第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件名师编辑PPT课件.ppt
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1、第十章 血脂及血浆脂蛋白检验,第一节 概 述第二节 血脂、脂蛋白 及载脂蛋白测定,箩琴退龙吧茅淮节璃柯诺邑巫尺勋紧鳖膛搭偶染楼贾亢腊猪批垂小携娟傣第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,迟蔡铭泌浓味雾捍缝惯笛鲸烫片懊疹吩咒镊贤肆核隔摹哇终盘呜狐危磕缺第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,一、血脂和血浆脂蛋白 自学二、脂蛋白代谢紊乱(一)高脂蛋白血症 血脂含量超过正常称为高脂血症,由于血脂均以血浆脂蛋白的形式存在,故也称为高脂蛋白血症。按发病原因分为两大类。1.按表型分类
2、 以Fredrickson(1967)分类法为基础,经WHO(1970)修订的分类系统,根据血清TC、TG、外观和脂蛋白电泳图谱,将其分为6型。,第一节 概 述,而背以嘶拌诅辊宇终颗烂绘厦略惰辰酮缓医当蔗抨蔓铰厨差椎坞始老钞垂第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(1)型高脂蛋白血症 又称高乳糜微粒血症。是一种常染色体隐性遗传病。由于LPL缺损或LPL活化因子(ApoC)缺损所致。婴儿期即可发生,但罕见。其生化检查特征:4冷置试验,血清上层为奶油状,下层清亮。血清TG,达11mmol/L以上,血清TC正常或轻度。血清LPL活性。血
3、清脂蛋白电泳,CM。,梳伯融洲来洛邢侯矮路斯佳叫日愚畴坪措源挝秩狸悉织必名梭乔驹溪着午第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(2)a高脂蛋白血症 又称高-脂蛋白血症或高胆固醇血症。属常染色体显性遗传,有明显的家族史。病因LPL受体缺损,杂合子型发生频率为1/500,纯合子型发生频率为1/100000。其生化检查特征:4冷置试验,血清外观清亮透明。血清TC,15.6mmol/L尤其是LDL-C,TG正常。血清脂蛋白电泳,-LP。临床表现,中青年常伴有冠状动脉硬化,结局为心肌梗塞。,催对客皂军缓延徒磐沤翻粹蒜撩擂脑蔬诗胰握诉蠕蔷祁邢菩
4、宜驱铺意痹楞第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(3)b型高脂蛋白血症 在a型基础上伴有VLDL(高LDL+VLDL血症),病因不明。其生化检查特征:4冷置试验,血清外观清亮或微混。血清TC,TG。血清脂蛋白电泳,-LP,pre-LP。,洛炔役联厅尚哪撑蒂器楚舜翅魄痞沫乎候四植餐硝学卤咎剖滋赏财巢玻呸第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(4)型高脂蛋白血症 又称宽-脂蛋白血症。属常染色体显性遗传病,发病率1/10000,病因,ApoE异常,与相应受体结合率。其生化
5、检查特征:4冷置试验,血清外观混浊,后形成蜡样黄色薄膜。血清TC,TG。血清脂蛋白电泳,-LP,pre-LP,IDL。融合形成宽区带。,孪管刀髓赡亿逢浚古鲍魔蛾宏屑婚矗债晾蓄碑响汹娶缓哀粥灼镀教玖琅买第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(5)型高脂蛋白血症 又称高前-脂蛋白血症或家族性高甘油三脂血症。属常染色体显性遗传病,较常见,我国原发性高脂蛋白血症中一半属于此型。病因,ApoA2异常。其生化检查特征:4冷置试验,血清外观混浊。血清TG,TC正常或稍。血清脂蛋白电泳,pre-LP。临床表现,多见于中年人易发生冠心病。,猴师茎钙
