抗RNA、抗PMScl 硬皮病,（三）抗双链DNA抗体（antidoublestrandedDNA，antidsDNA）,抗dsDNA是SLE患者的特征性标志抗体，其抗体滴度与疾病的活动程度呈正相关。其判断SLE的特异性可达95100，但敏感性仅为3050，因此其阴性不能排除SLE的诊断。,(四)抗中性粒细胞胞质抗体（antineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA）,是一组以中性粒细胞胞质成份为靶抗原,是系统性血管炎的血清标志

8、性抗体。其主要有两型：胞质型(cytoplasmic,cANCA)核周型(perinuclear,pANCA),临床应用（1）原发性小血管炎的特异性血清标志物。（2）诊断疗效观察，病情活动和复发的一项重要指标。,（五）抗平滑肌抗体antismooth muscle antibody ASMA,是以平滑肌中的肌动蛋白为靶抗原而产生的抗体。临床应用（1）ASMA是自身免疫性肝炎的血清学标志抗体，主要为IgG型。（2）鉴别诊断：原发性胆汁性肝硬化与肝外胆汁淤积、药物肝病、病毒性肝炎区别。,（六）抗乙酰胆碱受体抗体（antiacetylcholine receptor AchR）抗骨骼肌抗体（anti

9、-skeletal muscle antibody ASMA）,临床意义：(1)AchR可与横纹肌细胞的chR结合,是重症肌无力的标志性自身抗体。(2)ASMA常见于成年型重症肌无力。,（七）抗胰岛细胞抗体anti-pancreatic islets autoantibody;APICA,临床意义：1型糖尿病90以上主要为IgG也可见IgM、IgE。,（十）抗甲状腺自身抗体检查anti-thyroglobulin antibody;anti-TGAb,抗甲状腺胶体成分抗体：抗甲状腺球蛋白（TG）主要为IgG 抗滤泡上皮细胞的抗体：抗甲状腺微粒体（TM）抗甲状腺细胞膜和核组分的抗体。,临床意义：

10、可见于桥本氏甲状腺炎（78），甲亢（35），原发性甲低（52），40岁以上女性（18）。,第24章 第三节 病毒性肝炎血清标志物检测 P461,病毒性肝炎的病原体主要为肝炎病毒。目前已明确的肝炎病毒有：HAV、HBV、HCV、HDV、HEV以及HGV等。病毒性肝炎血清标志物包括：肝炎病毒本身、组成该病毒的成分以及抗病毒抗体等。,一、甲型肝炎病毒检测（Hepatitis A virus、HAV）,甲型肝炎病毒是一种微小核糖核酸病毒，无包膜，核心为单股正链RNA。HAV为甲型病毒性肝炎的病原体，主要通过粪口途径传播。临床表现为急性黄疸肝炎。,标志物名称 检测方法 参考值 抗HAV-IgM ELIS

11、A 阴性 抗HAV-IgG ELISA 阴性 抗HAV-IgA ELISA 阴性 HAV-RNA RT-PCR 阴性,检测方法与参考值,临床意义,抗HAV-IgM在HAV感染后1-2周内出现，为急性甲型肝炎的诊断指标之一。抗HAV-IgG是一种保护性抗体，阳性表示过去曾受过HAV感染，可用于甲肝的流行病学调查。,二、乙型肝炎病毒标志物检测（hepatitis B virus，HBV）,1963年美国肿瘤研究所在澳大利亚首先发现。1970年英国Dane在电镜下首先观察到乙肝病毒颗粒，称为Dane氏颗粒。1972年瑞典人Magnius发现e抗原为一种可溶性抗原。在HBV核心的表层,二、乙型肝炎实验

12、室检查目的 1.明确乙型肝炎诊断 2.了解和研究乙型肝炎的流行病学调查 3.估价病情和主动免疫的效果，观察疗效，判断预后 4.排除HBsAg（+）的献血员（选择健康供血者）,机体感染HBV后产生不同的抗原抗体系统表面抗原抗体系统(HBsAg，抗HBs)核心抗原抗体系统(HBcAg，抗HBc)e 抗原抗体系统(HBeAg，抗HBe),检测方法与参考值,临床意义,HBsAg：1.乙型肝炎具有传染性的标志之一。2.乙肝，肝硬化，肝癌发展演变有内在联系。3.血液病患者，反复输血检出率高。4.乙肝携带者：男性女性，我国携带者约8%。抗-HBs：阳性表示既往曾感染过HBV，现已恢复；接种乙肝疫苗后；被动性

