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1、,两个细胞正在融合,受精作用,2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,学习目标一：动物细胞融合（细胞杂交）,1、概念：,2、结果：,形成单核的杂交细胞,3、原理：,细胞膜的流动性,4、诱导方法,“2个或多个动物细胞”“1”、“杂交单核细胞”,思考：为什么细胞融合过程中使用的病毒 需要灭活？不灭活行吗？,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话病毒会感染细胞，导致疾病。,灭活丧失感染性，但保留融合活性。,用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程：,5、过程：,动物细胞A动物细胞B,1个完整的杂交细胞AB,6、意义：,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生

2、物新品种培育等的重要手段；为制造单克隆抗体开辟了新途径。,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。,7、应用：,强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞,抗体：能够与抗原发生特异 性结合的免疫球蛋白。,效应B细胞(浆细胞）,记忆B细胞,学习目标二：单克隆抗体,能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。,抗体的传统生产方法:,抗原,反复注射动物,从动物的血清中分离抗体,该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。,如何解决这个问题呢？,单克隆抗体（杂交瘤技术）,读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念,人们发现，动物在免疫反应的过程中，体内的

3、B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。,单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质 单一、特异性强的抗体。,资料分析,提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？,提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？,问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计 一个方案。,学习目标二：单克隆抗体,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,设计方案：,动物细胞融合技术,单克隆抗体,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞,1975年英国科学家米尔斯坦和柯

4、勒的实验,BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）,（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活,获得产生相应抗体的B细胞,（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。,单克隆抗体制备过程,注射抗原,单克隆抗体,思考：此过程利用的原理和技术有哪些？,免疫原理细胞融合技术动物细胞培养技术,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,原代,传代,50,1、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案,3、单克隆抗体的应用：,单克隆抗体的优点：,特异性强、灵敏度高、可大量制备,既

5、不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。,作为诊断试剂（最广泛的用途）：,准确识别各种抗原物质，并特异性结合,优点：,准确、高效、简易、快速,“生物导弹”单克隆抗体药物,获得杂种植株,用途,诱导方法,使细胞分散后诱导细胞融合,去除细胞壁后诱导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、植物细胞全能性,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,原理,比较植物体细胞杂交、动物细胞融合,获得杂种细胞、制备单克隆抗体,离心、电激、振动、聚乙二醇,离心、电激、振动、聚乙二醇灭活病毒,小结:,三个重点过程,三个“一”,一个诱导动物细胞融合的新方法 灭活病毒,一个新细胞 杂交瘤细胞,一个优势 单克

6、隆抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备的优势,P55：1、植物体细胞杂交技术与动物细胞 融合技术有什么不同？植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。,1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的 比较中，正确的是（）A、结果是相同的 B、杂种细胞的形成过程基本相同 C、操作过程中酶的作用相同 D、诱导融合的手段相同,B,2、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是：淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞 A、B、C、D、,C,