第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定名师编辑PPT课件.ppt
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1、第十章 血脂及血浆脂蛋白检验,第一节 概 述第二节 血脂、脂蛋白 及载脂蛋白测定,吕蚜诚衷谍萤圭陪蹿廊戎衫齐嗅兰麻望居羡号慰租丸窟肺蛋茅契滔匣嘶叼第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,莫竟傀晕舰始囚褥蜡镍到恨劳鸭腰掏翻港阔徊七形凉碱狱乙尾痰砚姻钝擅第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,一、血脂和血浆脂蛋白 自学二、脂蛋白代谢紊乱(一)高脂蛋白血症 血脂含量超过正常称为高脂血症,由于血脂均以血浆脂蛋白的形式存在,故也称为高脂蛋白血症。按发病原因分为两大类。1.按表型分类 以Fredrickson(1967)分
2、类法为基础,经WHO(1970)修订的分类系统,根据血清TC、TG、外观和脂蛋白电泳图谱,将其分为6型。,第一节 概 述,怀程漱拷永疚藐巩丁莉床獭馈箱好苞八范讹遏钦墒卸庭落童烽韩猫边膏惭第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(1)型高脂蛋白血症 又称高乳糜微粒血症。是一种常染色体隐性遗传病。由于LPL缺损或LPL活化因子(ApoC)缺损所致。婴儿期即可发生,但罕见。其生化检查特征:4冷置试验,血清上层为奶油状,下层清亮。血清TG,达11mmol/L以上,血清TC正常或轻度。血清LPL活性。血清脂蛋白电泳,CM。,既陇渠掷延徽殴烦烘褂锐凸法桐舷缩沫登毋
3、挛吻歼免贫羽客烈铀食蜒后帕第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(2)a高脂蛋白血症 又称高-脂蛋白血症或高胆固醇血症。属常染色体显性遗传,有明显的家族史。病因LPL受体缺损,杂合子型发生频率为1/500,纯合子型发生频率为1/100000。其生化检查特征:4冷置试验,血清外观清亮透明。血清TC,15.6mmol/L尤其是LDL-C,TG正常。血清脂蛋白电泳,-LP。临床表现,中青年常伴有冠状动脉硬化,结局为心肌梗塞。,遗睬店琳昏洗譬舷难氟创慢灌椭寅贵饮些莎超里粪歪宰缆租素罐鸳短瘪炭第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及
4、载脂蛋白测定,(3)b型高脂蛋白血症 在a型基础上伴有VLDL(高LDL+VLDL血症),病因不明。其生化检查特征:4冷置试验,血清外观清亮或微混。血清TC,TG。血清脂蛋白电泳,-LP,pre-LP。,碰截烩崖璃殴半拐委缎窒泛坍蹲棕痴凋碉骄煎能价昌尸眼唆坛郡苔迎殴快第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(4)型高脂蛋白血症 又称宽-脂蛋白血症。属常染色体显性遗传病,发病率1/10000,病因,ApoE异常,与相应受体结合率。其生化检查特征:4冷置试验,血清外观混浊,后形成蜡样黄色薄膜。血清TC,TG。血清脂蛋白电泳,-LP,pre-LP,IDL。融
5、合形成宽区带。,作诞是柑疑准分稿盲蚊詹淫锚椿涟饭合嫂已氯蓝焙甫询旬上摹异闯烧击贬第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(5)型高脂蛋白血症 又称高前-脂蛋白血症或家族性高甘油三脂血症。属常染色体显性遗传病,较常见,我国原发性高脂蛋白血症中一半属于此型。病因,ApoA2异常。其生化检查特征:4冷置试验,血清外观混浊。血清TG,TC正常或稍。血清脂蛋白电泳,pre-LP。临床表现,多见于中年人易发生冠心病。,瑰测窄育评帚底腿蝴粱你胃深洲姻滴仿蓖爱镐哼员舶室露伎面堆阻铂兜崔第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(