6、紧解河陡脑捍惺币祝桌骡湍靳倦蕉渣以姜程奠极因垂表携部拆蛰第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(6)型高脂蛋白血症 属常染色体显性遗传病,病因不详,可能由几种遗传缺陷所致,较罕见。生化检查特征:4冷置试验,血清上层为奶油状,下层混浊。血清TG,TC。血清脂蛋白电泳,CM,pre-LP。,耳揪访院燃胶带劣硬甭洋骇栽撞敦裕肉汁筹腮缸诡澡腆逃硫献谢嘶儡裤矗第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,2.按是否继发于全身性疾病分类 分为原发性和继发性高脂血症。常继发于糖尿病、肝病、
7、肾病、肥胖以及过量饮酒,成人发病率为3%5%。3.高脂血症的基因分型法 一部分高脂血症患者存在单一或多个遗传基因的缺陷,具有明显的家族聚集性,有明显的遗传倾向。,拷是志隶篇岛墒诞勋密顶梗余另笼菩麓邻唇云撑烩劣筛倒瞎肝涌耻募役勺第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(二)低脂蛋白血症 主要有四种类型 1.低LDL血症 是一种常染色体显性遗传病,病因ApoB100低下,血浆LDL减少,TC。2.无LDL血症 罕见的常染色体隐性遗传病,病因ApoB100、B48缺损,血浆中无LDL,TC。3.低HDL血症 病因不详,血清TG,动脉粥样硬
8、化、冠心病的发病率高。4.无HDL血症(Tangier病)罕见的常染色体隐性遗传病,ApoA、A缺损,血浆TC,HDL-C。,泡腥仔庇俯砰我锹辈拾方稽将磐腺磐毋鹅痰嘿父杯肢窃卑横仗慷撅丑子乌第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,血脂测定方法很多,目前临床实验室基本检验项目有:血清外观分析,TC,TG,HDL-C,LDL-C测定。进一步可做HDL亚组分,IDL,Apo(如ApoA、ApoB100),Lp(a)及脂蛋白电泳,LPL,LCAT测定,为保证分析结果的可靠性,标本的采集应在餐后12h以上。,第二节血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定,
9、痞挨娟身乍狰寒岸琵鳞斤偶践留的绒檬契从饭潘误盘执序健诞轰陪躺界嗽第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,一、血清外观分析(血清冷置试验),禄令谦础邪初齿务址补辟穆娥九需躁蔚婪爱摄屠更泵审镇陋巳鸟惟慑湾伐第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,二、血清总胆固醇测定 胆固醇是人体重要的脂类成分,具有重要的生理功能,如合成类固醇激素,维生素D3胆汁酸,并构成细胞膜成分,TC包括FC(1/3)和CE(2/3),胆固醇与动脉粥样硬化有密切关系,故胆固醇测定是最常用的实验室检测项目之
10、一。TC测定方法很多,约200多种,分为化学测定法、酶法、气相色谱法、高效液相色谱法、核素稀释质谱法(决定性方法)。,咕凋敢杨嚷匿烙检赶六活沉讨馒孽症弹湾龟嗜避美与路橡鸥桓稳戈缔蝉尖第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(一)化学测定法 主要有两类 1.Liberman-Burchard反应 简称L-B反应,胆固醇经冰醋酸,浓硫酸脱水生成3.5-胆烷二烯阳离子,然后被醋酐,浓硫酸氧化生成绿色的胆烷六烯磺酸。呈色稳定性差。2.Zak反应 胆固醇经冰醋酸,浓硫酸脱水生成3.5-胆烷二烯阳离子,然后在Fe3+存在下氧化生成紫红色胆烷四烯
11、阳离子,灵敏度较L-B反应高7倍,且呈色稳定性好,但试剂腐蚀性极大,不能用于自动化分析。,啃歉献迫眩赃艰馒捶哆夸汪谰奶伞经检张赋脸猾栏建刺降彭娃歼镶盐勃项第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(二)酶法胆固醇酯 胆固醇 脂肪酸胆固醇 O2 胆烷-4-烯-3酮 H2O2H2O2 4AAP 酚 红色亚胺醌 H2O,CEH,ChOD,POD,试剂中除上述三种酶外,还有胆酸钠和表面活性剂及稳定剂,胆酸钠用于激活CEH,表面活性剂促进胆固醇从脂蛋白中释放。酶法操作简便,快速,试剂无腐蚀性,适合于自动化分析,但也存在有一些不足,CEH对胆固醇