13、获得抗-HBs,HBeAg:阳性表明 患有乙型肝炎，是病毒复制活跃，传染性强的指标，且HBeAg持续阳性的乙型肝炎，易转变为慢性肝炎,肝硬化。抗-HBe：意味着 HBV部分被清除或抑制，复制减少，传染性降低.但慢性肝炎,肝硬化阳性率高,抗-HBc IgM：是诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标，并提示病人血液有强传染性。抗-HBc IgG：是既往感染过HBV的指标，具有流行病学的意义。(非保护性抗体),乙型肝炎病毒血清标志物的综合评价,(1)(2)(3)(4)(5)急性或慢性乙型肝炎，高传染性 急性、慢性乙型肝炎或慢性HBsAg携带者 急性乙肝趋向恢复或慢性乙肝，弱传染性 急性HBV感染康

14、复期或既往感染 乙肝恢复期，弱传染性 急性HBV感染“窗口期”，或既往曾感染过乙肝 接种HBV疫苗或HBV感染后康复 急性乙肝康复期，开始产生免疫力 无HBV感染,三、丙型肝炎病毒标志物（hepatitis C virus，HCV),丙型肝炎病毒由核心和包膜组成，核心含有单链正股RNA，包膜由结构蛋白和非结构蛋白区域组成。血液为其主要传播途径。病情虽较乙型肝炎轻，但更易转为慢性。,检测方法与参考值,标志物 检测方法 参考值 抗-HCV ELISA 阴性 抗-HCV IgM ELISA 阴性 抗-HCV IgG ELISA 阴性 HCV-RNA RT-PCR 阴性,临床意义,名称 临床意义抗-H

15、CV：一种非保护性抗体，阳性是诊断 HCV感染的重要依据。抗-HCV IgM 是丙型肝炎活动和具有传染性的 指标，常见于急性HCV感染。抗-HCV IgG 阳性表明体内有HCV感染。,临床意义,HCV-RNA：阳性提示 HCV复制活跃,传染性强。血清中HCV-RNA 水平可作为治疗的选择以及疗效观察的指标。,（四）丁型肝炎（hepatitis D virus，HDV),（一）临床特点：HDV属单股环状缺陷性负链RNA卫星病毒，以HBSAG为外膜，因而其感染需要HBV为辅助病毒。2人感染丁型肝炎病毒后，可表现为两种临床感染类型，即，HBV/HDV联合感染或重叠感染。,HBV/HDV联合感染时感染

16、自限，呈现急性过程。转为慢性率为5%。HBV/HDV重叠感染多发生于慢性HBV感染者，致使慢性肝炎病情加重，较易形成暴发性肝炎。,（二）检测指标：抗HD是诊断指标，受HDV感染2周后即可产生抗HD-IGM，一个月后达高峰，随后迅速下降。抗HD-IGG出现迟缓。抗HD不能清除病毒，丁型肝炎发展为慢性时，抗HD-IGM和IGG常持续高效价。,（五）戊型肝炎（hepatitis E virus，HEV),HAV的基因结构为单股正链RNA。经口感染 为自限性传染病，临床表现、转归和预后均酷似甲型肝炎，便孕妇死亡率高。,4HEV感染机体后，潜伏期一般2-9周在急性期能产生IGM抗体，该抗体具有中和病菌毒作用，随后出现抗HEV-IGG升高，经6个月后开始中消失。,思考题：,1.甲肝的确诊指标是什么？2.乙型肝炎三对抗原抗体系统的临床意义？3.乙肝两对半指什么？请写出代号？4.试述免疫球蛋白的检测方法及临床意义？5.补体检测实验有哪些？临床意义如何？6.细胞免疫的检测有哪些些项目？各有何意义,谢谢！,