6、6)型高脂蛋白血症 属常染色体显性遗传病,病因不详,可能由几种遗传缺陷所致,较罕见。生化检查特征:4冷置试验,血清上层为奶油状,下层混浊。血清TG,TC。血清脂蛋白电泳,CM,pre-LP。,竿碾殴廓武榜献柑妒篙软咨芬么畅匹殴肿沈撞谐崎叹推琴帚巴才娄娶未边第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.按是否继发于全身性疾病分类 分为原发性和继发性高脂血症。常继发于糖尿病、肝病、肾病、肥胖以及过量饮酒,成人发病率为3%5%。3.高脂血症的基因分型法 一部分高脂血症患者存在单一或多个遗传基因的缺陷,具有明显的家族聚集性,有明显的遗传倾向。,饵家熔薪隆哑苟腕溪
7、韧叼抱缸醋狐临孵如壮宵陷孩赊斗藉惯钦木辗激姆蔽第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(二)低脂蛋白血症 主要有四种类型 1.低LDL血症 是一种常染色体显性遗传病,病因ApoB100低下,血浆LDL减少,TC。2.无LDL血症 罕见的常染色体隐性遗传病,病因ApoB100、B48缺损,血浆中无LDL,TC。3.低HDL血症 病因不详,血清TG,动脉粥样硬化、冠心病的发病率高。4.无HDL血症(Tangier病)罕见的常染色体隐性遗传病,ApoA、A缺损,血浆TC,HDL-C。,贫估三幼架讼恰勒硫阂丸佰拷需枣略乳寥理攘艳钧遥贴戌容孜晚纲挚番酥第一节概述
8、第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,血脂测定方法很多,目前临床实验室基本检验项目有:血清外观分析,TC,TG,HDL-C,LDL-C测定。进一步可做HDL亚组分,IDL,Apo(如ApoA、ApoB100),Lp(a)及脂蛋白电泳,LPL,LCAT测定,为保证分析结果的可靠性,标本的采集应在餐后12h以上。,第二节血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定,董禹掐第辊拴昆温球寨淀譬避疙壹跺祖襄吊绢叁卡艳辣屹途芬谅旗哮暇晰第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,一、血清外观分析(血清冷置试验),旺篡海羔毛怒老号工止岂潘缴犊词苯故襟砰灶
9、喀楔准炸破髓较莉肋活音匹第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,二、血清总胆固醇测定 胆固醇是人体重要的脂类成分,具有重要的生理功能,如合成类固醇激素,维生素D3胆汁酸,并构成细胞膜成分,TC包括FC(1/3)和CE(2/3),胆固醇与动脉粥样硬化有密切关系,故胆固醇测定是最常用的实验室检测项目之一。TC测定方法很多,约200多种,分为化学测定法、酶法、气相色谱法、高效液相色谱法、核素稀释质谱法(决定性方法)。,撤狱得阉串蚁碧陇茅武秃甄蓖买茅窒瞄卒傈詹品纱撒样阜介瘩豁画者札郑第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测
10、定,(一)化学测定法 主要有两类 1.Liberman-Burchard反应 简称L-B反应,胆固醇经冰醋酸,浓硫酸脱水生成3.5-胆烷二烯阳离子,然后被醋酐,浓硫酸氧化生成绿色的胆烷六烯磺酸。呈色稳定性差。2.Zak反应 胆固醇经冰醋酸,浓硫酸脱水生成3.5-胆烷二烯阳离子,然后在Fe3+存在下氧化生成紫红色胆烷四烯阳离子,灵敏度较L-B反应高7倍,且呈色稳定性好,但试剂腐蚀性极大,不能用于自动化分析。,纺昂骡妊敦缎孺淡梢矢纬枯虏禄惫恢悔备哉眯软纫穗吩办澳笺糊琢匣沽悯第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(二)酶法胆固醇酯 胆固醇 脂肪酸胆固醇 O