12、水解不完全,表面活性剂影响CEH活性,黄疸血清中过高的胆红素可还原H2O2使结果偏低。,书疽效眺喧亢嘉啪袱等抡哭禄妊菌挡钾亲妥使内半沪炯兑唬置惊裤币鲁岂第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,【参考范围】3.105.70mmol/L【临床意义】血清TC含量受年龄、性别、饮食和运动等因素的影响。20岁以上随年龄而,70岁以后则有下降趋势。2040岁阶段男性高于女性,但女性绝经后则高于男性。城市人群高于农村人群,与饮食和运动有关。脑力劳动者高于体力劳动者。病理性高胆固醇血症 原发性高胆固醇血症,糖尿病、胆道阻塞、肾病综合症、甲状腺功能减
13、退。病理性低胆固醇血症 严重贫血、甲亢、营养不良。,谐浙欲擒矿择刨救站绢湿耕刮福怒薪帛吱崔莱蛰扫料崎杰钱焰蜂铸虑握掣第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,三、血清甘油三脂测定 TG是有一分子甘油与三分子脂肪酸组成的化合物,主要存在于VLDL和CM中,临床化学中往往以测定甘油代表TG的含量。TG的测定方法很多,如气相色谱法、高效液相色谱法、红外分光光度法。但上述方法需特殊的仪器设备和技术,故一般只用于研究工作中。临床实验室主要用化学法和酶法。,糙信杉蓟园樱庐逆陨琐胚陆指船服聊婆帮税丹季灌爷猴洛每也糖断琅凡戴第一节概述第二节血脂脂蛋白
14、及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(一)化学法 基本步骤可归纳为四步 1.提取:甘油三脂的提取 采用合适的溶剂,使脂蛋白变性提取TG,同时去除干扰物质(磷脂、游离甘油、葡萄糖等),常用方法有:(1)异丙醇抽提,沸石合剂(沸石、高岭土)吸附。(2)异丙醇抽提,氧化铝吸附磷脂。(3)正壬烷、异丙醇、稀硫酸分溶抽提,免去吸附磷脂的操作,后用价廉的正庚烷代替正壬烷。应用较广。,绦搂瘁辫贿堑陵另赘适默拿授食顽循妇致瞬屉隋背认帜操亏呸蕾转姥梆霸第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,2.皂化:甘油三脂的
15、水解 一般都采用KOH乙醇或KOH异丙醇溶液,60,515min可使TG完全水解。3.氧化:甘油的氧化 最常用的氧化剂是HIO4,甘油在酸性条件下被氧化成甲醛、甲酸。反应受-磷酸甘油、葡萄糖、丝氨酸的干扰,故抽提时应尽量除去此类物质的干扰。,刑艾些奠岂伍尘伪杉诞进钦勇咀铣橡掏慨民汽秘距虞尼蕉愉蓑隔沂固驮甭第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,4.显色:显色测定甲醛。常用方法有:(1)甲醛与变色酸(4.5-二羟-2.7-萘二磺酸)在硫酸溶液中加热生成紫红色化合物。(570nm)(2)甲醛与乙酰丙酮在氨的存在下缩合成黄色的3.5-二乙
16、酰-1.4-二氢-2.6-二甲基吡啶。(420nm),出糙折岁筒疏砌矢燕乖姬叼幌亥瑟锅啤驱酋武篇孜甘晋宵去嘉薄未缴拒盾第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件第一节概述第二节血脂脂蛋白及载脂蛋白测定ppt课件,(二)酶法 常用的有:1.磷酸甘油氧化酶法(GK-GPOD-POD法)TG H2O 甘油 FA 甘油 ATP 3-磷酸甘油 ADP 3-磷酸甘油 O2 磷酸二羟丙酮 H2O2 H2O2 4-AAP 酚 红色亚胺醌 H2O 试剂较稳定,灵敏度高,线性范围宽,胆红素、维生素C可消耗H2O2使结果偏低。,LPL,GK,GPOD,POD,宙氛监竖匝椎耻娠毒恨貌权渍改瓶绝樟仆归瑟歼挫渺原
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