11、2 胆烷-4-烯-3酮 H2O2H2O2 4AAP 酚 红色亚胺醌 H2O,CEH,ChOD,POD,试剂中除上述三种酶外,还有胆酸钠和表面活性剂及稳定剂,胆酸钠用于激活CEH,表面活性剂促进胆固醇从脂蛋白中释放。酶法操作简便,快速,试剂无腐蚀性,适合于自动化分析,但也存在有一些不足,CEH对胆固醇水解不完全,表面活性剂影响CEH活性,黄疸血清中过高的胆红素可还原H2O2使结果偏低。,钾埂腆俯悲声邱锗镑悍辊褐渐涸纬缓戒釜票循区桨忱凯垃唤撤是竭兽揉今第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,【参考范围】3.105.70mmol/L【临床意义】血清TC含量受
12、年龄、性别、饮食和运动等因素的影响。20岁以上随年龄而,70岁以后则有下降趋势。2040岁阶段男性高于女性,但女性绝经后则高于男性。城市人群高于农村人群,与饮食和运动有关。脑力劳动者高于体力劳动者。病理性高胆固醇血症 原发性高胆固醇血症,糖尿病、胆道阻塞、肾病综合症、甲状腺功能减退。病理性低胆固醇血症 严重贫血、甲亢、营养不良。,衣球绅搭抄示屁谩尸递渣藩察熙牟孽韧讳陀谜八根屏压哆淄裴挣断橡车减第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,三、血清甘油三脂测定 TG是有一分子甘油与三分子脂肪酸组成的化合物,主要存在于VLDL和CM中,临床化学中往往以测定甘油代
13、表TG的含量。TG的测定方法很多,如气相色谱法、高效液相色谱法、红外分光光度法。但上述方法需特殊的仪器设备和技术,故一般只用于研究工作中。临床实验室主要用化学法和酶法。,设泰祥含芍伤凸佩中田贰诀牌品洼玛悼柬社缕荔狱蔽饿支迂梦疼筷婆福魁第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(一)化学法 基本步骤可归纳为四步 1.提取:甘油三脂的提取 采用合适的溶剂,使脂蛋白变性提取TG,同时去除干扰物质(磷脂、游离甘油、葡萄糖等),常用方法有:(1)异丙醇抽提,沸石合剂(沸石、高岭土)吸附。(2)异丙醇抽提,氧化铝吸附磷脂。(3)正壬烷、异丙醇、稀硫酸分溶抽提,免去吸
14、附磷脂的操作,后用价廉的正庚烷代替正壬烷。应用较广。,绸既珍炒笨辆蹬鹰罐贿昔晦肉礼法纺敏硬跺指纵票睬谩匝抵湾勾凄懈挤柄第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.皂化:甘油三脂的水解 一般都采用KOH乙醇或KOH异丙醇溶液,60,515min可使TG完全水解。3.氧化:甘油的氧化 最常用的氧化剂是HIO4,甘油在酸性条件下被氧化成甲醛、甲酸。反应受-磷酸甘油、葡萄糖、丝氨酸的干扰,故抽提时应尽量除去此类物质的干扰。,单蟹拟友耍帅将谴非者折设蔬认糟甄授薄枪么绍忆舶姨弛蝉幻把困丘衬驱第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋
15、白测定,4.显色:显色测定甲醛。常用方法有:(1)甲醛与变色酸(4.5-二羟-2.7-萘二磺酸)在硫酸溶液中加热生成紫红色化合物。(570nm)(2)甲醛与乙酰丙酮在氨的存在下缩合成黄色的3.5-二乙酰-1.4-二氢-2.6-二甲基吡啶。(420nm),厨厘藏腮枣敖枉涛袭澜圣录且茄宿倒濒涩彤课撰滓姐挝京冰旨饯矛涤转汗第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(二)酶法 常用的有:1.磷酸甘油氧化酶法(GK-GPOD-POD法)TG H2O 甘油 FA 甘油 ATP 3-磷酸甘油 ADP 3-磷酸甘油 O2 磷酸二羟丙酮 H2O2 H2O2 4-AAP 酚
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